СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОЙ ИМПЛАНТАЦИИ НИКЕЛИДА ТИТАНА

СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОЙ ИМПЛАНТАЦИИ НИКЕЛИДА ТИТАНА

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ



ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА 
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (19) RU (11) 2237242 (13) C2

(51) 7 G01N33/48 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 19.06.2007 - прекратил действие, но может быть восстановлен 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 2004.09.27 
(21) Регистрационный номер заявки: 2002129551/15 
(22) Дата подачи заявки: 2002.11.04 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2002.11.04 
(43) Дата публикации заявки: 2004.04.27 
(45) Опубликовано: 2004.09.27 
(56) Аналоги изобретения: SU 1777087 C1, 23.11.1992. RU 2157542 С1, 10.10.2000. RU 2150914 С1, 20.06.2000. RU 2154274 С1, 10.08.2000. RU 2127885 С1, 20.03.1999. 
(72) Имя изобретателя: Саранчина Э.Б. (RU); Горчаков В.Н. (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (RU) 
(98) Адрес для переписки: 630110, г.Новосибирск, а/я 73, И.П. Шапеевой 

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОЙ ИМПЛАНТАЦИИ НИКЕЛИДА ТИТАНА 
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и предназначено для прогнозирования течения постимплантационного периода. Исследуют активность ферментов энергетического метаболизма лимфоцитов крови. Определяют активность ЛДГ, СДГ, -ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической на 3, 7, 14 и 30 сутки после имплантации. При повышении активности фермента аэробного гликолиза (СДГ) к 7 суткам, а анаэробного гликолиза (ЛДГ) и активности ферментов глицерофосфатного “челночного механизма” (-ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической) к 30 суткам прогнозируют состоятельность и диагностическую эффективность имплантации. Способ позволяет сделать долгосрочный прогноз эффективности имплантации. 



ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и другим областям медицины, использующим никелид титана для имплантации, в частности к методам прогнозирования течения постимплантационного периода, состоятельности и долгосрочного успеха стоматологической имплантации никелида титана.

Известны способы прогнозирования и оценки медицинской эффективности имплантологического лечения, включающие клинические, клинико-статистические, клинико-рентгенологические, функциональные и другие подходы. На Гарвардской согласительной конференции по имплантологии в 1978 г. в качестве критериев успешности дентальной имплантации рекомендовали использовать показатели подвижности имплантата (менее 1 мм в каждом направлении); рентгеновскую картину убыли кости (менее 1/3 длины имплантата); клинические признаки терапевтически легко устраняемого гингивита, отсутствие симптомов инфекции, отсутствие патологических изменений нервов, верхнечелюстных пазух и носовой полости; наконец, 75% успеха лечения после 5 лет (Schnitman Р.А., Shulman L.B. Recommendations on the consensus development conference on dental implants // J. Am. Dent. Assoc. - 1979; 98. - P.373).

Известен способ Branemark P-I, Albrektsson Т. и соавт. (1986), Zarb G.A. (1989) (Branemark P.-I., Zarb G.A., Albrektsson Т. // Osseointegration in Clinical Dentistry. - Chicago. - Quintessence, 1985. - P.11-76), предложивший уточнить и расширить эти критерии, сделав их в целом более жесткими, а именно: одиночные и неблокированные имплантаты клинически не должны быть подвижными; рентгенологически отсутствие периимплантатных изменений, средняя убыль костной ткани менее 0,2 мм через год после операции; отсутствие болей, инфекции, невропатии, парестезии или повреждения нервных каналов, эстетическая удовлетворенность протетической реабилитацией; 85% успеха после 5 лет и 80% после 10 лет. Spiekermann (1994 г.) для объективизации критериев успешности лечения предложил использовать периотест (от -8 до +10), измерения глубины десневых карманов (не более 5 мм за 2 контрольных обследования) (цит. по Миргазизов М.З., Миргазизов А.М. Критерии эффективности в дентальной имплантологии //Клиническая стоматология. - 2000. - №2. - С.4-7).

Известен критерий оценки эффективности функционирования имплантатов, позволяющий определить по клиническим признакам состояние каждого имплантата в динамике, способ предусматривал оценку имплантатов по балльной системе. На основании этих критериев может быть построена статистика результативности имплантологической реабилитации, причем можно выделить три вида статистики: а) по отношению к числу имплантатов; 2) по отношению к числу больных; 3) "связанная" статистика по отношению к числу больных с определенным состоянием имплантатов (Миргазизов М.З., Миргазизов А.М. Критерии эффективности в дентальной имплантологии // Российский стоматологический журнал. - 2000.- №2. - С.4-7).

Известны методы лабораторно-инструментальной оценки функционального состояния имплантата: определение плотности кости (денситометрия), ультразвуковая диагностика, исследование десневой жидкости, изучение микроциркуляции слизистой оболочки альвеолярного отростка и десны в зоне расположения имплантата, гнатодинамометрия, функциональные пробы и др. (Ушаков Р.В., Васильев В.Г. и др. Рентгенологическая оценка состояния костной ткани при подготовке к эндооссальной имплантации // Казанский вестник стоматологии. - 1996. - №2. С.131-132; Бабушкин Е.В. Восстановление дефектов зубных рядов протезами на основе композиционных материалов у больных сахарным диабетом. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Новосибирск, 1999. - 28 с.; Поздеев А.И. Восстановление целостности зубных рядов с использованием пористых имплантатов при сахарном диабете. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Новосибирск, 1999. - 17 с.; Иванов С.Ю., Шарапов Г.Н., Калашникова О.Ю. и др. Прогнозирование осложнений стоматологической имплантации по показателям перекисного окисления липидов и обмена глутатиона // Новое в стоматологии. - 1999. - №2 (99). - С.74-78; Перова М.Д., 1999; Кузнецов Е.К., Иванов С.Ю., Царев В.Н. и др. Оценка эффективности применения антибактериальных препаратов ровамицина и линкомицина с целью профилактики воспалительных осложнений операции внутрикостной имплантации // Новое в стоматологии. - 2001. - №9(99). - С.90-94; Перова М.Д. К вопросу о профилактике деструкции околоимплантатных тканевых структур. // Новое в стоматологии. - 1996. - №2(72), спец выпуск. - С.33-41; Параскевич В.Л. Диагностика регионарного остеопороза челюстей при планировании имплантации // Российский стоматологический журнал. - 2000. - №2. - С.33-35; Матвеева А.И., Гветадзе Р.Ш., Дронов Д.А. и др. Разработка клинических методов диагностики и профилактики в дентальной имплантологии // Российский стоматологический журнал. - 2000. - №2. - С.9-10). Ценность этих методов не вызывает сомнений, однако они труднодоступны для широкой клинической практики. Недостатком данных методов является их местное воздействие на уже имеющийся очаг изменений периимплантатных тканей, что осложняет течение послеоперационного периода, отсутствие у них воздействия на патогенетические звенья процесса отторжения имплантата.

Наиболее близким к заявляемому относится способ изучения метаболизма лимфоцитов регионарных лимфатических узлов при имплантации никелида титана (Логинов А.Г., 1998). Для этого были использованы цитохимические показатели ферментативной активности важнейших внутриклеточных метаболических процессов: лактатдегидрогеназы (ЛДГ), катализирующей заключительный этап гликолиза - обратную реакцию восстановления пирувата в лактат и сукцинатдегидрогеназы (СДГ), катализирующей реакцию окисления сукцината в фумарат в цикле Кребса. Показатели изучались на 14 и 30 сутки после имплантации. Способ информативен, однако он касается только одной стороны энергетического метаболизма лимфоцита. Этих двух показателей недостаточно для полной оценки энергетического статуса лимфоцита, являющегося структурно-морфологической единицей иммунной системы; недостаточно, чтобы в полной мере составить прогностический сценарий и достоверно планировать течение постимплантационного периода.

Задача изобретения - предложить достоверный способ прогнозирования эффекта и состоятельности имплантации.

При решении поставленной задачи имеет место положительный лечебный эффект. Способ позволяет прогнозировать течение постимплантационного периода, выявить звено, которое возможно при необходимости корректировать, тем самым добиться долговременного успеха имплантации.

Мецицинская эффективность - повышение качества лечения за счет стабилизации клинико-лабораторных анализов, правильная постановка диагноза и целенаправленное лечение.

Экономический эффект определяется соотношением результата и затрат, если больной будет правильно откорректирован - экономия лекарственных препаратов, сокращение сроков лечения и нетрудоспособности. Предлагаемый способ прогнозирования малозатратен и высокоэффективен, способ его применения легко осуществим, не требует специального оборудования.

Социальный эффект - улучшение качества жизни пациента.

Технический результат достигается за счет того, что оценка энергетического статуса лимфоцитов крови производится на основании изучения цитохимическими методами активности ферментов энергетического метаболизма лимфоцитов крови в динамике: исследуются ферменты аэробного (СДГ) и анаэробного (ЛДГ) гликолиза, ферменты глицерофосфатного “челночного” механизма (-ГФДГ митохондриальная, -ГФДГ цитоплазматическая), исследуются все звенья энергетического метаболизма лимфоцита.

Поставленная задача решается за счет того, что исследуют энергетический статус лимфоцитов крови, определяют активность ЛДГ, СДГ, -ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической на 3, 7, 14 и 30 сутки после имплантации и при повышении активности фермента аэробного гликолиза (СДГ) к 7 сутками, а анаэробного гликолиза (ЛДГ) и активности ферментов глицерофосфатного “челночного” механизма (-ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической) к 30 суткам прогнозируют состоятельность и долгосрочную эффективность имплантации.

Способ осуществляется следующим образом. После проведения эндооссальной имплантации осуществляется забор крови для получения мазков и дальнейшего гистохимического исследования. Взятие крови производят в утренние часы с учетом биологических ритмов изменения лимфоидных органов в течение суток. Ферментативную активность определяют на 3, 7, 14 и 30 сутки. При выявлении повышения активности ферментов аэробного гликолиза (СДГ) к 7 суткам (сравнивают с результатами 3 суток), а анаэробного гликолиза (ЛДГ) и активности ферментов глицерофосфатного "челночного" механизма (-ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической) к 30 суткам прогнозируют состоятельность и долгосрочную эффективность имплантации.

Цитохимические методы исследования лимфоцитов крови дают устойчивые и корректные результаты, позволяющие определить начало развития декомпенсаторных процессов, связанных с каким-либо поломом, до выявления функциональных расстройств на уровне организма. Перестройка ферментного статуса лимфоцитов взаимосвязана с периодами имплантации, что позволяет осуществить долгосрочный прогноз состояния организма пациента после имплантации и прогноз эффективности имплантации. Следует отметить возможность применения цитохимических методов для экспертизы здоровья и качества жизни пациента в условиях дентальной имплантации.

Активность окисилительно-восстановительных ферментов изучалась количественным методом Р.П.Нарциссова (1969) в модификации М.В.Робинсон (1994), основанном на применении n-нитротетразолия фиолетового, образующего в клетке видимые гранулы формазана, подсчет которых и проводился в каждом мазке в 30-50 лимфоцитах.

В методике использовался следующий порядок проведения реакции:

1. Фиксация свежеприготовленных и высушенных на воздухе мазков-отпечатков в ацетон-трилоне в течение 30 секунд при комнатной температуре.

2. Промывка под проточной водой в течение 10 минут и ополаскивание дистиллированной водой.

3. Высушивание.

4. Инкубирование на водяной бане в рабочем растворе при температуре +37С в течение 1 часа.

Для выявления лактатдегидрогеназы использовался раствор следующего состава: в 300 мл фосфатного буфера, рН 7,2-7,4 растворить 78 мг трилона и 78 мг n-нитротетразолия фиолетового. К 40 мл среды добавить 0,2 М раствора лактата натрия (4,5 мл 40% молочной кислоты смешать с 1 н. раствором едкого натрия в отношении 1:1 и небольшим количеством дистиллированной воды, под контролем рН довести до 7,2-7,4; долить дистиллированной водой до 100 мл), НАД - 10 мг, феназинметасульфат - 3 мг.

Для выявления сукцинатдегидрогеназы использовался раствор следующего состава: в 40 мл среды добавить 540 мг сукцината натрия в течение часа.

1. Промывка под проточной водой в течение 5 минут и ополаскивание дистиллированной водой.

2. Докраска ядер 0,5% раствора януса зеленого в течение 10 секунд.

3. Ополаскивание проточной или дистиллированной водой. Высушивание. Хранить до просмотра завернутыми в черную бумагу.

Выявление альфа-глицерофосфатдегидрогеназы (митохондриальной)

1. Зафиксировать свежеприготовленные и высушенные на воздухе мазки в ацетон-трилоне в течение 30 с при комнатной температуре.

2. Промыть водой, высушить.

3. Инкубировать при 37С в течение 1 часа в инкубационном растворе следующего состава. К 40 мл среды добавить 630 мг глицерофосфата натрия.

4. Промыть в воде, высушить, микроскопировать.

Выявление альфа-глицерофосфатдегидрогеназы (цитоплазматической)

1. Фиксация, как в предыдущем случае.

2. Инкубировать при 37С в инкубационном растворе в течение часа. К 40 мл добавить 630 альфа-глицерофосфата натрия, 10 мг НАД.

3. Промыть в воде, высушить, микроскопировать.

Метод основан на подсчете темно-фиолетовых гранул формазана (не позднее 24 ч после проведения реакции). Просмотр мазка должен быть быстрым (гранулы экстрагируются иммерсионным маслом). Ферменты распределяются между отдельными лимфоцитами неравномерно. Наряду с клетками, характеризующимися высокой ферментной активностью, имеются клетки с незначительным количеством ферментов (Соколов В.В., Нарциссов Р.П., Иванова Л.А., 1975). Достоверность результатов оценивают с помощью коэффициента Стьюдента. 



ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ прогнозирования эффективности стоматологической имплантации путем определения цитохимических показателей ферментативной активности метаболических процессов в лимфоцитах (ЛДГ, СДГ), отличающийся тем, что исследуют активность ферментов энергетического метаболизма лимфоцитов крови, определяют активность ЛДГ, СДГ, -ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической на 3, 7, 14 и 30 сутки после имплантации и при повышении активности фермента аэробного гликолиза (СДГ) к 7 суткам, а анаэробного гликолиза (ЛДГ) и активность ферментов глицерофосфатного “челночного механизма” (-ГФДГ митохондриальной и -ГФДГ цитоплазматической) к 30 суткам прогнозируют состоятельность и диагностическую эффективность имплантации.