СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОСТРОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ

СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОСТРОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ


RU (11) 2284823 (13) C1

(51) МПК
A61K 31/714 (2006.01)
A61K 31/15 (2006.01)
A61P 39/06 (2006.01)
G09B 23/28 (2006.01) 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 05.10.2007 - действует 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2006.10.10 
(21) Регистрационный номер заявки: 2005139829/14 
(22) Дата подачи заявки: 2005.12.21 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2005.12.21 
(45) Опубликовано: 2006.10.10 
(56) Аналоги изобретения: Гуляев В.Г. и др. К механизму действия биофлавоноида леспефлана и антигипоксанта ТБ-4 на азотистый обмен у животных с острой почечной недостаточностью. Экспериментальная и клиническая фармакология, 1992, №4, с.20-22. RU 2266020 C2, 20.12.2005, описание. RU 2262337 C1, 20.10.2005, описание. US 6,288,116, 11.09.2001, описание. US 6,653,349,
25.11.2003, реферат. Конопля Н.А. Влияние рибоксина, эссенциале и филлохинона на иммуно-модулирующее и антиоксидантное действие лазерного и магнитно-лазерного облучения при токсическом поражении почек, вызванном гентамицином. Экспериментальная и клиническая фармакология, 2002, т.65, №1, с.58-61. Horl W.H. et al. Fat and renal failure-therapeutic aspects // Klin Wochenschr. 1982 Aug; 60(15):761-6, реферат, он-лайн [Найдено в Интернет на www.pubmed.com] [Найдено 03.03.2006], индекс Medline 7132229.

(72) Имя изобретателя: Лазарева Галина Анатольевна (RU); Денисюк Татьяна Алексеевна (RU); Гаврилюк Василий Петрович (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Лазарева Галина Анатольевна (RU) 
(98) Адрес для переписки: 305041, г.Курск, ул. К.Маркса, 3, КГМУ, патентный отдел, З.Н. Куприяновой 

(54) СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОСТРОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ
Изобретение относится к медицине, в частности к нефрологии и иммунологии, и касается коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальной острой почечной недостаточности. Для обеспечения такой коррекции последовательно внутривенно вводят фармакологические препараты милдронат и эссенциале в дозе по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов. Способ позволяет провести одновременную нормализацию нарушений иммунитета, энергетического статуса эритроцитов и таких биохимических показателей, как содержание макроэргических соединений, активность ферментов антиоксидантной системы, концентрация продуктов перекисного окисления липидов. 1 табл., 1 ил. 




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к медицине, в частности к нефрологии и иммунологии.

Нарушение функций иммунной системы является одним из ранних последствий возникновения острых форм патологии. Иммунологический конфликт играет важную роль в патогенезе острого и хронического гломерулонефрита. Для острой почечной недостаточности характерна трудно корригируемая иммуносупрессия. Причиной этого является усиление интенсивности перекисного окисления липидов клеточных мембран, нарушение их состава, структуры и энергетического гомеостаза. Указанные отклонения приводят к дестабилизации мембранных структур и снижению функциональной активности иммуноцитов и клеток их микроокружения.

Используемые лекарственные препараты и средства для терапии и профилактики острой почечной недостаточности зачастую не обеспечивают необходимого терапевтического эффекта, а летальность при лечении данной категории пациентов колеблется от 15 до 50%. Такой достаточно большой диапазон колебаний зависит не только от особенностей поражения почек, но и от состояния иммунологической реактивности организма в целом, что диктует необходимость поиска новых способов коррекции нарушений иммунитета при острой почечной недостаточности, прежде всего, в условиях эксперимента.

В настоящее время наиболее близким к изобретению является способ коррекции азотистого обмена у животных с острой почечной недостаточностью с использованием биофлавоноида леспефлана и антигипоксанта ТБ-4 (К механизму действия биофлавоноида леспефлана и антигипоксанта ТБ-4 на азотистый обмен у животных с острой почечной недостаточностью / В.Г.Гуляев, П.П.Денисенко, В.И.Глызин и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1992. - №4. - С.20-22).

Однако прототип имеет ряд недостатков: использование в лечении препаратов, эффект которых направлен только на повышение функции почек и нормализацию азотистого обмена, тогда как иммунометаболические нарушения, имеющие место при острой почечной недостаточности, остаются без коррекции, что усугубляет течение нефропатии (Афанасьев В.А. О механизме развития иммуносупрессии при острой почечной недостаточности / В.А.Афанасьев, И.Л.Ласкова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1997. - №3. - С.31-35).

Задачей изобретения является разработать способ коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности.

Поставленная задача достигается тем, что для коррекции нарушенных иммунометаболических показателей в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности используется комбинация фармакологических препаратов: эссенциале, фосфолипиды которого обладают заместительным эффектом в клеточных мембранах, а витамины активируют метаболические процессы, и милдронат, как активатор клеточного метаболизма, каждый из которых применяется последовательно внутривенно из расчета по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.

Изобретение поясняется чертежом: динамика иммунометаболических показателей экспериментальных животных с острой почечной недостаточностью, получавших фармакологические препараты по разработанной схеме (пунктирная линия), от уровня животных, не получавших их (сплошная линия), по сравнению с контролем (окружность).

Разработанная комбинированная фармакологическая методика острой почечной недостаточности в условиях эксперимента на крысах Вистар с помощью применения милдроната, обладающего активирующим влиянием на метаболизм клетки, и эссенциале, фосфолипиды которого обладают заместительным эффектом в клеточных мембранах, обеспечивает клетки макроэргическими соединениями в условиях патологии, обладает антиоксидантными свойствами, снижает содержание продуктов перекисного окисления липидов, повышает функциональную активность различных клеток, в том числе и иммуноцитов, что нормализует иммунологические показатели.

Способ осуществляется следующим образом.

После моделирования на крысах Вистар острой почечной недостаточности однократным внутрибрюшинным введением 2 мг/кг хлористой ртути (HgCl2) внутривенно последовательно вводятся милдронат и эссенциале в дозе по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.

Предложенная фармакологическая схема коррекции иммуно-метаболического статуса оказалась эффективной, т.к. совместное применение эссенциале и милдроната позволяет нормализовать показатели гуморального иммунного ответа, гиперчувствительности замедленного типа, функционально-метаболического статуса, содержание макроэргических соединений, активность ферментов антиоксидантной системы защиты и концентрацию продуктов перекисного окисления липидов.

Таким образом, комбинация эссенциале и милдроната в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности одновременно корригирует нарушения иммунитета, восстанавливает энергетический статус эритроцитов и биохимические показатели. Вследствие этого, в процессе лечения пациентов с острой почечной недостаточностью возможно достижение высокого терапевтического эффекта при включении в схему их лечения милдроната и эссенциале.

Пример 1.

Исследования проведены на 126 крысах Вистар массой 150-180 г. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатов группы формировали из 8-10 животных. В контрольные и опытные группы входили животные одного возраста, полученные из питомника одновременно. Разброс в группах по исходной массе не превышал ±10%. Все исследования проводили в одно и то же время суток с 8 до 12 часов. Животных выводили из опыта декапитацией под эфирным наркозом. Исследованию подвергали плазму, сыворотку крови, эритроциты, полинуклеарные лейкоциты, лимфоциты периферической крови, ткань селезенки и подколенных лимфатических узлов.

Для сопоставления результатов коррекции иммунометаболических нарушений при острой почечной недсотаточности по предложенной методике проведено исследование эффективности раздельного использования предлагаемых фармакологических препаратов эссенциале и милдроната.

Животные были разделены на 5 групп.

Первая группа (10 животных) - контрольная (без воздействия нефротоксического яда и применения препаратов).

Вторая группа (29 животных) подвергалась воздействию нефротоксического яда (однократное внутрибрюшинное введение 2 мг/кг хлористой ртути) для развития острой почечной недостаточности, которая манифестировалась повышением в крови содержания мочевины и креатина (у контрольных крыс содержание мочевины и креатина равнялась соответственно 136,4±12,8 ммоль/л и 12,7±1,6 ммоль/л, у отравленных - 268,5±34,2 ммоль/л и 27,9±3,1 ммоль/л).

Третья группа (28 животных) подвергалась воздействию нефротропного яда (хлористая ртуть) и инъекциям эссенциале в дозе 5 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.

Четвертая группа (30 животных) - введение хлористой ртути и милдроната в дозе 5 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.

Пятой группе животных (29 животных) на фоне острого поражения почек хлористой ртутью внутривенно последовательно вводились препараты милдронат и эссенциале в дозах по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.

В условиях острой почечной недостаточности происходит угнетение развития гуморального иммунного ответа (количество антителообразующих клеток) и гиперчувствительности замедленного типа (разница массы лимфоузлов) на эритроциты барана, снижается функционально-метаболическая активность нейтрофилов периферической крови (индекс активности и окислительный резерв), снижается содержание макроэргических соединений (аденозинтрифосфата и 2,3-бисфосфоглицерата) и активность одного из ферментов антиоксидантной защиты (супероксиддисмутаза), что приводит к накоплению продуктов перекисного окисления липидов (ацилгидроперекиси и малоновый диальдегид).

Таблица 1. 
Влияние эссенциале и милдроната на функционально-метаболическую активность нейтрофилов периферической крови, развитие гуморального иммунного ответа и гиперчувствительности замедленного типа, энергетический и антиоксидантный потенциал эритроцитов крыс с острым токсическим поражением почек 
Показатели иммунного и метаболического статусов Контроль Введение HgCl2 Введение HgCl2+эссенциале Введение HgCl2+милдронат 
1 2 3 4 
Индекс активности нейтрофилов 68,4±7,2 26,4±3,2* 1 38,1±4,3*1,2 40,3±4,7*1,2 
Окислительный резерв нейтрофилов, % 17,5±1,1 7,7±0,6* 1 12,3±0,9*1,2 13,4±1,0*1,2 
Антителообразующие клетки, 10 3/селезенку 26,8±3,1 10,5±1,3*1 19,6±2,3* 1,2 17,9±2,0* 1,2 
Разница массы лимфоузлов, мг 4,8±0,5 2,3±0,2* 1 3,5±0,3*1,2 3,7±0,4*1,2 
2,3-бисфосфоглицерат, мкмоль/мл эритроцитов 5,8±0,6 3,7±0,3* 1 3,8±0,4*1 4,7±0,5*1-3 
Аденозинтрифосфат, мкмоль/мл эритроцитов 1,7±0,2 0,8±0,1* 1 0,8±0,1*1 1,2±0,2*1-3 
Супероксиддисмутаза, ЕД/мл эритроцитов 56,6±3,1 43,5±2,2* 1 49,3±2,9*1 40,6±2,5*1,3 
Ацилгидроперекиси, D233 на 1 мл плазмы 1,5±0,2 3,4±0,4*1 2,0±0,3*1 2,8±0,4* 1-2 
Малоновый диальдегид, мкмоль/л 36,7±3,2 51,2±4,8*1 43,5±4,1* 1 50,6±4,2*1 


Применение эссенциале повышает, но не до контрольных значений, показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов и иммунной реактивности и не влияет на нарушенные биохимические показатели.

Инъекции милдроната животным, у которых экспериментальным путем смоделирована острая почечная недостаточность, корригируют нарушенные иммунные показатели, увеличивает содержание макроэргических соединений и снижает концентрацию ацилгидроперекисей, но не до контрольных значений.

Предложенная фармакологическая схема коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности статуса оказалась более эффективной, т.к. совместное применение эссенциале и милдроната позволяет нормализовать показатели гуморального иммунного ответа, гиперчувствительности замедленного типа, функционально-метаболического статуса, содержание макроэргических соединений, активность ферментов антиоксидантной системы защиты и концентрацию продуктов перекисного окисления липидов (см. чертеж).

Следовательно, комбинация эссенциале с милдронатом в дозах по 5,0 мг/кг веса внутривенно 5 раз через 12 часов в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности одновременно нормализует нарушения иммунитета, энергетический статус эритроцитов и биохимические показатели.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности, отличающийся тем, что последовательно внутривенно вводят фармакологические препараты милдронат и эссенциале в дозе по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 ч.