СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА


RU (11) 2218195 (13) C1

(51) 7 A61N5/00 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 10.08.2007 - прекратил действие, но может быть восстановлен 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 2003.12.10 
(21) Регистрационный номер заявки: 2002117243/14 
(22) Дата подачи заявки: 2002.06.28 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2002.06.28 
(45) Опубликовано: 2003.12.10 
(56) Аналоги изобретения: КОНСТАНТИНОВА Н.А. и др. Влияние УФ-облучения на функциональную активность и внутриклеточный рН нейтрофилов крови больных атопическим дерматитом и здоровых доноров. В сб. "Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии (диагностические системы будущего, аллерговакцины, вакцины нового поколения, иммуномодуляторы и клинические разработки в аллергологии и иммунологии)", - М., 1998, с. 575. Курортология и физиотерапия/Под ред. проф. БОГОЛЮБОВА В.М. - М.: Медицина, 1985, т. 2, с. 591 - 600. RU 2158617 С2, 10.11.2000. 
(72) Имя изобретателя: Константинова Н.А.; Хомякова Н.Ф.; Грабовская О.В. 
(73) Имя патентообладателя: Российский государственный медицинский университет 
(98) Адрес для переписки: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1, Российский государственный медицинский университет, патентный отдел, С.В. Пыжеву 

(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА 

Изобретение относится к медицине, дерматологии. Проводят оценку внутриклеточного рН нейтрофилов крови больного. При величине внутриклеточного рН от 7,2 ед. и выше назначают УФ-облучение избирательным спектром с фильтром 3345 нм. Способ предупреждает осложнения. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Предлагаемое изобретение относится к медицине и предназначено для коррекции иммунных нарушений, в частности, у больных атопическим дерматитом.

В настоящее время известно, что развитие атопических дерматитов связано с возникновением иммунного дисбаланса, который в значительной мере определяет течение и исход заболевания. В этой связи иммунокоррекция представляет собой одно из важнейших направлений в тактике лечения атопического дерматита (Суворова К. Н. Атопический дерматит: иммунопатогенез и стратегия иммунотерапии. //Русский медицинский журнал. -1998, 6, с. 1-9).

Известно, в частности, использование при лечении атопического дерматита широкополосного общего УФ-облучения, и аутотрансфузия УФ-облученной крови (Механизмы влияния облученной ультрафиолетовыми лучами крови на организм человека и животных. Сборник научных трудов под редакцией Ганелиной И.Е. и Самойловой К.А. - Л.: Наука, 1986, 264 с.).

Однако применение способов УФ-облучения в некоторых случаях не влияет на развитие заболевания, а в ряде случаев приводит к резкому обострению данного заболевания, отягощающему состояние больного.

Наиболее близким к предлагаемому является общеизвестный способ иммунокоррекции кожных заболеваний, использующий комбинированное воздействие на организм УФ-излучения в узких спектральных диапазонах (300-320 нм и 340-400 нм) (Krutmann J. Phototherapy for atopic dermatitis.// Dermatological therapy., 1996, v.1, p. 24-31).

Основным недостатком этого способа является использование комбинированного УФ-излучения в терапии атопического дерматита либо в период обострения заболевания (при 300-320 нм) либо в период полной ремиссии (при 340-400 нм).

Использование УФ-облучения в приведенных диапазонах волн обосновывалось авторами в большинстве случаев наблюдаемой нормализацией (снижением) продуцирования Т-хелперами в период обострения интерлейкина-4 (при 300-320 нм) и при ремиссии гамма-интерферона (при 340-400 нм). В переходный период от обострения заболевания до состояния полной ремиссии использование УФ-облучения в этих областях влечет за собой усиление дисбаланса цитокинов, что приводит к повторному обострению заболевания или к хронизации процесса. Для данной группы больных период перехода от обострения заболевания до состояния полной ремиссии длительный и растягивается на несколько месяцев. Поэтому применение такого способа УФ-терапии в этот период не только не эффективно, но противопоказано.

Целью изобретения является получение стойкого и стабильного результата при лечении атопического дерматита с применением УФ-облучения.

Эта цель достигается тем, что больному проводят оценку внутриклеточного рН нейтрофилов крови и при значениях внутриклеточного рН нейтрофилов от 7,2 ед. рН и выше назначают УФ-облучение избирательным спектром с фильтром 3345 нм, а в случае рН ниже 7,2 использование УФ-терапии считают нецелесообразным.

Способ поясняется на следующих примерах.

Пример 1.

Больной А. 16 лет. Поступил с жалобами на высыпание на коже кистей и лица, сопровождающееся зудом.

Из анамнеза заболевания: болел с раннего детского возраста, обострения в весенне-осенний период, лечился амбулаторно и стационарно с хорошим по времени эффектом, отмечал улучшение в летнее время года.

Локальный статус: поражение кистей хронического воспалительного характера; сыпь не обильная полиморфная, локализация преимущественно на коже кистей и лица; кожа кистей и запястий застойно гиперемирована и лихенифицирована, инфильтрирована; по периферии немногочисленные лихенойдные паппулы; в очагах имеются единичные болезненные трещины; на поверхности очагов шелушения отрубевидными беловатыми чешуйками; кожа лица гиперемирована, покрыта отрубевидными чешуйками, единичными гемморагическими корочками; волосы и ногти не поражены.

Клинический диагноз: атопический дерматит.

Общий анализ крови: лейкоциты - 7060/мкл, нейтрофилы - 41,7%, лимфоциты - 46,8%, моноциты - 7,7%, эозинофилы - 3,3%, базофилы - 0,5%, эритроциты - 5503000/мкл, гемоглобин - 166,1 г/л, цветной показатель - 0,9, тромбоциты - 274400/мкл.

Биохимический анализ крови: общий белок - 7,7 г/дл, альбумин - 4,4 г/дл, глюкоза - 97 мг/дл, общий билирубин - 0,6 мг/дл, прямой билирубин - 0,1 мг/дл.

Больному проводят оценку внутриклеточного рН нейтрофилов крови с использованием флуоресцентного микроскопа "Люмам-И3" по методу Литинской Л.Л. с соавторами (Литинская Л.Л., Векслер А.М., Иконникова А.И., Туровецкий В.Б. и др. Микроскопический вариант прижизненной рН-метрии индивидуальных клеток с использованием ФДА. /Деп.науч.раб., 1984, вып.12, реф. 52-67-343, с.26).

Приготовление образцов для исследования. Проводили забор 1 мл периферической крови из локтевой вены в утренние часы натощак. Фракцию нейтрофилов выделяли в градиете плотности путем наслоения исследуемой крови на раствор фикол-триомбраста (Ficol-400, "Fharmacia", 6 мл) с последующим центрифугированием при 400 g и комнатной температуре. Полученная суспензия клеток раскапывалась в количестве 0,05 мл на предметные стекла, добавлялся флуоресцеиндиацетат (Serva, 0,01 мл, концентрация 10 мкг/мл) и инкубировалась в темной камере 45 минут. Далее нейтрофилы трехкратно отмывались раствром Хенкса от несвязанного флуоресцеиндиацетата и стекла с отмытыми клетками помещались в камеру флуоресцентного микроскопа "Люмам-И3" для определения внутриклеточного рН.

Для определения численных значений внутриклеточных рН предварительно строилась каллибровочная кривая с использованием нейтрофилов здоровых доноров, выделенных по вышеописанной методике и набора инкубационных сред на основе раствора Хенкса со значениями рН: 6,5; 6,8; 7,0; 7,2; 7,4; 7,6; 7,8. Для выравнивания величины вне- и внутриклеточного рН нейтрофилов в 0,1 мл клеточной суспензии добавлялось 5 мкл ионофора - нигерецин. Каллибровочная кривая представляла собой график зависимости отношения интенсивности флуоресценции нейтрофилов при длинах волн 520 к 568 нм (величина КрН) от значений их внутриклеточных рН.

Для больного А. рН нейтрофилов, определенный вышеописанным методом, равен 7,40 ед. рН.

В связи с полученным значением рН больному А назначено УФ-облучение. Для облучения использовался облучатель ОУШ-I со встроенной ультрафиолетовой лампой ДРТ-400. Облучение производилось ультрафиолетовым светом с длиной волны 3345 нм, выделяемой с помощью интерференционного светофильтра. Время облучения 90 с. Проведен курс из 10 сеансов, по одному ежедневно.

Больному назначена обычная медикаментозная терапия: тавегил 0,001 по 1 таблетке 2 раза в день; супрастин 0,025 по 1 таблетке на ночь; аевит по 1 капсуле 2 раза в день; местно 2% дерматоловый крем; УФ-терапия (334 нм) ежедневно по 90 с, количество процедур - 10.

Больной выписан через 3 недели в состоянии близком к полному клиническому излечению.

Пример 2.

Больной В. 15 лет. Поступил в клинику с жалобами на высыпания в локтевых и подколенных сгибах, а также в области кожи голеностопных суставов, сопровождающиеся зудом.

Из анамнеза заболевания: болел с трехмесячного возраста, процесс носил локализованный характер, обострения наблюдались в осенне-весенний период, в летнее время наблюдалась полная ремиссия.

Локальный статус: сыпь обильная полиморфная, локализована на коже локтевых и подколенных сгибах, в области голеностопных суставов, на коже задней поверхности шеи; в указанных областях кожа гиперемирована, инфильтрирована, лихенифицирована, имеются обильные экскреации покрытые серозно-геморрагическими корочками; в очагах наслоения мелко-пластинчатых беловатых чешуек; ногти кистей имеют "полированный" вид; волосы не изменены.

Клинический диагноз: атопический дерматит.

Общий анализ крови: лейкоциты - 9080/мкл, нейтрофилы - 42,6%, лимфоциты - 41,4%, моноциты - 10,3%, эозинофилы - 5,3%, базофилы - 0,5%, эритроциты - 4848000/мкл, гемоглобин - 141,0 г/л, цветной показатель - 0,87, тромбоциты - 250400/мкл.

Биохимический анализ крови: общий белок - 6,0 г/дл, альбумин - 4,3 г/дл, глюкоза - 98 мг/дл, общий билирубин - 0,4 мг/дл, прямой билирубин - 0,1 мг/дл.

Больному В. определен внутриклеточный рН нейтрофилов крови так же, как описано в примере 1.

У больного В. внутриклеточный рН нейтрофилов равен 7,38 ед. рН.

Исходя из полученного значения рН больному В. назначена УФ-терапия (3345 нм) ежедневно по 90 с, количество процедур - 10.

Больному В. проведена стандартная медикаментозная терапия: тавегил 0,001 по 1 таблетке 2 раза в день; кетотифен 0,001 по 1 таблетке в день; аевит по 1 капсуле 2 раза в день; местно крем с висмутом.

Больной В. выписан через 3 недели в состоянии значительного улучшения при хорошей переносимости терапии.

Пример 3.

Больной С. 20 лет. Поступил с жалобами на высыпания на тыле кистей и верхней половины спины, сопровождающиеся зудом, и плохой сон.

Из анамнеза заболевания: болел с раннего детского возраста; процесс носил ограниченный характер; лечился амбулаторно, преимущественно местными препаратами. Настоящее обострение длится больше 10 месяцев. Во время пребывания на курорте в субтропиках улучшения не наблюдалось. Применял ланолиновый крем, афлодерм без выраженного эффекта.

Локальный статус: процесс носит хронический воспалительный характер, локализован на тыле кистей и верхней половины грудной клетки; очаги без четких границ розового цвета неправильных очертаний; в пределах очагов выраженная инфильтрация, лихенификация, наслоения беловатых чешуек, трещинки, геморрагические корочки; резкий зуд; ногти кистей имеют "полированный" вид.

Клинический диагноз: атопический дерматит.

Общий анализ крови: лейкоциты - 7680/мкл, нейтрофилы - 47,2%, лимфоциты - 34,6%, моноциты - 9,7%, эозинофилы - 8,0%, базофилы - 0,5%, эритроциты - 4898000/мкл, гемоглобин - 149,0 г/л, цветной показатель - 0,93, тромбоциты - 288300/мкл.

Биохимический анализ крови: общий белок - 5,7 г/дл, альбумин - 4,9 г/дл, глюкоза - 93 мг/дл, общий билирубин - 0,5 мг/дл, прямой билирубин - 0,1 мг/дл.

Патогенные грибки не обнаружены.

Проведено определение внутриклеточного рН нейтрофилов, аналогичное описанному в примере 1. Внутриклеточное рН равно 7,11 ед. рН.

Исходя из полученного значения внутриклеточного рН УФ-терапия назначена не была.

В результате проведенной медикаментозной терапии через три недели лечения значительного улучшения состояния больного не наблюдалось.

Этому больному на четвертой неделе лечения было назначено УФ-облучение по ранее существующей методике в спектре диапазона облучения 300-320 нм.

В результате было отмечено обострение заболевания сразу после первого сеанса облучения, и больной был вновь переведен исключительно на медикаментозную терапию.

Из группы в 12 больных с атопическим дерматитом, направленных на УФ-облучение, отбирались только больные с внутриклеточным рН нейтрофилов крови более чем 7,2 ед. рН (8 человек). Во всех этих случаях получен положительный эффект.

В целом процес реабилитации у больных с показаниями к УФ-терапии (3345 нм) проходил лучше и значительно быстрее, чем у пациентов, при лечении которых применялись известные способы лечения, что свидетельствует о преимуществе предложенного способа. Кроме того, предлагаемый способ позволяет выявлять индивидуально выраженные противопоказания (внутриклеточный рН нейтрофилов ниже 7,2 ед. рН) и тем самым практически исключает осложнения при лечении больных ультрафиолетовым излучением.

Несмотря на достаточно широкое применение УФ-излучения в дерматологии, эффективность использования УФ в лечении атопического дерматита была противоречивой. В некоторых случаях получали положительный терапевтический эффект, но в ряде случаев наблюдали тяжелое обострение заболевания. Нами впервые выявлено закономерное воздействие УФ-облучения на кислотно-щелочной баланс нейтрофилов при атопическом дерматите и определен узкий спектр значений 3345 нм УФ-излучения при лечении атопического дерматита, дающий стабильный терапевтический эффект. Несмотря на кажущуюся простоту предложенного способа лечения атопического дерматита, он не очевиден для специалистов, работающих в данной области.

В частности, УФ-облучение стандартно применяется в диапазонах от 300 до 320 нм и от 340 до 400 нм.

Практически во всех случаях применение УФ-облучения было ориентировано на нормализацию уровня цитокинов в крови, в период обострения у больных АД преобладают Т-хелперы второго типа, которые продуцируют высокий уровень ИЛ-4, в то время как в период ремиссии - Т-хелперы первого типа, продуцирующие гамма-интерферон. Использование комбинированного воздействия УФ-излучения в ранее применявшихся диапазонах приводит к подавлению соответственно продукции Т-хелперов либо первого, либо второго типа, тем самым нормализуя состав цитокинов. Однако наши исследования показали, что в патогенезе атопического дерматита весьма существенную роль играют кослотно-щелочной баланс основных клеток воспаления - нейтрофилов.

Вместе с тем традиционные спектры облучения были избраны в связи с широким применением УФ при самых различных заболеваниях (не только в дерматологии) и связанной с этим определенной каллибровкой аппаратуры.

Нами впервые было установлено, при лечении атопического дерматита наиболее эффективным оказалось облучение 3345 нм. Причем этот спектр облучения при лечении атопического дерматита ранее никогда не использовался.

Впервые нами показано, что при УФ-облучении клеток происходит подкисление внутриклеточного содержимого, зависящего от дозы облучения. Снижение внутриклеточного рН нейтрофилов до 6,7 ед. рН приводит к гибели клеток. Напротив, незначительное снижение данного параметра до 6,9-7,0 ед. рН вызывает их праймирование, что в конечном итоге повышает степень цитотоксичности и увеличивает скорость деструкции фагоцитированного материала, что крайне важно при атопическом дерматите.

Кроме того, при таком подкислении цитоплазмы происходит задержка апоптоза и продлевается функциональная жизнь нейтрофилов. Поэтому при выборе способа терапевтического воздействия и расчете доз облучения необходимо руководствоваться величиной внутриклеточного рН нейтрофилов.

Впервые показано, что больных с атопическим дерматитом можно разделить на две группы с повышенным (1 группа) и сниженным (2 группа) уровнями внутриклеточного рН по сравнению с нормой. Показано, что УФ-облучение при 3345 нм приводит к снижению внутриклеточного рН нейтрофилов крови в отдельных группах больных. Причем рН больных первой группы достигает величины достоверно неотличимой от таковых в контрольных клетках (здоровые доноры), в то же время исходно сниженный уровень внутриклеточного рН второй группы снижается до более низких значений. Таким образом, показано, что исходное значение рН нейтрофилов крови больных является важным показателем в применении УФ-терапии данного спектрального диапазона. В случае если нейтрофилы больных атопическим дерматитом имеют рН не ниже контрольных, то применение УФ-облучения рекомендуется, в противном случае следует отказаться от данного терапевтического воздействия.

Предложенный способ лечения атопического дерматита на основе УФ-облучения является способом выбора. Он прост, недорог, доступен в эксплуатации. При этом необходимо проводить УФ-терапию при 3345 нм, что можно легко осуществить при добавлении соответствующего светофильтра в стандартные УФ-установки. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ лечения атопического дерматита на основе УФ-облучения, включающий местное лечение мазевыми средствами и общеукрепляющую терапию, отличающийся тем, что больному проводят оценку внутриклеточного рН нейтрофилов крови и при значениях внутриклеточного рН нейтрофилов от 7,2 ед рН и выше назначают УФ-облучение избирательным спектром с фильтром 334±5 нм, а в случае рН ниже 7,2 использование УФ-терапии считают нецелесообразным.