СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДЕСТРУКТИВНОЙ ФОРМЫ ПАНКРЕАТИТА

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДЕСТРУКТИВНОЙ ФОРМЫ ПАНКРЕАТИТА


RU (11) 2196587 (13) C1

(51) 7 A61K31/722, A61P1/18 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 09.07.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 2003.01.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 2001122686/14 
(22) Дата подачи заявки: 2001.08.10 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2001.08.10 
(45) Опубликовано: 2003.01.20 
(56) Аналоги изобретения: БЕЛЯКОВ Н.А. Энтеросорбция. - Л.: Центр сорбционных технологий, 1991, с.100-117. RU 2165253 С1, 20.04.2001. RU 2126654 C1, 27.02.1999. RU 2141355 C1, 20.11.1999. Bol'shakov IN, Nasibov SM, Kulaev DV, Lopukhin luM, Use of liquid sorbents based on chitosan for treatment of diffuse forms of peritonitis, Patol Fiziol Eksp Ter 1994 Jul-Sep; (3):49-50. 
(71) Имя заявителя: Красноярская государственная медицинская академия 
(72) Имя изобретателя: Большаков И.Н.; Насибов С.М.; Приходько А.А.; Винник Ю.С.; Зыкова Л.Д.; Бичурина Т.Б. 
(73) Имя патентообладателя: Красноярская государственная медицинская академия 
(98) Адрес для переписки: 660022, г.Красноярск-22, ул. Партизана Железняка, 1, Медицинская академия, патентный отдел 

(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДЕСТРУКТИВНОЙ ФОРМЫ ПАНКРЕАТИТА 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной абдоминальной хирургии, и может быть использовано для профилактики и лечения тяжелых деструктивных форм панкреатита. Способ отличается тем, что в желудочно-кишечный тракт три раза в день вводят по 1 мл коллоидного раствора, содержащего 0,02 г хитозана пищевого "Амидан" с мол.м. 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 90-95%. Предложенный способ позволяет снять тяжелую воспалительную реакцию крови и снизить летальность. 4 ил., 1 табл. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной абдоминальной хирургии, и может быть использовано для профилактики и лечения тяжелых деструктивных форм панкреатита (панкреонекроза).

Известны способы энтеросорбции при тяжелых формах острого экспериментального панкреатита (Н.А. Беляков. Энтеросорбция.- Л., 1991.- 336 с.). Автор на 4 сериях белых крыс моделировал острый панкреатит путем замораживания железы по методике В.А.Малхасяна с соавт. (1972) (Малхасян В.А., Симаворян П. С., Манукян С.А. Труды Ереванского ин-та усоверш. врачей, 1972.- вып. 5.- С. 57-63) и вводил через желудочный зонд однократно ваулен, хитин, энтеродез или полифепан в дозе 0,2 г. В течение первых двух суток развития заболевания в контроле (без энтеросорбции) летальность животных составила 32%. В 1-е сутки после воспроизведения острого панкреатита контрольные животные были вялыми, плохо принимали пищу и воду. Летальность составила 24%. На 2-е сутки у части животных увеличивалась двигательная активность, перемещение по клетке, потребление большого количества воды, сохранялся отказ от пищи. Дыхание частое и поверхностное, цианоз ушных раковин, кончиков носа и лап. На вторые сутки еще 8% животных погибало. Остальные животные (68%) выздоравливали без какого-либо лечения. На вскрытии у погибших животных в брюшной полости регистрировалось большое количество бляшек жирового некроза на париетальной брюшине, на брюшине внутренних органов, у части животных - выпот в брюшной полости.

Однократное введение в желудок 0,2 г водной взвеси ваулена снижало летальность животных в течение 2-х суток до 18%. Уровень активности амилазы в сыворотке крови в течение первых суток по сравнению с контролем снижался на 9%.

Однократное введение в желудок 0,2 г водной взвеси полифепана понижало летальность животных в те же сроки до 15% по сравнению с контролем. Снижение уровня амилазы в крови в первые сутки заболевания составляло 11% по сравнению с контролем. При этом величина лейкоцитоза на 3-и сутки течения заболевания понижалась на 19,5% по сравнению с контролем.

Прототипом настоящего технического решения является использование в терапии панкреатита хитина - линейного высокоацетилированного полимера естественного происхождения (из хитинового скелета краба, криля, креветки, высших или низших грибов и т.п.) (Н.А. Беляков. Энтеросорбция.- Л., 1991.- 336 с.). Однократное введение в желудок 0,2 г водной взвеси хитина снижало летальность крыс в течение 2-х суток до 20% по сравнению с контролем (32%). Активность амилазы в периферической крови в течение 1-х суток снизилась по сравнению с контролем на 13,2%.

Однако известные способы энтеросорбции острого панкреатита не позволяют предотвращать развитие деструктивного панкреатита (жирового панкреонекроза), снижать до нормы воспалительную реакцию в периферической крови и степень эндогенной интоксикации, существенно снижать летальность.

Цель изобретения - предотвратить развитие деструктивной формы панкреатита, снять тяжелую воспалительную реакцию крови и поджелудочной железы, степень эндогенной интоксикации, предотвратить летальность.

Поставленную цель достигают за счет того, что вводят через желудочный зонд в течение трех дней коллоидный раствор хитозана пищевого "Амидан" по 1 мл (0,02 г) три раза в день с молекулярной массой 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 90-95%. Хитозан - продукт деацетилированного хитина - линейный полимер природного происхождения, у которого в полимерной цепи увеличено число аминогрупп (NH2 +) за счет удаленных ацетильных группировок (NHCOCH3) (см. фиг. 1-4). Чем выше степень (%) замещения ацетильных групп на аминные, тем выше поликатионная активность полимера (т.е., тем выше сила электростатического притяжения отрицательно заряженных частиц, молекул в кишечном содержимом).





Способ осуществляют следующим образом. На белых крысах моделируют жировой панкреонекроз по методу И.Н. Большакова, Т.С. Белохвостиковой (А.с. 1259328, G 09 В 23/28) от 23.09.1986; Бюл. 35). После введения в проток поджелудочной железы смеси трипсина, 40% этилового спирта и 1% спиртового раствора бриллиантового зеленого в соотношении 55:5:1 проток не перевязывают. Летальность животных после моделирования заболевания составляла в течение 5 суток 100%, в течение первых трех дней - 70%. Послеоперационный период характеризовался полной адинамией, отказом от воды и пищи в течение 1-5 суток.

На вскрытии погибших животных в брюшной полости регистрировался значительный выпот (5-7 мл), множественные жировые ("стеариновые") бляшки на париетальной и висцеральной брюшине, существенное увеличение размеров поджелудочной железы.

Опытные животные были разделены на серии по 10 особей в каждой. После операции и снятия нейролептанальгезии (наркоза) через желудочный зонд 70 крысам в течение 3-х дней вводились в количестве по 1 мл 3 раза в день следующие образцы хитозанов в качестве сравнительных контролей с лучшим образцом препарата:

1. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 180000-200000 дальтон, степень деацетилирования 75%, рН 7,0 (10 животных).

2. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 100000-120000 дальтон, степень деацетилирования 94-95%, рН 7,0 (10 животных).

3. Хитозан коллоидный, молекулярная масса 10000-150000 дальтон, степень деацетилирования 90%, рН 7,0 (10 животных).

4. Хитозан коллоидный, молекулярная масса 10000-150000 дальтон, степень деацетилирования 94-95%, рН 7,0 (10 животных).

5. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 100000-120000 дальтон, степень деацетилирования 75%, рН 7,0 (10 животных).

6. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 180000-2000000 дальтон, степень деацетилирования 94%, рН 7,0 (10 животных).

7. Контрольная группа животных (без лечения).

Результаты исследований представлены в таблице (см. в конце описания).

Все животные выведены из опыта на 4-е сутки. Результаты исследования образцов хитозана указывают на высокую эффективность препаратов 3 и 4. Применение этих образцов в течение трех дней предотвращает развитие деструктивной формы панкреатита, снимает тяжелую воспалительную реакцию крови и поджелудочной железы, степень эндогенной интоксикации, предотвращает летальность.

Пример 1. Трем белым крысам массой 200 г под нейролептанальгезией (кетамин+дроперидол) введена в проток поджелудочной железы смесь трипсина, этилового спирта и бриллиантового зеленого согласно техническому решению ((А. с. 1259328, G 09 В 23/28, от 23.09.1986; Бюл. 35). После снятия нейролептанальгезии крысам 1 и 2 в послеоперационном периоде в течение трех дней через желудочный зонд по 1 мл 3 раза в день введены: хитозан гелевый мелкодисперсный с молекулярной массой 180000 дальтон, степенью деацетилирования 75%, рН 7,0 (крыса 1); хитозан коллоидный с молекулярной массой 10000-15000 дальтон, степенью деацетилирования 94%, рН 7,0 (крыса 2). Крыса 3 с воспроизведенной моделью панкреонекроза не получала лечения. Через три дня крыса 1 передвигалась по клетке, принимала самостоятельно воду и пищу (+). На слизистой полости рта регистрировались признаки геморрагий. В периферической крови количество лейкоцитов составило 9900/мкл, активность амилазы крови составила 200 ЕД. Крыса 2 после третьего введения хитозана с молекулярной массой 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 94% активно передвигалась по клетке, активно самостоятельно принимала пищу и воду (+++). На слизистой полости рта регистрировались следы геморрагий. В периферической крови число лейкоцитов составило 5500/мкл, активность амилазы составила 148 ЕД. Животное 3 в течение трех дней не передвигалось по клетке, при свободном доступе к воде и пище не принимало пищу, слабо потребляло воду. На третьи сутки контрольное животное слабо реагировало на болевые раздражения, на слизистой оболочке полости рта - значительные кровоизлияния. Количество лейкоцитов в 1 мкл крови составило 16600, активность амилазы крови - 292 ЕД. На 4-е сутки все животные выведены из опыта.

Макро- и микроскопическая характеристика картины воспалительного процесса брюшной полости и поджелудочной железы.

На вскрытии в брюшной полости у крысы 1 - до 1 мл свободного экссудата, стенки главного панкреатического протока с выраженной воспалительной, преимущественно лейкоцитарной инфильтрацией, распространяющейся на более мелкие и междолевые протоки. В междольковой строме определяются немногочисленные цепочки из лейкоцитов, ацинусы не изменены (компьютерная система цветного изображения: парафиновый срез ткани поджелудочной железы 1, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 1010) (фиг.1).

На вскрытии в брюшной полости у крысы 2 - свободного экссудата нет, кишечник не вздут, единичные мелкие стеариновые бляшки на капсуле поджелудочной железы, железа слабо отечна. В препарате ткани поджелудочной железы 2 ацинусы не изменены, в междолевой строме определяются слабо выраженная лейкоцитарная инфильтрация, в сосудах умеренное полнокровие, стаза крови нет, стенки междольковых протоков не изменены (компьютерная система цветного изображения: парафиновый срез ткани поджелудочной железы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 1010) (фиг.2).

На вскрытии у крысы 3 (нелеченный контроль) поджелудочная железа резко увеличена в размерах, отечна, на железе и тонкой кишке, париетальной брюшине большое количество стеариновых бляшек желтого цвета, на железе определяются геморрагические очаги, в брюшной полости до 8 мл мутного экссудата.

В гистологическом препарате 3"а" поджелудочной железы (компьютерная система цветного изображения: парафиновый срез ткани поджелудочной железы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 104): картина резко выраженного отека, массивная лейкоцитарная инфильтрация междолевой и междольковой стромы с дискомплексацией клеток ацинусов. Сосуды полнокровны, расширены, в строме - очаги некрозов и кровоизлияний (фиг.3).

В препарате 3"б" поджелудочной железы (парафиновый срез ткани поджелудочной железы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 1010): участки жировых некрозов с краевым демаркационным воспалением, представленным лейкоцитарньм валом (фиг.4). 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ лечения деструктивной формы панкреатита путем введения в желудочно-кишечный тракт энтеросорбентов, отличающийся тем, что в желудочно-кишечный тракт три раза в день вводят по 1 мл коллоидного раствора, содержащего 0,02 г хитозана пищевого "Амидан" с мол. м. 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 90-95%.