СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЦЕЛИАКИИ

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЦЕЛИАКИИ


RU (11) 2293331 (13) C1

(51) МПК
G01N 33/53 (2006.01)
G01N 33/48 (2006.01) 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 29.08.2007 - действует 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2007.02.10 
(21) Регистрационный номер заявки: 2005133825/15 
(22) Дата подачи заявки: 2005.11.02 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2005.11.02 
(45) Опубликовано: 2007.02.10 
(56) Аналоги изобретения: ГРИГОРЬЕВ П.Я. и др. Краткое формулярное руководство по гастроэнтерологии и гепатологии. - М., 2003, с.91. UA 65394 А, 15.03.2004. ПАРФЕНОВ А.И. и др. Диагностика глютеновой энтеропатии и оценка эффективности ее лечения. Терапевтический архив. - М.: Медицина, 2002, №2, с.27-31. МУХИНА Ю.Г. и др. Определение антиглиадиновых антител при целиакии у
детей. Педиатрия. 1995, №5, с.9-12. VARGAS PEREZ M.L. et al. Serological and genetic markers in the diagnosis and follow-up of coeliac disease. An. Pediatr. (Bare)., 2005, 62 (5), p.412-419, PMID: 15871822, реф., [он-лайн], [найдено 03.07.2006], найдено из базы данных PubMed. KAUKINEN К. et al. IgA-class transglutaminase antibodies in evaluating the efficacy of gluten-free diet in coeliac disease. Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 2002, 14 (3), p.311-315, PMID: 11953698, реф., [он-лайн], [найдено 03.07.2006], найдено из базы данных PubMed.

(72) Имя изобретателя: Лазебник Леонид Борисович (RU); Парфенов Асфольд Иванович (RU); Гудкова Раиса Борисовна (RU); Потапова Валентина Борисовна (RU); Крумс Лариса Михайловна (RU); Лычкова Алла Эдуардовна (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Лазебник Леонид Борисович (RU); Парфенов Асфольд Иванович (RU); Гудкова Раиса Борисовна (RU); Потапова Валентина Борисовна (RU); Крумс Лариса Михайловна (RU); Лычкова Алла Эдуардовна (RU) 
(98) Адрес для переписки: 129343, Москва, ул. Амундсена, 11, корп.1, кв.53, А.Э. Лычковой 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЦЕЛИАКИИ
Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии. Больному целиакией через некоторое время после начала лечения проводят иммунологическую диагностику состояния, а также морфологическое исследование биоптатов тонкой кишки. При снижении титра антител к эндомизию до 1:40 и ниже, снижении концентрации антител к тканевой трансглютаминазе до 30 ме/мл и ниже, снижении уровня антител к глиадину до 50 ме/мл и ниже, снижении титра антител к ретикулину до 1:40 и менее, снижении уровня межэпителиальных лимфоцитов до 45 клеток на 100 энтероцитов и ниже, уменьшении отека и деформации коллагеновых фибрилл при сохранении их поперечной исчерченности, восстановлении структур базальных мембран кровеносных сосудов, при восстановлении равномерного распределения гликозаминогликанов в межклеточном матриксе, при восстановлении отграниченности эндомизия от окружающих тканей определяют лечение целиакии как эффективное. Использование способа позволяет повысить точность определения эффективности лечения целиакии.




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии, и может быть применено в качестве способа определения эффективности лечения целиакии.

Известен способ определения эффективности лечения целиакии с помощью клинического и иммунологического исследования, при котором у пациентов с синдромом малабсорбции, но не у пациентов у которых диагноз был поставлен на основе минимальных симптомов или скрининга на наличие антител продолжительность предстоящей жизни составляла не более трех лет (G.Corrao et al. Mortality in patients with celiac disease and their relatives. A cohort study. Lancet 2001; 358:356-361). Данный способ принят за аналог.

Известен способ определения эффективности лечения целиакии путем проведения морфологического исследования биоптатов в динамике, отличающийся тем, что на фоне аглютеновой диеты констатируют восстановление нормального состояния ворсинок кишки (П.Я.Григорьев, Э.П.Яковенко. Краткое формулярное руководство по гастроэнтерологии и гепатологии. М., 2003, с.91). Данный способ принят за прототип.

Однако изменение состояния ворсинок может быть связано с лямблиозом, что ограничивает точность способа-прототипа.

Целью изобретения является повышение точности определения эффективности лечения целиакии.

Технический результат достигается тем, что при снижении титра антител к эндомизию до 1:40 и ниже, снижении концентрации антител к тканевой трансглютаминазе до 30 ме/мл и ниже, снижении уровня антител к глиадину до 50 ме/мл и ниже, снижении титра антител к ретикулину до 1:40 и менее, снижении уровня межэпителиальных лимфоцитов до 45 клеток на 100 энтероцитов и ниже, уменьшении отека и деформации коллагеновых фибрилл при сохранении их поперечной исчерченности, восстановлении структур базальных мембран кровеносных сосудов, при восстановлении равномерного распределения гликозаминогликанов в межклеточном матриксе, при восстановлении отграниченности эндомизия от окружающих тканей определяют лечение целиакии как эффективное.

Способ осуществляется следующим образом.

Больной поступает с жалобами на боли в животе и в области позвоночника, похудание, диарею, носящую хронический характер, слабость, утомляемость. Из анамнеза известно, что проявление симптомов может быть связано с перенесенной острой кишечной инфекцией, с оперативным вмешательством.

При осмотре обращают внимание на дефицит роста и массы тела, вздутие живота, пигментацию кожи. Пальпация живота болезненна. В анализе крови - железодефицитная анемия.

Проводят иммунологическую диагностику состояния больного: титр антител к эндомизию составляет 1:40-1:1280, концентрация антител к тканевой трапсппотаминазе 30-105 ме/мл, уровень антител к глиадину 50-100 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:40-1:80.

При эндоскопическом исследовании обнаруживают атрофию слизистой.

В биоптатах тонкой кишки выявлено сглаживание рельефа слизистой оболочки за счет укорочения в исчезновения ворсинок и удлинения крипт, инфильтрация собственной пластинки лимфоцитами и плазматическими клетками. В эпителии увеличено количество межэпителиальных лимфоцитов (45-65 клеток на 100 энтероцитов).

При электронно-микроскопическом исследовании обнаружены изменения коллагеновых и ретикулиновых волокон. Ряд коллагеновых фибрилл отличаются отсутствием четких очертаний за счет набухания и деформации и утрачивают поперечную исчерченность. На месте разрушающихся фибрилл образованы скопления плотного бесструктурного вещества, фиксирующего пероксидазную метку, которая выявляет антигенные детерминанты коллагена III типа. Гранулы пероксидазы обнаруживаются также на концах коллагеновых фибрилл и на их боковой поверхности, что отражает структурные изменения коллагена в составе фибрилл. Базальная мембрана эпителия разрыхлена и утолщена, отмечены участки фрагментации и расслоения. Базальная мембрана кровеносных сосудов утрачивает четкость очертаний за счет очагового разрыхления и утолщения. В межклеточном матриксе выявлено неравномерное распределение гликозаминогликанов в виде мелких гранул рутений-положительного вещества, адгезия которых к фибриллярным структурам интерстиция и базальным мембранам снижена. Эндомизий рыхлый, в связи с чем утрачена отграниченность его от окружающих тканей. Выявленные выраженные изменения в структурах, содержащих коллаген I, III и IV типов и гликозаминогликаны способствуют развитию реакций иммунной системы с увеличением количества лимфоцитов и в эпителии, и в собственной пластинке.

Патологический процесс при целиакии сопровождается глубокими морфологическими изменениями тонкой кишки с вовлечением элементов коллагеновой стромы.

Поставлен диагноз - целиакия, впервые выявленная.

Комплексное лечение включает использование аглютеновой диеты, применение препаратов, восстанавливающих уровень сывороточного железа, осуществление коррекции дефицита B1, В 6, PP1, Са.

Через полгода-год после начала лечения проводят контрольное обследование.

Находят снижение титра антител к эндомизию до 1:40 и ниже снижение концентрации антител к тканевой трансглютаминазе до 30 ме/мл и ниже, снижение уровня антител к глиадину до 50 ме/мл и ниже, снижение титра антител к ретикулину до 1:40 и менее, снижение уровня межэпителиальных лимфоцитов до 45 клеток на 100 энтероцитов и ниже. Отмечается уменьшение отека и деформации коллагеновых фибрилл при сохранении их поперечной исчерченности, восстановление структур базальных мембран кровеносных сосудов; восстановление равномерного распределения гликозаминогликанов в межклеточном матриксе; восстановление отграниченности эндомизия от окружающих тканей. Перечисленная совокупность качественных и количественных признаков позволяет определить проведенное лечение целиакии как эффективное.

Способ далее поясняют примеры его конкретной реализации.

Пример 1.

Больной Н., 32 лет, поступил с жалобами на боли в животе, похудание, диарею, носящую хронический характер. Из анамнеза известно, что больной перенес острую кишечную инфекцию (токсикоинфекцию).

При осмотре: дефицит роста и массы тела, вздутие живота. Пальпация живота болезненна. Общий анализе крови - уровень гемоглобина и содержание эритроцитов снижены, что свидетельствует о наличии железодефицитной анемии.

Проводят иммунологическую диагностику состояния больного: титр антител к эндомизию составляет 1:60, концентрация антител к тканевой трансглютаминазе 35 ме/мл, уровень антител к глиадину 54 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:60.

При эндоскопическом исследовании обнаруживают атрофию слизистой.

При гистологическом исследовании обнаруживают укорочение ворсинок и удлинение крипт. В биоптатах тонкой кишки выявлено сглаживание рельефа слизистой оболочки за счет укорочения в исчезновения ворсинок, инфильтрация собственной пластинки лимфоцитами и плазматическими клетками. В эпителии увеличено количество межэпителиальных лимфоцитов (48 клеток на 100 энтероцитов).

При электронно-микроскопическом исследовании обнаружены изменения коллагеновых и ретикулиновых волокон. Ряд коллагеновых фибрилл отличаются отсутствием четких очертаний с утратой поперечной исчерченности. На месте разрушающихся фибрилл образованы скопления плотного бесструктурного вещества, фиксирующего пероксидазную метку, которая выявляет антигенные детерминанты коллагена III типа, и обнаруживаются на концах коллагеновых фибрилл и на их боковой поверхности. Базальная мембрана эпителия разрыхлена и утолщена, отмечены участки фрагментации и расслоения. Базальная мембрана кровеносных сосудов очагово разрыхлена и утолщена. В межклеточном матриксе выявлено неравномерное распределение гликозаминогликанов в виде мелких гранул рутений-положительного вещества со снижением адгезии их к фибриллярным структурам интерстация и базальным мембранам. Эндомизий разрыхлен. Обнаружены выраженные изменения в структурах, содержащих коллаген I, III и IV типов и гликозаминогликаны.

Поставлен диагноз - целиакия.

Комплексное лечение включает использование аглютеновой диеты, применение препаратов, восстанавливающих уровень сывороточною железа, осуществление коррекции дефицита B1, В 6, PP1, Са.

Через полгода после начала лечения проводят контрольное обследование: титр антител к эндомизию 1:40, концентрация антител к тканевой трансглюгаминазе 30 ме/мл, уровень антител к глиадину 50 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:40, уровень межэпителиальных лимфоцитов 45 клеток на 100 энтероцитов. Отмечается уменьшение отека и деформации коллагеновых фибрилл при сохранении их поперечной исчерченности, восстановление структур базальных мембран кровеносных сосудов; восстановление равномерного распределения гликозаминогликаиов в межклеточном матриксе; восстановление отграниченности эндомизия от окружающих тканей. Перечисленная совокупность качественных и количественных признаков позволяет определить проведенное лечение целиакии как эффективное.

Больной соблюдает аглютеновую диету. Последующее катамнестическое наблюдение подтвердило точность оценки эффективности лечения.

Пример 2.

Больная С., 26 лет, поступила с жалобами на боли в животе и в области позвоночника, похудание, диарею, носящую хронический характер, слабость, утомляемость, нарушение менструального цикла. Из анамнеза известно, что проявление симптомов связано с перенесенным оперативным вмешательством на органах малого таза.

При осмотре: дефицит массы тела, вздутие живота, пигментация кожи. Пальпация живота болезненна. В анализе крови - железодефицитная анемия.

При иммунологическом исследовании: титр антител к эндомизию составляет 1:1280, концентрация антител к тканевой трансглютаминазе 105 ме/мл, уровень антител к глиадину 100 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:80.

В биоптатах тонкой кишки выявлено сглаживание рельефа слизистой оболочки за счет укорочения в исчезновения ворсинок и удлинение крипт; инфильтрация собственной пластинки лимфоцитами и плазматическими клетками. В эпителии увеличено количество межэпителиальных лимфоцитов (65 клеток на 100 энтероцитов).

При электронно-микроскопическом исследовании обнаружены изменения коллагеновых и ретикулиновых волокон. Коллагеновые фибриллы набухшие и деформированные, поперечная исчерченность утрачена. На месте разрушающихся фибрилл образованы скопления плотного бесструктурного вещества, фиксирующего пероксидазную метку, которая выявляет антигенные детерминанты коллагена III типа. Гранулы пероксидазы обнаружены также на концах коллагеновых фибрилл и на их боковой поверхности, что отражает структурные изменения коллагена в составе фибрилл. Базальная мембрана эпителия разрыхлена и утолщена, отмечены участки фрагментации и расслоения. Базальная мембрана кровеносных сосудов очагово разрыхлена и утолщена. В межклеточном матриксе выявлено неравномерное распределение гликозаминогликанов в виде мелких гранул рутений-положительного вещества, адгезия которых к фибриллярным структурам интерстиция и базальным мембранам снижена. Эндомизий рыхлый, без отграничения его от окружающих тканей. Обнаружены выраженные изменения в структурах, содержащих коллаген I, III и IV типов и гликозамикогликаны.

Поставлен диагноз - целиакия, впервые выявленная.

Лечение: аглютеновая диета; препараты, восстанавливающие уровень сывороточного железа; коррекция дефицита B1, В6, PP 1, Ca. В результате проведенного лечения у больной исчезли боли в области живота и позвоночника, уменьшилась пигментация кожи, восстановился менструальный цикл.

Через год после начала лечения при строгом соблюдении аглютеновой диеты проводят контрольное обследование.

Иммунологическое исследование: титр антител к эндомизию 1:30, концентрация антител к тканевой трансглютаминазе 20 ме/мл, уровень антител к глиадину 40 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:30, уровень межэпителиальных лимфоцитов 38 клеток на 100 энтероцитов. Отмечается уменьшение отека и деформации коллагеновых фибрилл при сохранении их поперечной исчерченности, восстановление структур базальных мембран кровеносных сосудов; восстановление равномерного распределения гликозаминогликанов в межклеточном матриксе; восстановление ограниченности эндомизия от окружающих тканей. Перечисленная совокупность качественных и количественных признаков позволяет определить проведенное лечение целиакии как эффективное.

Последующее катамнестическое наблюдение в течение 5 лет подтвердило оценку проведенного лечения как эффективного.

Пример 3.

Больной С., 33 лет, поступил с жалобами на похудание, диарею, слабость, утомляемость, боли в животе. Из анамнеза известно, что больной перенес пищевую токсикоинфекцию.

При осмотре - больной истощен, пальпация живота, болезненна. В анализе крови - снижение концентрации гемоглобина и содержания эритроцитов.

При гистологическом исследовании обнаруживают укорочение ворсинок и удлинение крипт.

Иммунологически: титр антител к эндомизию составляет 1:640, концентрация антител к тканевой трансглютаминазе 75 ме/мл, уровень антител к глиадину 80 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:80.

При эндоскопическом исследовании обнаруживают атрофию слизистой.

В биоптатах тонкой кишки выявлено сглаживание рельефа слизистой оболочки за счет укорочения и исчезновения ворсинок, инфильтрация собственной пластинки лимфоцитами и плазматическими клетками. В эпителии увеличено количество межэпителиальных лимфоцитов (53 клеток на 100 энтероцитов).

При электронно-микроскопическом исследовании обнаружены изменения коллагеновых и ретикулиновых волокон. Коллагеновые фибриллы отличаются отсутствием четких очертаний и утрачивают поперечную исчерченность. На месте разрушающихся фибрилл образованы скопления плотного бесструктурного вещества, фиксирующего пероксидазную метку, выявляющую антигенные детерминанты коллагена III типа. Гранулы пероксидазы обнаруживаются на концах коллагеновых фибрилл и на их боковой поверхности. Базальная мембрана эпителий разрыхлена и утолщена, и участками фрагментирована и расслоена. Базальная мембрана кровеносных сосудов очагово разрыхлена и утолщена. В межклеточном матриксе выявлено неравномерное распределение гликозаминогликанов в виде мелких гранул рутений-положительного вещества, адгезия которых к фибриллярным структурам интерстиция и базальным мембранам снижена. Эндомизий рыхлый, в связи с чем утрачена отграниченность его от окружающих тканей.

Поставлен диагноз - целиакия, впервые выявленная.

Комплексное лечение в стационаре включает использование аглютеновой диеты, применение препаратов, восстанавливающих уровень сывороточного железа, осуществление коррекции дефицита B1, В6, PP1, Ca. После выписки больной не соблюдал аглютеновую диету и через 1 год с обострением поступил в клинику с жалобами на диарею, слабость, утомляемость, боли в животе.

При осмотре - пальпация живота болезненна.

Иммунологически: титр антител к эндомизию составляет 1:370, концентрация антител к тканевой трансглютаминазе 55 ме/мл, уровень антител к глиадину 40 ме/мл, титр антител к ретикулину 1:60.

При эндоскопическом исследовании обнаруживают атрофию слизистой.

В биоптатах тонкой кишки выявлено сглаживание рельефа слизистой оболочки за счет укорочения и исчезновения ворсинок, инфильтрация собственной пластинки лимфоцитами и плазматическими клетками. В эпителии увеличено количество межэпителиальных лимфоцитов (48 клеток на 100 энтероцитов).

При электронно-микроскопическом исследовании обнаружены изменения коллагеновых и ретикулиновых волокон. Коллагеновые фибриллы отличаются отсутствием четких очертаний. На месте разрушающихся фибрилл имеются скопления плотного бесструктурного вещества, фиксирующего пероксидазную метку. Гранулы пероксидазы обнаруживаются на концах коллагеновых фибрилл и на их боковой поверхности. Базальная мембрана эпителия разрыхлена и утолщена. Базальная мембрана кровеносных сосудов очагово разрыхлена и утолщена. В межклеточном матриксе выявлено неравномерное распределение гликозаминогликанов в виде мелких гранул рутений-положительного вещества, адгезия которых к фибриллярным структурам интерстиция и базальным мембранам снижена. Эндомизий рыхлый, нечетко отграничен от окружающих тканей.

На основании проведенного иммунологического и морфологического исследования показана неполная эффективность лечения при подтверждении основного диагноза.

Согласно предложенному способу проведена оценка эффективности лечения целиакии у 24 больных. Правильность оценки эффективности лечения целиакии подтверждена катамнестическими наблюдениями.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ определения эффективности лечения целиакии, включающий проведение иммунологического и морфологического исследования в динамике, отличающийся тем, что при снижении титра антител к эндомизию до 1:40 и ниже, снижении концентрации антител к тканевой трансглютаминазе до 30 ме/мл и ниже, снижении уровня антител к глиадину до 50 ме/мл и ниже, снижении титра антител к ретикулину до 1:40 и менее, снижении уровня межэпителиальных лимфоцитов до 45 клеток на 100 энтероцитов и ниже, уменьшении отека и деформации коллагеновых фибрилл при сохранении их поперечной исчерченности, восстановлении структур базальных мембран кровеносных сосудов, при восстановлении равномерного распределения гликозаминогликанов в межклеточном матриксе, при восстановлении отграниченности эндомизия от окружающих тканей определяют лечение целиакии как эффективное.