СПОСОБ АУТОФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА

СПОСОБ АУТОФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА

RU (11) 2286573 (13) C2

(51) МПК
G01N 33/52 (2006.01) 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
к патенту Российской Федерации 
Статус: по данным на 27.12.2006 - действует 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2006.10.27 
(21) Регистрационный номер заявки: 2005101731/14 
(22) Дата подачи заявки: 2005.01.26 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2005.01.26 
(43) Дата публикации заявки: 2006.07.10 
(45) Опубликовано: 2006.10.27 
(56) Аналоги изобретения: СИНЯЕВА Н.А. и др. Исследование аутофлюоресценции и флюоресценции АЛК-индуцированного протопорфирина IX микрофлоры полости рта при воспалительных заболеваниях тканей пародонта. - Российский Биотерапевтический журнал, 2003, т.2, №4, с.72-79. RU 2109287 С1, 20.04.1998. RU 2210770 C2, 19.11.2001. JEPSEN S, et al. Springer Elevated levels of collagen cross-link residues in gingival tissues and crevicular fluid of teeth with periodontal disease. Eur J Oral Sci. 2003 Jun; 111(3): 198-202. 
(72) Имя изобретателя: Синяева Мария Леонидовна (RU); Мамедов Адиль Аскерович (RU); Лощенов Виктор Борисович (RU); Волкова Анна Ивановна (RU); Васильченко Сергей Юрьевич (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова (RU); Центр естественно-научных исследований Института общей физики РАН (RU) 
(98) Адрес для переписки: 119992, Москва, ул. Трубецкая, 8, стр.2, ММА им. И.М. Сеченова, отдел интеллектуальной собственности 

(54) СПОСОБ АУТОФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА
Изобретение относится к области медицины, в частности к стоматологии. Способ позволяет повысить точность оценки расположения патогенной микрофлоры в пародонте при заболеваниях тканей пародонта, возникающих вследствие ее воздействия, за счет учета микрофлоры, находящейся в более глубоких слоях пародонта. Измеряют аутофлюоресценцию в красном диапазоне спектра исследуемого участка Ib и интенсивность аутофлюоресценции участка пародонта с минимальной интенсивностью аутофлюоресценции In, затем обрабатывают исследуемый участок раствором Шиллера-Писарева, повторно измеряют интенсивность аутофлюоресценции исследуемого участка пародонта Iа и рассчитывают коэффициенты К1=I а/Ib и К2=In/Iа и в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,700 до 1,000 и коэффициент К2 - от 0,005 до 0,350, диагностируют наличие глубокорасположенной микрофлоры, а в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,350 до 0,700 и коэффициент К2 - от 0,350 до 0,700, диагностируют наличие глубокорасположенной и поверхностной микрофлоры. 3 ил. 




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к медицине, а именно к способам диагностики заболеваний тканей пародонта.

Известен способ диагностики заболеваний тканей пародонта с применением папиллярно-маргинально-альвеолярного индекса (индекс РМА), заключающийся в том, что слизистую десны окрашивают раствором, содержащим 1 г кристаллического йода, 2 г калия йодида и 20 мл дистиллированной воды (раствор Шиллера-Писарева), или 3% спиртовым раствором йода и путем оценки состояния десны в различных зонах (межзубные сосочки, маргинальная и альвеолярная десна) вследствие изменения цвета слизистой после окрашивания диагностируют наличие воспалительного процесса (И.В.Безрукова, А.И.Грудянов "Агрессивные формы пародонтита", Медицинское информационное агентство, Москва, 2002 г., стр.43).

Недостатком вышеуказанного способа является субъективность, связанная с визуальной оценкой степени окрашивания слизистой десны при воспалении, и, как следствие, отсутствие количественной оценки результатов.

Наиболее близким к предложенному способу является способ, заключающийся в том, что при помощи измерения спектров аутофлюоресценции пародонта, обусловленных флюоресценцией порфиринов патологической микрофлоры, оценивают наличие микрофлоры в слизистой оболочке десны.

Для измерения аутофлюоресценции используется волоконно-оптический спектрометр LESA-01-BIOSPEC, возбуждение аутофлюоресценции осуществляется в красном диапазоне спектра с помощью He-Ne лазера (длина волны 632,8 нм). Интенсивность аутофлюоресценции микрофлоры тканей пародонта у пациентов контрольной группы (пациенты без видимых клинических признаков воспаления - "условно здоровые") оказывается значительно ниже, чем у пациентов с воспалительными заболеваниями тканей пародонта (катаральный гингивит, пародонтит различной степени тяжести), что подтверждает имеющуюся клиническую картину (Синяева и соавт. "Исследование аутофлюоресценции и флюоресценции АЛК-индуцированного протопорфирина IX микрофлоры полости рта при воспалительных заболеваниях тканей пародонта". Российский Биотерапевтический Журнал №4, Том 2, 2003 г., стр.72-79).

Недостатком данного способа является невозможность оценки распределения микрофлоры по глубине пародонта ввиду того, что аутофлюоресценция поверхностной микрофлоры экранирует аутофлюоресценцию микрофлоры, находящейся в более глубоких слоях слизистой оболочки десны.

Задачей, на решение которой направлено данное изобретение, было создание способа оценки распределения микрофлоры по глубине пародонта посредством разделения аутофлюоресценции поверхностной микрофлоры и аутофлюоресценции микрофлоры, находящейся в глубине ткани пародонта.

Поставленная задача решается способом, заключающимся в том, что при возбуждении в красном диапазоне спектра измеряют аутофлюоресценцию исследуемого участка I b и интенсивность аутофлюоресценции участка пародонта с минимальной интенсивностью аутофлюоресценции In, затем обрабатывают исследуемый участок раствором Шиллера-Писарева, повторно измеряют интенсивность аутофлюоресценции исследуемого участка пародонта Iа и рассчитывают коэффициенты K 1=Ia/Ib и K2=In /Ia, и в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,700 до 1,000 и коэффициент К2 - от 0,005 до 0,350, диагностируют наличие глубокорасположенной микрофлоры, а в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,350 до 0,700 и коэффициент К2 - от 0,350 до 0,700, диагностируют наличие глубокорасположенной и поверхностной микрофлоры.

Технический результат, который может быть получен при осуществлении данного изобретения, заключается в том, что разработан объективный способ определения состояния пародонта, позволяющий оценить распределение микрофлоры по глубине пародонта, проводить диагностику заболеваний пародонта, оценивать эффективность их лечения и объективно сравнивать различные способы лечения.

Способ осуществляется следующим образом.

С помощью спектроанализатора (например, LESA-01-BIOSPEC) при возбуждении в красном диапазоне спектра измеряют интенсивность аутофлюоресценции нормального участка пародонта In , где в качестве нормы берут участок с минимальной интенсивностью аутофлюоресценции, и интенсивность аутофлюоресценции Ib исследуемого участка пародонта, что позволяет регистрировать суммарную аутофлюоресценцию микрофлоры, находящейся как на поверхности, так и в более глубоких слоях тканей пародонта. Смазывают участок раствором Шиллера-Писарева. Поскольку йод, входящий в раствор Шиллера-Писарева, обладает антисептическим действием, то при смазывании раствором пародонта происходит элиминация поверхностной микрофлоры. Затем с помощью спектроанализатора (например, LESA-01-BIOSPEC) производят повторное измерение интенсивности аутофлюоресценции исследуемого участка Iа, при котором регистрируется только аутофлюоресценция микрофлоры, находящейся в глубине пародонта. Рассчитывают коэффициенты K1=Ia/Ib и К2=In/Iа. Первый коэффициент определяет долю микрофлоры, находящейся в глубине пародонта, относительно ее общего количества, вторым коэффициентом определяется соотношение между количеством глубокорасположенной микрофлоры в исследуемом участке и нормальным уровнем микрофлоры в пародонте. В случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,700 до 1,000 и коэффициент К2 - от 0,005 до 0,350, т.е. снижение концентрации микрофлоры за счет элиминации поверхностной микрофлоры незначительно, и концентрация оставшейся, т.е. глубокорасположенной, микрофлоры значительно превышает нормальный уровень микрофлоры в пародонте, диагностируют наличие глубокорасположенной микрофлоры, а в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,350 до 0,700 и коэффициент К2 - от 0,350 до 0,700, т.е. наблюдается снижение концентрации микрофлоры за счет элиминации поверхностной микрофлоры, но концентрация оставшейся, а именно глубокорасположенной, микрофлоры остается выше нормального уровня микрофлоры, диагностируют наличие глубокорасположенной и поверхностной микрофлоры.

Числовые значения предложенных коэффициентов были подтверждены сопоставлением результатов, полученных предложенным способом аутофлюоресцентной диагностики заболеваний пародонта, и результатов, полученных с помощью традиционных микробиологических методов, применяемых в современной клинической стоматологии для количественного определения микрофлоры в тканях пародонта.

Предложенный способ может быть использован для диагностики и оценки эффективности лечения различных заболеваний пародонта, возникающих вследствие воздействия патогенной микрофлоры.

Пример 1.

Пациентка Н. наблюдалась в клинике с диагнозом хронический генерализованный пародонтит средней степени тяжести, поставленным на основании традиционных стоматологических способов обследования. Особенностью данного заболевания является значительное распространение патогенной микрофлоры на глубине пародонта. При измерении аутофлюоресценции микрофлоры в нормальных и патологически измененных участках пародонта до и после смазывания раствором Шиллера-Писарева интенсивность аутофлюоресценции нормального участка пародонта была равна 0,101 отн.ед., исследуемого участка до смазывания - 1,000 отн.ед., после смазывания - 0,936 отн.ед. (фиг.1). Таким образом, коэффициенты K1=0,936 и К 2=0,108, т.е. концентрация поверхностной микрофлоры составляет небольшую долю от общей концентрации микрофлоры, а концентрация глубокорасположенной микрофлоры значительно превышает концентрацию, характерную для нормальных участков пародонта, что подтверждается клинически поставленным диагнозом и патогенетической терапией.

Пример 2.

Пациент В. наблюдался в клинике с диагнозом хронический пародонтит легкой степени тяжести. Особенностью данного заболевания является наличие патогенной микрофлоры как в глубоких, так и в поверхностных слоях пародонта. При измерении аутофлюоресценции микрофлоры в нормальных и патологически измененных участках пародонта до и после смазывания раствором Шиллера-Писарева интенсивность аутофлюоресценции нормального участка пародонта была равна 0,320 отн.ед., исследуемого участка до смазывания - 1,000 отн.ед., после смазывания - 0,607 отн.ед. (фиг.2). Таким образом, коэффициенты K1=0,607 и К2=0,527, т.е. концентрация поверхностной микрофлоры приблизительно равна концентрации микрофлоры, расположенной в глубине пародонта, и в то же время превышает концентрацию, характерную для нормальных участков пародонта, что подтверждается клинически поставленным диагнозом и патогенетической терапией.

Пример 3.

Пациентка М. наблюдалась в клинике с диагнозом хронический локализованный катаральный гингивит легкой степени. Характерной особенностью данного заболевания является превалирующее наличие патогенной микрофлоры в поверхностных слоях слизистой оболочки десны. При измерении аутофлюоресценции микрофлоры в нормальных и патологически измененных участках пародонта до и после смазывания раствором Шиллера-Писарева интенсивность аутофлюоресценции нормального участка пародонта была равна 0,123 отн.ед., исследуемого участка до смазывания - 1,000 отн.ед., после смазывания - 0,172 отн.ед. (фиг.3). Таким образом, коэффициенты К1=0,172 и К2=0,715, т.е. микрофлора преимущественно располагалась на поверхности пародонта и была удалена во время смазывания, а концентрация оставшейся глубокорасположенной микрофлоры находится на уровне концентрации в нормальных участках пародонта, что подтверждается клинически поставленным диагнозом и патогенетической терапией.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ оценки расположения патогенной микрофлоры в пародонте при заболеваниях тканей пародонта, возникающих вследствии ее воздействия, отличающийся тем, что измеряют аутофлюоресценцию в красном диапазоне спектра исследуемого участка Ib и интенсивность аутофлюоресценции участка пародонта с минимальной интенсивностью аутофлюоресценции In, затем обрабатывают исследуемый участок раствором Шиллера-Писарева, повторно измеряют интенсивность аутофлюоресценции исследуемого участка пародонта Iа и рассчитывают коэффициенты К1=I а/Ib и К2=In/Iа и в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,700 до 1,000 и коэффициент К2 - от 0,005 до 0,350, диагностируют наличие глубокорасположенной микрофлоры, а в случае, когда коэффициент K1 лежит в диапазоне от 0,350 до 0,700 и коэффициент К2 - от 0,350 до 0,700 диагностируют наличие глубокорасположенной и поверхностной микрофлоры.