СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА


RU (11) 2044320 (13) C1

(51) 6 G01N33/53 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 29.08.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 1995.09.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 4813085/14 
(22) Дата подачи заявки: 1990.04.10 
(45) Опубликовано: 1995.09.20 
(56) Аналоги изобретения: Zelirman J., Hjerten.S. J Jmmunol Methods, 1988, 114, 267 - 273. 
(71) Имя заявителя: Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова 
(72) Имя изобретателя: Матвеев А.Г.; Мешандин А.Г.; Ванеева Л.И. 
(73) Имя патентообладателя: Мешандин Алексей Гаврилович 

(54) СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для проведения иммунологического анализа. Цель изобретения повышение чувствительности способа. Частицы оксида железа сенсибилизируют иммунологическими реагентами, затем инкубируют их с исследуемой пробой, разведенной предварительно фосфатным буфером, рН 6,8 7,6. Содержание веществ в пробе определяют по агглютинации частиц в конечном разведении. По сравнению с прототипом увеличивается чувствительность способа в 5-20 раз. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к агглютинационному иммунологическому анализу на основе неорганических носителей, в частности на оксиде железа (III).

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Способ осуществляют следующим образом: для раститровки антигена (или антител) используют фосфатный буферный раствор следующей рецептуры: KCl 0,2г, NaCl 8,0 г, KH2PO4 0,2 г, Na2HPO4 2,9 г, Н2O 1 л, рН 6,8-7,4.

В качестве характеристики данного буфера используют величину рН, замеряемую на ионометре универсальном ЭВ-74, при температуре 20оС.

П р и м е р 1. Осуществляют реакцию агглютинации с оксидом железа (III), на который сорбируют антитела кроличьи к гамма-глобулину человека.

П р и м е р 2. Титр сыворотки 1:2000 (по прототипу 1:200).

В качестве антигена используют человеческий гамма-глобулин (противокоревый). Данным антигеном нагружают частицы Fe2O3.

Раститровку кроличьей сыворотки против C-глобулина человека осуществляют фосфатным буферным раствором рН 7,4 и в сравнении в ацетатном буфере (прототип). Титр антител 1:5000.

П р и м е р 3. В качестве антигенов используют антиген-рекомбинатные белки вируса СПИД р 24 и р 41. Данными антигенами нагружали Fe2O3, раститровку сыворотки против антигенов р 24 и р 41 осуществляют фосфатным буферным раствором рН 7,2.

П р и м е р 4. Титр 1:25000. Миоглобином нагружают частицы Fe2O2, раститровку сыворотки против миоглобина осуществляют в фосфатном буферном растворе рН 6,8.

П р и м е р 5. Титр антител 1:5000. Фибронектином нагружают частицы Fe2O3, раститровку сыворотки против фибронектина осуществляют в фосфатном буфере рН 7,4.

П р и м е р 6. Титр антител 1:5000. Чумным антигеном нагружают частицы Fe2O3, раститровку сыворотки к чуме проводят в фосфатном буфере. Титр антител 1:100000.

П р и м е р 7. Туляремийным антигеном нагружают частицы Fe2O3, раститровку сыворотки к туляремии производят в фосфатном буфере. Титр антител 1: 100000.

П р и м е р 8. В качестве антигена используют трофобластический G-глобулин. Данным антигеном нагружают частицы Fe2O3, раститровку сыворотки к трофобластическому G-глобулину осуществляют в фосфатном буферном растворе рН 7,2. Титр антител 1:5000.

П р и м е р 9. Для нагружения частиц Fe2O3 используют моноклональные антитела (МкАТ) к туляремии производства института Иммунологии Минмедбиопрома СССР. Раститровку туляремийного антигена осуществляют в фосфатном буфере рН 7,4. Титр антигена 1:100000.

П р и м е р 10. Для нагружения частиц Fe2O3 используют МкАТ к фракции 1 чумы производства Средне-Азиатского противочумного института. Раститровку антигена чумы осуществляют в фосфатном буфере рН 7,2. Титр антигена 1: 100000.

П р и м е р 11. Для нагружения частиц Fe2O3 используют антитела (АТ) к НВ антигену. Раститровку НВ антигена осуществляют в фосфатном буфере рН 6,8. Титр антигена 1:10000.

По сравнению с прототипом увеличивается чувствительность способа в 5-20 раз в зависимости от использованных в качестве сенситанов антигенов или антител. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА, включающий сенсибилизацию частиц оксида железа, инкубацию их с исследуемой пробой, разведенной в буферном растворе, а содержание вещества в пробе определяют по наличию агглютинации частиц в конечном разведении, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности анализа, в качестве буфера для разведения проб используют фосфатный буферный раствор, рН 6,8 7,6.