СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ РАННИХ И ПОЗДНИХ ФОРМ НЕЙРОСИФИЛИСА

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ РАННИХ И ПОЗДНИХ ФОРМ НЕЙРОСИФИЛИСА


RU (11) 2141660 (13) C1

(51) 6 G01N33/48 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 07.09.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 1999.11.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 98106148/14 
(22) Дата подачи заявки: 1998.04.02 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 1998.04.02 
(45) Опубликовано: 1999.11.20 
(56) Аналоги изобретения: 1. SU 1318913 A1, 23.06.87. 2. SU 879370 A, 07.11.81. 3. SU 1561043 A1, 30.04.90. 4. JP 5315133, 23.05.78. 5. Перхин Г.Д. Диагностические тесты в неврологии. - М.: Медицина, 1994, с.137-138. 
(71) Имя заявителя: Красноярская государственная медицинская академия 
(72) Имя изобретателя: Прохоренков В.И.; Гринштейн А.Б.; Родиков М.В.; Шапран М.В. 
(73) Имя патентообладателя: Красноярская государственная медицинская академия 
(98) Адрес для переписки: 660022, Красноярск, ул.Партизана Железняка, 1 Медицинская академия 

(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ РАННИХ И ПОЗДНИХ ФОРМ НЕЙРОСИФИЛИСА 

Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим методам диагностики различных форм нейросифилиса. Способ обеспечивает повышение точности дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса, ускорение и облегчение диагностического процесса, снижение экономических затрат на лабораторные исследования. Проводят определение уровня индуцированной перекисью водорода люминесценции нативной спинномозговой жидкости. Пробу цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) в объеме 1 см помещают в кварцевую кювету, не имеющую хемилюминесцентных свойств. Инициацию осуществляют путем добавления 5% раствора перекиси водорода в объеме 0,02 мл последовательно 3 раза в каждую кювету. Хемилюминесценцию ЦСЖ измеряют на серийном медицинском хемилюминометре CL 3604, предназначенном для исследования сверхслабых свечений биологически активных объектов в спектральной области 200 - 650 нм. В качестве детектора в установке используют 24-разрядный счетчик импульсов ФЭУ-85. Сигнал из ФЭУ считывается аналого-цифровым преобразователем, фильтруется от помех и посылается через последовательный интерфейс типа RS 232 в ПЭВМ, где средствами прилагаемого программного обеспечения строится кривая хемилюминесценции для каждой пробы. Графическую информацию подвергают математической обработке, рассчитывают максимальный показатель интенсивности хемилюминесценции (I max) и проводят сравнительный анализ. В случае сифилитического менингита (острого и подострого течения) максимум интенсивности ХЛ наблюдается в пределах от 250 имп/с и выше, при менинговаскулярном сифилисе 114 I max 250 имп/с. Поздние формы нейросифилиса характеризуются низким уровнем сверхслабого свечения, сопоставимого с контролем (Imax < 114 имп/с). 1 табл., 2 ил. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к области медицины, а именно к биофизическим методам диагностики различных форм нейросифилиса.

Существуют методы хемилюминесценции, используемые для диагностики опухолей спинного мозга: предлагается сравнивать интенсивность перекисной люминесценции спинномозговой жидкости после замораживания (Журнал невропатологии и психиатрии, т. 94, вып. 4, 1994 г., с. 30-33) или интенсивность люминесценции фотоиндуцированной спинномозговой жидкости (А. с. N 1318913 G 01 N 33/483, 1987 г. ) с критериальным значением люминесценции и по отношению к нему диагностировать экстра или интрамедуллярную опухоль.

Недостатки используемых методов заключаются в следующем: во-первых, интенсивность спонтанного сверхслабого свечения в спинномозговой жидкости больных нейросифилисом довольно мала (1-2 имп/с), что обусловлено низким уровнем свободнорадикального окисления в биосубстрате при этой патологии. Это препятствует четкой дифференциации различных форм нейросифилиса между собой и контролем. Предлагаемое фотоиндуцирование ликвора увеличивает интенсивность люминесценции незначительно (не выше 7-8 имп/с). Во-вторых, замораживание спинномозговой жидкости замедляет диагностический процесс и также способствует угнетению исходно низкой хемилюминесценции.

Цель изобретения - повышение точности дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса, ускорение и облегчение диагностического процесса, снижение экономических затрат на лабораторные исследования.

Поставленную цель решают за счет определения уровня индуцированной перекисью водорода люминесценции спинномозговой жидкости. Измеряют уровень максимальной интенсивности перекисной хемилюминесценции (Imax). Проведенные ранее эксперименты показали, что в случаях сифилитического менингита (острого и подострого течения) максимум интенсивности ХЛ наблюдается в пределах от 250 имп/с и выше, при менинговаскулярном сифилисе 114 Imax<250 имп/с. Поздние формы нейросифилиса характеризуются низким уровнем сверхслабого свечения, сопоставимого с контролем (Imax<114 имп/с).

Способ осуществляют следующим образом. Пробу цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) в объеме 1 см3 помещают в кварцевую кювету, не имеющую хемилюминесцентных свойств. Инициацию осуществляют путем добавления 5% раствора перекиси водорода в объеме 0,02 мл последовательно 3 раза в каждую кювету. Хемилюминесценцию ЦСЖ измеряют на серийном медицинском хемилюминометре CL 3604, предназначенном для исследования сверхслабых свечений биологически активных объектов в спектральной области 200 - 650 нм. Прибор выполнен в виде единого конструктива и работает под управлением ПЭВМ типа IBM PC-286 XT/AT. Кювету с исследуемой пробой помещают в термостатируемый барабан с температурой 37,00,5oC. В качестве детектора в установке используют 24-разрядный счетчик импульсов ФЭУ-85. В рабочем режиме установки напряжение питания для ФЭУ-85 составляет 1500 В, световая чувствительность фотокатода 910 exp-5, энергетический эквивалент собственных шумов 0,85 КЭВ. Число импульсов за интервал времени в режиме счета фотонов пропорционально количеству импульсов, испускаемых контрольным источником ядерного заряда за этот же промежуток времени (7300 имп/с). Сигнал из ФЭУ считывается аналого-цифровым преобразователем, фильтруется от помех и посылается через последовательный интерфейс типа RS232 в ПЭВМ, где средствами прилагаемого программного обеспечения строится кривая хемилюминесценции для каждой пробы. Время измерения одной точки хемилюминесцентной кривой составляло 0,1 с, минимальное число точек измерения на каждую кривую - 1, пауза между измерениями 0 с, общее время измерения ХЛ пробы - 120 минут. Графическую информацию подвергают математической обработке функцией полинома с коэффициентом фильтрации 10, после чего рассчитывают максимальный показатель интенсивности хемилюминесценции и проводят сравнительный анализ с установленными экспериментально значениями интенсивности для менингеальных, менинговаскулярных и поздних форм нейросифилиса.

Пример 1. Больной Е., 35 лет. Диагноз при поступлении: вторичный свежий сифилис. Жаловался на умеренную головную боль, тяжесть и шум в голове, преходящее головокружение, общую слабость. На фоне проводимого лечения пенициллином (курсовая доза 44 800 тыс. ЕД в/м) указанные жалобы сохранялись. После проведения перекисной хемилюминесценции спинномозговой жидкости больного (Imax = 315 имп/с) был диагностирован подострый сифилитический менингит, лечение скорректировано по методикам терапии нейросифилиса (курсовая доза 168 млн. ЕД в/м). В течение 3 дней наступил регресс менингеальной симптоматики.

Пример 2. Больная Л., 45 лет. Диагноз при поступлении: поздний скрытый сифилис. У больной отмечалась эмоциональная лабильность, повышенная забывчивость, постоянные головные боли, рассеянная микроорганическая симптоматика, шаткость при ходьбе. После проведения перекисной хемилюминесценции спинномозговой жидкости больной (Imax = 101 имп/с) был диагностирован поздний васкулярный сифилис мозга с дементным синдромом. Назначен курс лечения по методикам терапии позднего нейросифилиса.

Способ применен в клинике Краевого кожно-венерологического диспансера. Исследована инициированная перекисью водорода ХЛ ЦСЖ у 20 больных с нейросифилисом и у 5 лиц контрольной группы. Нейросифилис был представлен следующими формами: подострый сифилитический менингит - 8 больных; ранний менинговаскулярный сифилис - 7 больных; васкулярный сифилис мозга, прогрессивный паралич, спинная сухотка - 5. Анализ ЦСЖ проводился до начала специфической терапии, больные подбирались с учетом отсутствия отягощающих анамнез заболеваний и травм нервной системы. Диагноз нейросифилиса у всех больных подтвержден комплексным клинико-лабораторным обследованием. Результаты исследования представлены в таблице и наглядно отображены на фиг. 1. Выявлена сильная корреляционная связь между интенсивностью ХЛ и выраженностью воспалительных изменений СМЖ у больных нейросифилисом (см. фиг. 2).

Преимущества предлагаемого способа дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса заключаются в использовании нативной спинномозговой жидкости больных нейросифилисом, катализированной перекисью водорода, простоте выполнения, широкой доступности в лабораторных условиях (используется стандартная серийная аппаратура), возможности быстрого получения точных результатов, подвергающихся статистической обработке. Способ не требует затрат каких-либо дорогостоящих материалов (по сравнению с реакцией Ланге с использованием коллоидного золота), создания особых условий для анализа и позволяет провести исследование до 35 проб спинномозговой жидкости одновременно. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса путем исследования ликвора, отличающийся тем, что исследуют уровень индуцированной перекисью водорода люминесценции нативной спинномозговой жидкости, измеряют уровень максимальной интенсивности и при Imax 250 имп/с диагностируют сифилитический менингит (острый, подострый), при 114 Imax < 250 имп/с диагностируют менинговаскулярный сифилис, при Imax < 114 имп/с диагностируют поздние формы нейросифилиса (васкулярный сифилис мозга, прогрессивный паралич).