СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 2-ФОРМИЛБЕНЗИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 2-ФОРМИЛБЕНЗИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ


RU (11) 2039063 (13) C1

(51) 6 C07F9/38, C07F9/40, A61K31/66, A61K31/685 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 27.09.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 1995.07.09 
(21) Регистрационный номер заявки: 4894049/04 
(22) Дата подачи заявки: 1990.12.20 
(31) Номер конвенционной заявки: P 3942318.2 
(32) Дата подачи конвенционной заявки: 1989.12.21 
(33) Страна приоритета: DE 
(45) Опубликовано: 1995.07.09 
(56) Аналоги изобретения: M.J.Wood, A.M.Geddes, The Lancet, 1987, p.1189. Патент США N 4665062, кл. A 61K 31/66, 1987 г. J.C.H.Mao et al, Antimicrob Agents Chemother, 1985, 27, 197. Патент США N 4299615, кл. C 07F 9/38, 1981. 
(71) Имя заявителя: Хехст АГ (DE) 
(72) Имя изобретателя: Ануширван Пейман[DE]; Ойген Ульманн[DE]; Ирвин Винклер[DE]; Маттиас Хелсберг[DE]; Кристоф Майхснер[DE] 
(73) Имя патентообладателя: Хехст АГ (DE) 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 2-ФОРМИЛБЕНЗИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ 

Использование: в химии фосфорорганических веществ, в частности в синтезе полупродуктов для производства антивирусных препаратов в медицине. Сущность изобретения: продукт производные 2-формилбензилфосфоновой кислоты в виде свободной кислоты или в виде R1, R2 - ди(одинаковых или разных) алкиловых эфиров, или в виде соли. Реагент 1: 2-формилбензилгалогенид. Реагент 2: три R1, R2, R3 - алкилфосфит. Условия реакции: в среде органического растворителя при 100 250°С. 4 табл. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение касается способа получения новых производных 2-формилбензилфосфоновых кислот, применяемых для приготовления вирусных препаратов, которые содержат активные соединения в соответствии с изобретением.

Для лечения вызванных вирусами заболеваний применяли до настоящего времени различные препараты, как например аналоги нуклеозидов, амантадин, аналоги пирофосфата или иммуномодуляторы (M.I.Wood, A.M.Geddes, The Lancet, 1987, 1189) [1] Известны некоторые производные фосфоновых кислот, которые обладают антивирусной активностью. К ним относятся такие соединения как фосфономуравьиная кислота [2] метилендифосфоновая кислота, а также тетразолфосфорная кислота (S. M. Roberts, NATO ASI Ser. Ser. A 143, 1988, 37; D.M. Hutchinson, M.Naylor, Nucleic Acids Rec. 13, 1985, 8519). Фосфономуравьиная кислота имеет широкий антивирусный спектр, однако вызывает некоторые побочные токсичные эффекты, которые до настоящего времени препятствовали распространению их в качестве медикаментов (M.I. Wood, A.M.Geddes, The Lancet 1987, 1189). О производных орто-фосфонилокси-ацетофеноновых производных известно, что они, в частности, активны против пикорнавирусов (европейская заявка 21000).

Диана и др. (I.Med. Chem. 27, 1984, 691, DOS, 2922054) сообщили о классе соединений типа A C, где А означает ароматическое кольцо и С фосфонат или -кето-фосфонат, причем А и С отделены друг от друга мостиком 3-8 метиленовых групп. Из этого класса соединений арилалкилфосфоновые кислоты с метиленовыми мостиками более, чем с 5 атомами углерода показали антивирусную активность против герпес-вирусов.

Арилалкилфосфоновые кислоты с метиленовыми мостиками менее чем с 5 атомами углерода, однако, не показали антивирусную активность. Замещение ароматических остатков этих соединений осуществляют у Диана и сотр. в основном с помощью 2-хлор, 4-метокси- или 4-карбетоксифеноксигрупп.

Бензилфосфоновые кислоты до настоящего времени не были описаны как активные антивирусные соединения (I.C.H.Mao et al. Antimicrob. Agents Chemother. 27, 1985, 197) [3]

Неожиданно было обнаружено, что производные 2-формилбензилфосфоновых кислот обладают антивирусной активностью.

(I)

Изобретение касается поэтому соединения формулы I, в которой R означает альдегидную группу или группу, которую можно перевести в альдегид,

R1 и R2, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкенильную или алкинильную группу с 2-20 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, водород, натрий, калий, кальций, магний, алюминий, литий, аммоний или триэтиламмоний или

R1 и R2 вместе образуют циклический диэфир с 2-6 атомами углерода в кольце;

R3 и R4, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкинильную или алкенильную группу с 2-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, водород, фтор, хлор, бром или иод;

R5, R6, R7 и R8, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкенильную или алкинильную группу с 2-20 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, водород, фтор, хлор, бром, иод, цианидную, гидроксильную или фенильную группу или остаток формулы 1а

OR19 (Ia) где R19 означает линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкенильную или алкинильную группу с 2-20 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, водород, натрий, калий, кальций, магний, алюминий, литий, аммоний или триэтиламмоний и

Х, Y и Z могут быть одинаковыми или различными и означают кислород или серу или лекарственная форма соединения формулы 1.

Соединение формулы I, в которой R1 и R2 означают алкильную группу с 1-10 атомами углерода, алкенильную или алкинильную группу с 2-10 атомами углерода, водород или аралкильную группу с 7-16 атомами углерода,

R3 и R4 алкильную группу с 1-4 атомами углерода, алкенильную или алкинильную группу с 2-4 атомами углерода или водород,

R5, R6, R7 и R8 означают хлор, бром, метокси или водород и

X, Y и Z означают кислород, являются предпочтительными.

Под названием "пролекарственная форма соединений формулы I'' следует понимать соединения, которые могут быть превращены в соединения формулы I, в которой R означает альдегидную группу. В статье H.Bundgaard (Design of Prodrugs, 1985, c. 1-92, Elsevier Verlag) определяется название "активная форма" и поясняется примерами.

Под названием алкильная группа с 1-10 атомами углерода, следует понимать например следующие остатки: метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, 2,2-диметил-1-пропил, н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил, н-нонил и н-децил. Под обозначением алкенильная группа с 2-10 атомами углерода следует, например, понимать следующие соединения: этенил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил, гептенил, октенил, ноненил или деценил. Под названием алкинильная группа с 2-10 атомами углерода следует понимать, например, следующие соединения: этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил, гептинил, нонинил, октинил или децинил. Под аралкильной группой с 7-16 атомами углерода следует понимать например, следующие остатки: фенилметил, фенилэтил. фенилбутил, фенилпропил, фенилпентил, фенилгексил, фенилгептил, фенилоктил, фенилнонил или фенилдецил. Под циклоалкильной группой с 3-8 атомами углерода следует понимать остатки как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил. Алкоксигруппы с 1-4 атомами углерода это остатки типа метокси, этокси, пропокси, и изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси или трет-бутокси.

Изобретение касается, кроме того, способа получения соединений формулы I, в которой R означает альдегидную группу, который отличается тем, что соединение формулы II

где R3 и R4 могут быть одинаковыми или различными, и означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкинильную или алкенильную группу с 2-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, водород, фтор, хлор, бром или иод;

R5, R6, R7 и R8, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкенильную или алкинильную группу с 2-20 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 7-20 атомами углерода, алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, водород, фтор, хлор, бром, иод, цианидную, гидроксильную или фенильную группу или остаток формулы Ia, в

OR19 которой R19 означает линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкенильную или алкинильную группу с 2-20 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, водород, натрий, калий, кальций, магний, алюминий, литий, аммоний или триэтиламмоний и

Т означает хлор, бром, иод, метилсульфонат,фенилсульфонат или тозилсульфонат, подвергают взаимодействию с соединением формулы III

P где R1 и R2, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-20 атомами углерода, линейную или разветвленную алкенильную или алкинильную группу с 2-20 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, циклоалкильную группу с 3-8 атомами углерода, водород, натрий, калий, кальций, магний, алюминий, литий, аммоний или триэтиламмоний или

R1 и R2 вместе образуют циклический диэфир с 2-6 атомами углерода в кольце;

R9 означает линейную или разветвленную алкильную группу с 1-4 атомами углерода и

X, Y и Z, которые могут быть одинаковыми или различными, означают кислород или серу.

Изобретение касается, кроме того, способа получения соединения формулы I, в которой R означает переводимую в альдегид группу, который отличается тем, что соединение формулы I, в которой R означает альдегид, таким образом подвергают взаимодействию, что появляется переводимая в альдегид группа.

Под названием "переводимая в альдегид группа" следует понимать остатки, которые могут быть превращены в альдегид (H.Bundgaard, Desigh of Prodrugs, 1985, s. 1-92, Elsevier Verlag).

В частности, альдегидную группу можно таким образом подвергнуть изменению, что появится соединение формулы I, в которой R означает переводимую в альдегид группу формулы Ib, Iс или 1d.

R16 M в которой R10 и R11, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-10 атомами углерода или

R10 и R11 вместе образуют циклический ацеталь с 2-3 атомами углерода в кольце,

R12-R16, которые могут быть одинаковыми или различными, означают линейную или разветвленную алкильную группу с 1-10 атомами углерода или алкильную группу с 6, 10 или 14 атомами углерода;

Y означает кислород или серу;

М гидроксильную группу, линейную или разветвленную алкильную группу с 1-10 атомами углерода, аралкильную группу с 7-20 атомами углерода, арильную группу с 6, 10 или 14 атомами углерода или остаток формулы I I или I f

NHR17 OR18 в которой R17 прямолинейная или разветвленная алкильная группа с 1-10 атомами углерода, амино-, пиридино- или арильная группа с 6, 10 или 14 атомами углерода и

R18 аминогруппа, пиридиновая группа, линейная или разветвленная алкильная группа с 1-10 атомами углерода, арильная группа с 6, 10 или 14 атомами углерода или аралкильная группа с 7-20 атомами углерода.

Синтез соединения формулы I, в которой R означает альдегидную группу, осуществляют в результате взаимодействия соединения формулы II с соединением формулы III целесообразно при температуре между 100 и 250оС, предпочтительно между 120 и 180оС (патент США N 4299615; [4] Губен-Вейль. Методы орг.химии, том XII/I, стр. 423; том Е2, стр.300). Взаимодействие можно проводить в подходящем растворителе, как амид гексаметилфосфорной кислоты, диметилформамид, диметилсульфоксид, N,N'-диметил-N,N'-пропиленмочевина или N,N'-диметил-N, N'-этиленмочевина. Реакцию можно проводить также без растворителя. Очистку осуществляют, как правило, обычными методами, предпочтительно хроматографией через силикагель подходящим элюентом, дистилляцией или перекристаллизацией из подходящего растворителя.

Соединения формулы II и формулы III могут быть получены известными способами. Переведение диэфира фосфоровой кислоты в ее моноэфир, а также в соответствующие свободные кислоты или их соли осуществляют например кипячением с разбавленной соляной кислотой (Губен-Вейль, Методы орг.химии, том XII/I, 1963), или путем взаимодействия с триметилбромсиланом (C. E.Mekenna, I. Schmidhauser, I.C.S. Chem. Commun. 1979, 739). Очистку осуществляют путем перекристаллизации в подходящем растворителе или хроматографическими методами, предпочтительно путем ионообменной хроматографии подходящим элюентом. В результате ионообменной хроматографии могут быть получены также желаемые солевые формы.

Синтезы пролекарственных форм соединения формулы I можно осуществлять, например, тем, что альдегидную группу в соединениях формулы I таким образом изменяют, что соединения получают типа оксимов, тиосемикарбазонов, гидразонов карбоновых кислот, шиффовых оснований, оксазолидинов, тиазолидинов или ацеталей. К тому же соединения формулы I, в которых R означает альдегидную группу, можно подвергнуть реакции с соединением формулы IVa, IVb и/или IVc, IVd или IVe

HO()H2 RH RH

R MNH2 где R10-R16, М и Y имеют указанные значения и n означает 1 или 2.

Другие пролекарственные формы получают аналогично методам, описанным в Бундгаарде.

Измененные до альдегидной группы соединения формулы I in vitro или in vivo могут быть переведены в активные, противовирусные формы (альдегидные формы) (H. Bundgaard, Design of Prodrugs, 1985, 1-92). Переведенные в активную форму можно осуществлять в результате гидролиза в водном растворе или в результате ферментативного катализа или другим доступным образом.

Тест на активность хемотерапевтического средства для HIY-инфекций у людей связан с трудностями, так как еще нет инфекционной модели в лабораторных условиях. Для испытаний хемотерапевтического средства нужно поэтому обратиться к инфекции другими ретровирусами. В этом случае выбирают заражение мышей вирусом лейкемии. Для этого заражают нормальных лабораторных мышей путем внутривенной инъекции вирусом Friend лейкемии из сыворотки для мышей. В случае необработанных контрольных образцов в качестве симптома заражения в течение 2 недель развивается явное увеличение селезенки и печени. Обработку осуществляют более 10 дней, начиная через 48 ч после заражения. На 14-ый день опыта животных умерщвляли и вскрывали. Селезенку удаляли и взвешивали. В качестве параметра измерения терапевтической эффективности использовали вес селезенки обработанных животных по сравнению с весом необработанных контрольных животных.

В случае незараженных выросших лабораторных мышей (20-24 г масса тела) селезенка весила приблизительно 1% от массы тела или менее, в то время как у зараженных животных селезенка к концу опыта весила приблизительно 10% от массы тела.

Соединение формулы I, в которой R означает альдегидную группу, обладает ценными фармакологическими свойствами, в частности, антивирусной активностью, а именно как при заболеваниях, вызванных как ДНА- так и РНА-вирусами, в частности, против заболеваний, которые вызваны Friend лейкемии вирусом (H.Y.I) миксовирусом, вирусом Нerpes simplex (FIY) или вирусом иммунодефицита (HIV). Соединения в соответствии с изобретением пригодны поэтому для борьбы с различными заболеваниями, вызванными вирусами, как респираторными заболеваниями, кожными, глазными, центральной нервной системы, СПИДа различного состояния, как родственных СПИДУ комплексенов (АРС), генерализированной лимфоденопатии (PGL) родственных СПИДу нейралгических состояний (как слабоумие или тропические параперезы), анти-HIY-антитела-позитивные состояния, Капози-саркома или в тромбопенишная пурпура.

Соединения формулы I и/или их пролекарственная форма могут применяться самостоятельно либо с физиологически совместимыми вспомогательными средствами или носителями в эффективных количествах в качестве лекарственных препаратов. Их можно вводить, например, орально при дозировке 1-500 мг/кг/день, предпочтительно 5-50 мг/кг/день. Введение парентерально, ректально или топически или в виде аэрозоля осуществляют, например, в дозировках 0,5-500 мг/кг/день, предпочтительно 2-100 мг/кг/день. Соединение формулы I и/или его пролекарственная форма оформляется предпочтительно в единицах дозирования, которые, по меньшей мере, содержат эффективное количество соединения в соответствии с изобретением, предпочтительно 25-6000 мг, и особенно предпочтительно 100-1000 мг. Эти значения относятся к взрослым людям со средней массой 75 кг. Эти дозировки рассчитаны чаще всего на день. В тяжелых состояниях эти дозировки могут быть увеличены. Во многих случаях, достаточны и меньшие количества. Для лечения болезней, вызванных РНА- и ДНА-вирусами, особенно пригодны: диэтиловый эфир 2-формилбензилфосфоновой кислоты, дитриэтиламмониевая соль 2-формилбензилфосфоновой кислоты, триэтиламмониевая соль моноэтилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты, тиосемикарбазон диэтилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты гидразон никотиновой кислоты 2-формилбензилфосфоновой кислоты диэтилового эфира или диэтиловый эфир 2-(3,4-диметил-5-фенилоксазолидин-2-ил)-бензилфосфоновой кислоты.

Соединение формулы I в соответствии с изобретением и/или его пролекарственная форма могут быть выданы также в комбинации с другими веществами, в частности, антивирусными соединениями и стимуляторами иммунной системы, как интерфероны. Соединение формулы I и/или его пролекарственная форма в дальнейшем характеризуются активными веществами.

Изобретение охватывает, кроме того, применение активного вещества при изготовлении лекарственных препаратов, которые используют при лечении и профилактике названных заболеваний. Другим предметом изобретения являются лекарственные препараты, которые содержат одно или несколько активных веществ.

Лекарственные препараты получают известными, доступными специалистам методами. В качестве лекарственных препаратов активное вещество используют либо как таковое, либо предпочтительно в комбинации с подходящими фармацевтическими вспомогательными средствами или носителями в виде таблеток, драже, капсул, свечей, эмульсий, суспензий или растворов, причем содержание активного вещества составляет до 95% предпочтительно 10-75%

Подходящими вспомогательными веществами или носителями для соответствующих готовых лекарственных препаратов являются например наряду с растворителями, гелеобразователями, основами для свечей, таблеток и других носителей активных веществ, также и антиокислители, диспергирующие средства, эмульгаторы, антивспениватели, консервирующие средства и вещества, придающие вкус, вещества, способствующие растворению и красителя.

Активное вещество можно вводить орально, парентерально, внутривенно или ректально, при этом наряду с оральным введением предпочтительно также внутривенное введение в виде аэрозоля.

Для оральных форм применения активное вещество смешивают с подходящими для этого добавками как носители, стабилизаторы или инертные разбавители и обычными методами превращают смеси в подходящие готовые формы, как таблетки, драже, капсулы, водные или масляные растворы. В качестве инертных носителей можно применять например, гуммиарабик, магнезию, карбонат магния, фосфат калия, молочный сахар, глюкозу или крахмалы, в частности, кукурузный крахмал. При этом можно осуществлять при изготовлении как сухое, так и влажное гранулирование. В качестве масляных носителей или растворителей следует иметь в виду, например, растительные или животные масла, как подсолнечное или масло рыбий жир.

Для субкутантного или внутривенного введения активное вещество переводят в раствор, суспензию или эмульсию с помощью растворителей, эмульгаторов или других вспомогательных веществ. В качестве растворителя пригодны, например, физиологический раствор поваренной соли, спирты, как этанол, пропанол, глицерин, растворы сахара, как раствор глюкозы или маннита или смеси растворителей.

П р и м е р 1. Получение диэтилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты (А).

47,9 г (0,31 мол) 2-хлорметилбензальдегида вместе с 51,5 г (0,31 мол) триэтилфосфита нагревают до 160оС. При этом отгоняют этилхлорид. Продукт очищают фракционной дистиллацией.

Выход: 64,59 (81%), Т.кип. 130оС/0,3 мм

1Н-ПМР (270 МГц, CDCl3(ТМС): 1,23 (t, 6H, P-O-CH2-CH3), 3,78 (d, 2H, CH2-P), JР-Н 24 Гц, 4,04 (dg, 4H, P-O-CH2-CH3), 7,19-7,97 (m, 4H, Ar-H).

П р и м е р 2. Получение дитриэтиламмониевой соли 2-формилбензилфосфоновой кислоты (В) и триэтиламмониевой соли монометилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты (С).

5,0 г (20 моль) диэтилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты смешивают с 100 мл 6 М HCl и кипятят 6 ч при температуре кипения флегмы. Воду и HCl отгоняют в вакууме, трижды промывают толуолом. Оставшуюся коричневую массу хроматографируют через силикагель (CH2Cl2) метанол/триэтиламин 75/24 (I). Получают соединение В и С в виде маслянистых продуктов. Их можно разделить путем хроматографии через диэтиламиноэтил Rсефадекс А25 (Et3NH+ форма, фирмы фармация Фрейбург ФРГ). Они различаются по своему значению удерживаемости (Rf-значение). Элюируют градиентом триэтиламмонийбикарбонатом 0,3-1,0 М.

(В): Rf 0,1, выход 2,4 г (30,), 1Н-ПМР (270 МГц, ДМСО/ТМС): 1,07 (t, 18Н, N-CH2-CH3), 2,86 (g, 12Н, N-CH2-CH3), 3,23 (d, 2H, CH2-P) JP-H 23 Гц, 7,24-7,78 (m, 4H, Ar-H), 10,31 (s, 1Н, CHO).

(C): Rf 0,3. Выход 1,4 г (21%), 1Н-ПМР (270 МГц, ДМСО/ТМС): 1,01-1,17 (m, 12H, N-CH2-CH3 и P-O-CH2-CH3), 2,88 (g, 6H, N-CH2-CH3), 3,27 (d, 2H, CH2-P) JР-Н 23 Гц) 3,68 (dg, 2H, P-O-CH2-CH3),7,18-7,78 (m, 4H, Ar-H), 10,31 (s, 1H, CHO).

П р и м е р 3. Получение дитриэтиламмониевой соли 2-формилбензилфосфоновой кислоты (В).

К 2,0 г (8 ммол) соединения А в 10 мл абсолютного диоксана по каплям добавляют 3,2 г (21 ммол) триметилсилилбромида, реакционную смесь нагревают до 50оС и перемешивают 6 ч при этой температуре. Испаряют, несколько раз смешивают с водой и лиофилизируют. Сырой продукт очищают хроматографией как в примере 2.

Выход 1,98 г (62%).

П р и м е р 4. Тиосемикарбазон диэтилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты.

2,0 г (8 ммоля) соединения А и 0,78 г тиосемикарбазида растворяют в 200 мл абсолютного этанола или суспендируют. Добавляют 2 мл уксусной кислоты и кипятят 3 ч при температуре кипения флегмы. Во время длительного охлаждения выкристаллизовывается продукт 1.

Выход 1,8 г (68%), Т.пл. 195-197оС, 1Н-ПМР (270 МГц, СDСl3)ТМС 1,16 (t, 6H, CH2-CH3), 3,38 (d, 2H, CH2-P, JР-Н 23 Гц, 3,94 (dg, 4Н, СH2-СH3), 7,23-7,39 (m, 3H, A-H), 8,40 (s, 1H, Ar-H), 11,37 (s, 1H, Ar-CH=N).

П р и м е р 5. Гидразон никотиновой кислоты диэтилового эфира 2-формилбензилфосфоновой кислоты.

2,0 г (8 ммол) соединения А и 1,07 г (8ммол) гидразида никотиновой кислоты растворяют в 30 мл абсолютного этанола. После добавления 1 мл уксусной кислоты кипятят 8 ч при температуре кипения флегмы. Растворитель испаряют, остаток хроматографируют через силикагель (элюент СH2Cl2) этиловый спирт 9,5/0,5 Rf 0,45. Проукт Е получают в кристаллическом виде.

Выход 2,2 г (73% ), Т. пл. 136-140оС, 1Н-ПМР (270 МГц, CDCl3-ТМС): 1,14-1,37 (m, 6H, СН3), 3,61-3,79 (d, 2H, СН2-Р), JP-H 24 Гц, 3,87-4,16 (m, 4H, CH2-CH3), 7,11-7,49 (m, 4H, Ar-H), 7,70-9,23 (m, 5H, Py-H), 10,17 и 11,25 (по s, 1:3, 1Н, NH).

П р и м е р 6. Диэтиловый эфир 2-(3,4-диметил-5-фенилоксазолидин-2-ил)-бензил- фосфоновой кислоты.

2,0 г (8 ммол) соединения А и 1,32 (8 ммол) (-)-эфедрина растворяют в 100 мл бензола и 24 ч кипятят с водяной ловушкой при температуре кипения флегмы. После этого растворитель испаряют, остаток хроматографируют через силикагель (элюнт СН2Сl2) этанол 9,5 (0,5) Rf 0,55. Продукт Е получают в виде масла.

Выход: 2,4 г (75%), 1Н-ПМР (270 МГц, СDСl3/ТМС): 0,80 (d, 3H, CH-CH3), 1,25 (m, 6H, O-CH2-CH3), 2,27 (s, 3H, N-CH3), 3,18 (dg, 1H, СH-CH3), 3,20 и 3,28 (dd, 1H, Ph-CH-CH), 3,59-3,76 (m, 2H, CH2-P), 4,01 (m, 4H, O-СН2-CH3), 5,19 (s, 1H, Ar-CH, 0- N), 7,16-7,45 (m, 8Н, Ar-H), 7,89-7,98 (m, 1H, Ar-H).

П р и м е р 7. Свободных от заболеваний названных лабораторных мышей массой около 15 г интраперитонеально заражали Герпекс симплекс типом 1 и непосредственно после этого обрабатывали названными в табл.1 соединениями интраперитонеально, орально или субкутантно. Обработку осуществляли дважды в день через 2,5 дня, начиная после заражения. Результаты обработки определяли в зависимости от протекания болезни и степени выживаемости по сравнению с необработанными зараженными контрольными животными. Контрольные животные вместо испытуемых соединений получали водорастворимую метилгидроксиэтилцеллюлозу (вязкость 300 Пс в 2%-ном растворе). Опыты проводили с группами по 5 мышей на препарат.

Хемотерапевтическое действие соединения А видно из табл.1.

П р и м е р 8. Клеточные культуры Хела- и Веро-клеток прививали в микротитрованных пластинах и заражали миксовирусами (инфлюенца А2). Через 2 ч после заражения добавляли соединения В и С к зараженным культурным клеткам при различном разбавлении. Через 48-72 ч после заражения определяли терапевтический эффект в зависимости от цитопатогенного эффекта микроскопически и фотометрически после внесения нейтрального красного (тест на окрашивание по Финтеру) (Финтер Н.Б. Интерферон, 1966). Минимальные концентрации, при которых около половины зараженных клеток не показали цитопатогенного эффекта, принимали за минимальные концентрации торможения (МНК). Результаты приведены в табл.2.

П р и м е р 9. Свободных от заболеваний мышей (лабораторных) с массой около 16 г intranasal заражали инфлюенцией А2 и непосредственно после этого обрабатывали терапевтически названными в табл.3 соединениями субкутантно и орально. Соединения вносили животным при легком наркозе каплями вирусной суспензии в носовые отверстия. Обработку проводили дважды в день через 2,5 дня, начиная после заражения. В качестве сравнения всегда служил амантадин. Обработку осуществляли в зависимости от протекания заболевания и степени выживаемости по сравнению с необработанными зараженными контрольными животными. Контрольные животные получали вместо испытуемых соединений водорастворимую метилгидроксиэтилцеллюлозу (вязкость 300 П.с в 2%-ном растворе). Опыты проводили с группами по 5 мышей на препарат.

Хемотерапевтическое действие приведено в табл.3.

П р и м е р 10. Лабораторных мышей с весом 20-24 г, женские особи, заражали внутривенно мышиной сывороткой, содержащей вирус Friend-лейкемии (FIV). Через 48 ч после заражения начинали обработку. Через 10 дней мышей обрабатывали веществами, указанными в табл.4. Один раз на день указанные вещества вводили орально или интраперитонеально. Через 14 дней после заражения животных умерщвляли путем паралича и вынимали селезенку. Массу селезенки определяли. В качестве параметра измерения терапевтической эффективности масса селезенки животных, которые обрабатывали соединениями А и В, сравнивали с контрольными необработанными зараженными животными.

В качестве стандартного вещества служили сурамин и азидотимидин (AZT). Действие препарата можно видеть в табл.4. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 2-ФОРМИЛБЕНЗИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ общей формулы



где R1 и R2, одинаковые или разные, водород, алкил или солеобразующий катион,

отличающийся тем, что 2-формилбензилгалогенид общей формулы



где Т-галоген,

подвергают взаимодействию с триалкилфосфитом общей формулы



где R1, R2 и R3 алкил,

с последующим выделением целевого продукта в виде эфира или переводом его в случае необходимости в кислоту или ее соль.