ИММУНОТРОПНЫЙ ПРЕПАРАТ

ИММУНОТРОПНЫЙ ПРЕПАРАТ "ВИТУЛИН"


RU (11) 2236248 (13) C2

(51) 7 A61K35/78, A61K35/64 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 18.07.2007 - может прекратить свое действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 2004.09.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 2001135264/15 
(22) Дата подачи заявки: 2001.12.27 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2001.12.27 
(43) Дата публикации заявки: 2003.08.27 
(45) Опубликовано: 2004.09.20 
(56) Аналоги изобретения: RU 2132689 C1, 10.07.1999. RU 2020946 C1, 15.10.1994. RU 2020942 C1, 15.10.1994. RU 2171284 С2, 27.07.2001. WO 92/00086, 10.06.1992. CN 1162415, 22.10.1997. DE 4111782, 15.10.1992. 
(72) Имя изобретателя: Тулев Ю.В. (RU); Тулева Н.П. (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Тулев Юрий Владимирович (RU); Тулева Надежда Павловна (RU) 
(98) Адрес для переписки: 193144, Санкт-Петербург, ул. 8-я Советская, 46, кв.2, Ю.В. Тулеву 

(54) ИММУНОТРОПНЫЙ ПРЕПАРАТ "ВИТУЛИН" 
Изобретение относится к фармакологии, а именно к средствам для профилактики и лечения вторичных иммунодефицитных состояний и хронических воспалительных процессов вирусной и бактериальной природы. Предложен иммунотропный препарат, представляющий собой экспрессный мед, полученный путем скармливания пчелам состава, включающего монофлерный мед семейства сложноцветных, содержащий 3-окси-флавон-силибин, флавоноидные фракции прополиса, экстракт солодки голой и экстракт растений семейства сложноцветных и дербенниковых в определенном соотношении. Препарат индуцирует эндогенный - и -интерферон, обладает высокой эффективностью при профилактике и лечении вирусных и бактериальных болезней. 2 з.п. ф-лы, 1 табл. 



ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к области медицины, ветеринарии, а именно к фармакологии, и может использоваться для профилактики и лечения вторичных иммунодефицитных состояний и при хронических воспалительных процессах вирусной и бактериальной природы.

Для профилактики и лечения заболевания большое значение имеет индукция эндогенного - и -интерферона. Эндогенный интерферон обладает большой биологической активностью, что проявляется в противовирусном, противоопухолевом, антипролиферативном и иммуностимулирующем действии.

Однако, в настоящее время в качестве индуктора эндогенного - и -интерферона используются ослабленные живые вирусы и вакцины, которые сами неблагоприятно воздействуют на организм.

Особенно остро встает этот вопрос при лечении хронических больных или аллергиков, которым требуется длительное лечение.

Поэтому в настоящее время возрастает интерес к природным препаратам, не обладающим токсичностью и вызывающим коррекцию иммунной системы.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому препарату является средство для орального применения, включающее экстракт левзеи, родиолы розовой и меда (патент СССР 1836094, А 64 R 35/64, 1993).

Известное средство повышает сопротивляемость организма к действию неспецифических повреждающих факторов.

Недостатком известных средств является активирование процесса клеточной пролиферации, которая в дальнейшем способствует опухолевой трансформации клеток. Кроме того, известные препараты содержат пыльцу, которая представляет собой сильнейший аллерген, и являются токсичными в больших дозах и при повторном применении.

Задачей изобретения является создание иммунотропного препарата, обладающего способностью индуцировать эндогенный - и -интерферон для профилактики и терапии инфекций, вызванных вирусами, простейшими, а также внутриклеточными микробами и грибами.

Поставленная задача достигается иммунотропным препаратом "ВИТУЛИН", представляющим собой экспрессный мед, полученный путем скармливания пчелам состава, включающего 98-25 мас.ч. монофлерного меда семейства сложноцветных, содержащего 3-окси-флавон-силибин, 98-25 мас.ч. экстракта растений семейства сложноцветных и дербенниковых, в частности мордовника шаровидного, 1-40 мас.ч. флавоноидных фракций прополиса, в частности прополиса березового, и 1-40 мас.ч. экстракта солодки голой с последующим фракционированием путем замораживания водного раствора меда до температуры -60С с последующим размораживанием до 15-30С. Дополнительно препарат может содержать микроэлементы Se, Mn, К, Са, Ag, Au, I.

Используемый монофлерный мед семейства сложноцветных содержит 10-20 мас.% 3-окси-флавон-силибина, не обладающего токсическим действием и тормозящим лектинин индуцированный митогенез. Известно, что 3-окси-флавон-силибин, содержащийся в экстракте чертополоха колючего, является нетоксичным (Т.Н.Драник, Ю.А.Гриневич, Г.М.Дизик. Иммунотропные препараты. - Киев, Здоровье, 1994, с.212).

Экологически чистый монофлерный мед очищают путем медленного замораживания водного раствора или раствора, дополнительно содержащего экстракт меда, с концентрацией не более 80 мас.%, постепенное изменение температуры позволяет удалить фракции, содержащие белки, вызывающие побочные негативные реакции, вызываемые компонентами неразрушенных пыльцевых зерен. Такая очистка позволяет получать фракции меда с полным отсутствием токсичности и аллергических реакций, проверенные в лабораторных условиях на белых мышах, морских свинках, кроликах и птицах, а также на крупных домашних животных при парентеральном введении. Наличие 3-окси-флавон-силибина в монофлерном меде подтверждают в опытах на цыплятах, чувствительных к заражению вирусом саркомы Рауса. Цыплятам с растущими опухолями вводят фракции пчелиного меда, содержащие 3-окси-флавон-силибин. Только при наличии 3-окси-флавон-силибина наблюдается рассасывание опухолей, уменьшение некроза. У подопытных цыплят в дальнейшем наблюдается сухой некроз и постепенное рассасывание опухолей.

Вторым компонентом предлагаемого препарата является экстракт корня солодки. Экстракцию биологически активных веществ осуществляют обработкой 70%-ным водным раствором этилового спирта корней солодки для полного отделения экстракта от пектинов, с последующим загущением в вакууме до содержания влаги не более 25%. Экстракт солодки содержит глицирризиновую кислоту. Гликопептиды глицирризиновой кислоты в дозах 2-5 мг/кг стимулируют выработку антител, пролиферацию Т- и В-лимфоцитов. Экстракт может содержать гликопептиды глицерризиновой кислоты до 30 мас.%.

Третьим компонентом препарата являются флавоноидные фракции прополиса березового, предпочтительно разведенные раствором хлорофилла вида “а” и “в”. Известно, что водорастворимый хлорофилл содержит порфириновые производные преимущественно в виде их комплексов с магнием (Шлык А.А. Проблемы биосинтеза хлорофиллов. - Минск, 1971). Прополис содержит большое количество фенольных структурно-родственных хелатообразующих соединений. Вероятно, фенольные соединения прополиса взаимодействуют с порфириновыми комплексами, включающими магний или металлы переменной валентности, с образованием хелатных соединений, предотвращающих запуск опухолевой трансформации клеток.

Препарат может дополнительно содержать комплекс витаминов, содержащий по меньшей мере витамины А, Е, РР, F и микроэлементы, включающие, как правило, I, Mg, Se, Zn, Ni, Fe. Предпочтительно используется комплекс витаминов и микроэлементов, содержащийся в березовом прополисе.

Необходимо отметить, что смесь компонентов препарата по изобретению обладает более выраженным бактериостатическим, антипролиферативным, антивирусным действием, чем отдельные компоненты. Особенностью препарата является ярко выраженная способность индуцировать эндогенный интерферон, в особенности - и -интерферон. Препарат активирует макрофаги и естественные киллеры, обладает противоопухолевым действием.

Кроме этого, отдельные компоненты препарата разрушаются при длительном хранении, теряя при этом свою биологическую активность. Однако смесь этих же компонентов сохраняется в течение нескольких лет в активном состоянии.

Изобретение иллюстрируется нижеприведенными примерами.

Пример 1

В монофлерный зрелый мед семейства сложноцветных, соответствующий ГОСТ 19792-74, содержащий в своем составе 3-окси-флавон-силибин, добавляют до 30 мас.ч. экстракта корней солодки голой.

Экстракт получали экстрагированием корней солодки голой 70%-ным водным раствором этилового спирта до полного отделения пектинов с последующим загущением экстракта в вакууме до содержания влаги не более 25%.

Одновременно добавляют в монофлерный мед до 20 мас.ч. флавоноидных фракций прополиса.

Полученную смесь постепенно скармливают отобранным пчелиным семьям на изолированной пасеке.

Далее осуществляют фракционирование. Помещают полученный состав в специально изготовленные сосуды, в которых обеспечивается равномерное замораживание и отбор необходимых проб. Замораживание осуществляют до -40С. Затем осуществляют медленное размораживание до температуры +18С. Первые фракции, содержащие белок, не используют.

Препарат согласно изобретению представляет собой фракции экспрессного меда, содержащие 3-окси-флавон-силибин, экстракт солодки голой, содержащий гликопептиды глицерризиновой кислоты, флавоноидные фракции прополиса, экстрат растений семейства сложноцветных и дербенниковых.

Пример 2

Для приготовления препарата по изобретению использовали 50 мас.ч. монофлерного пчелиного меда, содержащего 3-окси-флавон-силибин, 30 мас.ч. экстракта солодки голой, содержащей гликопептиды глицерризиновой кослоты, 20 мас.ч. флавоноидных фракций березового прополиса. Дополнительно вводили в состав 30 мас.ч. хлорофилла в расчете на 100 мас.ч. смеси.

Полученную смесь три раза скармливают пчелам, последующее фракционирование осуществляют путем замораживания со скоростью -1С/ч до температуры -60С и размораживания со скоростью 1С/ч до температуры 30С. Первые фракции, содержащие белок, не использовали.

Пример 3

К препарату, полученному согласно примеру 1, добавляют комплекс витаминов, включающий витамины А, Е, РР и F и микроэлементы Mg, Se, Ca, Zn, Ni, Fe в количестве, обычно используемом в таких препаратах.

Для препаратов, полученных согласно примерам 1-3, проводили определение цитотоксических и ингибирующих опухолевые вирусы доз in vitro в субкультуре клеток куриных эмбриональных фибробластов, зараженных типовыми штаммами вируса саркомы Рауса, а также количество интерферона в сыворотке крови телят. Культивирование клеток куриных эмбриональных фибробластов первой генерации с установленным фенотипом с/о (чувствительные к заражению онкогенными вирусами) проводили с использованием среды роста субкультур клеток на основе среды Игла и триптозофосфатного бульона “Дифко” при рН 6-8.

Для стандартизации препарата по данным 5-7 опытов устанавливали методом разведения препарата следующие дозы:

1. Цитотоксическая доза должна быть не ниже 125 мкг/мл (ЦТД 50/мл).

2. Ингибирующая опухолевую трансформацию клеток доза (индекс ингибиции) должна быть не ниже 1,30,2 lg ОД 50/мл (онкогенных доз).

3. Концентрация экстракта цветущих растений семейства сложноцветных - в пределах 125 мкг/мл.

4. Количество интерферона, в том числе - и -интерферона в сыворотке крови подопытных животных, должно быть в два раза больше по сравнению с исходным.

Пример 4

Больная Н., 46 лет, диагноз при поступлении - трихомоноз, гарднереллез, кандидоз, подтвержденные лабораторными исследованиями. Проведен курс активной неспецифической иммунотерапии в течение 40 суток. Неприятных ощущений не наблюдали. В результате отмечена положительная клиническая динамика, исчезновение клинических признаков болезни и интоксикации. Использовали препарат по изобретению, согласно примеру 2 в дозе 0,02 мл/кг с интервалом в двое суток. Наступило стойкое улучшение.

Пример 5

Больная С., 45 лет, диагноз при поступлении - дисбактериоз после переболевания венерическими болезнями. Отмечались выраженные признаки интоксикации организма. Применен курс активной неспецифической иммунотерапии в течение 45 суток. Неприятных ощущений не наблюдали. В результате длительной иммунотерапии отмечали положительную клиническую динамику, исчезли признаки интоксикации, нормализовалась микрофлора кишечника и влагалища. Использовали препарат по изобретению, полученный согласно примеру 1 в дозе 0,2 мл/кг с интервалом в двое суток. Для разведения препарата готовили разбавитель, включающий апирогенную ионообменную воду, микроэлементы Mn, Cu, Zn, Co, Cr, Al, Se, Ni, I, макроэлементы К, Са, Mg, Fe, флавоноидные фракции прополиса, экстракт череды трехраздельной, до 10 мас.ч. на 100 мас.ч. воды.

Пример 6

Больной В., 50 лет, диагноз при поступлении - дисбактериоз, интоксикация после переболевания венерическими болезнями. Применен курс активной неспецифической иммунотерапии в течение 45 суток. Неприятных ощущений не наблюдали. Отличали положительную клиническую динамику, исчезли признаки интоксикации, нормализовалась микрофлора кишечника. Использовали препарат по изобретению, полученный согласно примеру 1 в дозе 0,02 мл/кг с интервалом в двое суток. Неприятных ощущений не отмечали.

Пример 7

Проверка эффективности заявляемого препарата и сходных с ним препаратов проводилась при лечении и профилактике иммунодефицитных состояний организма при хронических венерических болезнях, сопровождающихся дисбактериозом. Лечение проводили на двух группах больных по 15 человек каждая+контрольная группа с иммунодефицитным состоянием. Результаты исследований приведены в таблице.

Первая группа больных - парентеральное введение иммунотропного препарата в дозе 0,02 мл/кг в течение 45 дней с интервалом в двое суток.

Вторая группа - назначался заявляемый иммунотропный препарат в аналогичных дозах+традиционные методы лечения.

Третья группа - контроль, назначались традиционные методы лечения.

У всех больных до и после активной иммунотерапии была взята кровь и проведены иммунологические исследования на основные показатели:

a) иммунорегуляторный индекс;

b) фагоцитоз в нейтрофилах;

c) фагоцитарный индекс (фагоцитарная активность нейтрофилов).

Больные в опыте и контроль были подобраны по одинаковым показателям - снижение ниже нормы основных критериев иммунологической реактивности.

Из таблицы видно, что в первой и второй группах больных иммунорегуляторный индекс (отношение Т хелперов к Т супрессорам) был в пределах нормы (42). В то же время в контрольной группе больных (традиционные методы лечения, лечение антибиотиками) иммунологические показатели не изменились. Фагоцитоз в нейтрофилах был в пределах нормы (7020), и фагоцитарный индекс в нейтрофилах также был в пределах нормы (62). Иммуноглобулины были в пределах нормы, что говорит о завершенности инфекционного процесса.

В контрольной группе больных с традиционными методами лечения наблюдали снижение основных показателей иммунологической реактивности, в то же время повышены уровни иммуноглобулинов IgA, IgG, что говорит о незавершенности инфекционного процесса.



Как видно из примеров, назначение иммунотропного препарата "ВИТУЛИН" больным с хроническими инфекционными болезнями является целесообразным. Снижается количество осложнений и наступает завершенность инфекционного процесса.

Препарат "ВИТУЛИН" обладает высокой эффективностью при профилактике и лечении вируснных и бактериальных болезней, в особенности, которые не поддаются традиционным методам лечения. Особенно эффективен препарат при терапии латентных инфекций, вызванных внутриклеточнными возбудителями. Препарат активирует гуморальный и клеточный иммунитет в 2-3 раза и повышает защитные силы организма и нормализует функцию печени, препарат получен из природного сырья и является экологически чистым.

Препарат может использоваться как для парентерального, так и для орального, наружного и местного применения (интранозального, конъюнктивального, вагинального). 



ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


1. Иммунотропный препарат, индуцирующий эндогенный - и -интерферон, характеризующийся тем, что он представляет собой экспрессный мед, полученный путем скармливания пчелам состава, включающего монофлерный мед семейства сложноцветных, содержащий 3-окси-флавон-силибин, флавоноидные фракции прополиса, экстракт солодки голой и экстракт растений семейства сложноцветных и дербенниковых в количестве, мас.ч.:

Монофлерный мед семейства

сложноцветных,

содержащий 3-окси-флавон-силибин 25-98

Флаваноидные фракции прополиса 1-40

Экстракт растений семейства

сложноцветных

и дербенниковых 25-98

Экстракт солодки голой 1-40

с последующим фракционированием путем замораживания водного раствора полученного меда до температуры -60С и размораживанием до 15-30С.

2. Иммунотропный препарат по п.1, отличающийся тем, что состав дополнительно содержит в качестве флавоноидных фракций прополиса фракции прополиса березового.

3. Иммунотропный препарат по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно содержит микроэлементы Se, Mn, К, Са, Ag, Au, I.