СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИ РЕЗИСТЕНТНЫХ РЕАКТИВНЫХ ДЕПРЕССИЙ

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИ РЕЗИСТЕНТНЫХ РЕАКТИВНЫХ ДЕПРЕССИЙ


RU (11) 2259566 (13) C1

(51) 7 G01N33/49, G01N33/50 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 30.01.2009 - может прекратить свое действие 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(21) Заявка: 2004128305/15 
(22) Дата подачи заявки: 2004.09.23 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.09.23 
(45) Опубликовано: 2005.08.27 
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: ПОКРОВСКИЙ Д.Г. Терапевтически резистентные депрессии и нарушения обмена фосфолипидов. Автореф. дисс. канд. мед. н., М., 1999.

RU 2021619 С1 15.10.1994.

RU 2210778 С1 20.08.2003. 

SU 1504593 А1 30. 08.1989.
БОНДАРЬ В.В. Терапевтически резистентные эндогенные депрессии: (Клиника, типология, вопросы патогенеза и лечение). Автореф.дисс. канд. мед.н., М., 1992.

ПАВЛОВА О.А. Функциональное состояние системы обратного захвата серотонина тромбоцитами больных эндогенной депрессией, резистентной к антидепрессивной психофармакотерапии. Автореф. дисс. канд. биол. н., М., 1996.

MAES M. Lower serum dipeptidyl peptidase IV activity in treatment resistant major depression: relationships with immune-inflammatory markers. Psychoneuroendocrinology. 1997, 22(2), p. 65-78, abstr.

(72) Автор(ы): Покровский Д.Г. (RU); Зиньковский А.К. (RU); Михайленко А.А. (RU); Каргаполов А.В. (RU) 
(73) Патентообладатель(и): Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации" (ГОУ ВПО Тверская ГМА Минздрава России) (RU) 
Адрес для переписки: 170642, г.Тверь, ул. Советская, 4, ГОУ ВПО ТГМА МЗ РФ, патентный отдел 

(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИ РЕЗИСТЕНТНЫХ РЕАКТИВНЫХ ДЕПРЕССИЙ

Изобретение относится к области медицины, а именно к психиатрии и неврологии. Для осуществления способа проводят оценку состояния больного по шкале Гамильтона, исследуют лейкоцитарную формулу общего клинического анализа крови с целью определения количества моноцитов и лимфоцитов и определяют показатели инфракрасной спектроскопии цельной крови в инфракрасном спектроанализаторе "Икар" 9/1 в диапазонах 3085-2832 см-1 и 1543-1425 см -1 в течение 30 сек. При среднем значении выраженности депрессии 19,0±2,1 балла, значении средних показателей поглощения 40,5±3,2% и 43,4±2,9% в диапазонах 3085-2832 см -1 и 1543-1425 см-1 соответственно, в сочетании с показателями иммунитета в виде моноцитоза >5% и лимфоцитоза >25% в лейкоцитарной формуле общего анализа крови диагностируют терапевтически резистентную реактивную депрессию. Способ обеспечивает высокую точность определения, позволяет выявить лиц, имеющих иммунологические и патобиохимические признаки нарушений деятельности нервной системы, которые будут проявляться в дальнейшем или уже проявляются на момент обследования терапевтически резистентной депрессивной симптоматикой в рамках реактивных депрессий. 1 табл. 




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к области медицины, а именно к психиатрии и неврологии. Депрессия - одно из наиболее распространенных расстройств в психиатрической и в соматической практике. Более трети больных депрессиями обнаруживают резистентность к тимоаналептической терапии, чем обусловлена необходимость выявления способов своевременной и точной предикции рефрактерности к терапии.

Способ позволяет повысить точность диагностики резистентности при реактивной депрессии путем определения биохимических и иммунологических маркеров, являющихся предикторами рефрактерности к антидепрессантной терапии. В ходе тестирования выявляются лица, имеющие патобиохимические и иммунологические признаки нарушений деятельности нервной системы, которые в дальнейшем будут проявляться или уже проявляются на момент обследования депрессивной симптоматикой, резистентной к современным антидепрессантным психофармакологическим средствам. Способ обеспечивает высокую точность определения лиц с указанной симптоматикой для уточнения динамики состояния в клинике.

В качестве прототипа предлагаемого изобретения заявители предлагают клинический способ диагностики терапевтически резистентной депрессии по шкале Гамильтона [Автореферат на соискание уч. ст. к.м.н. Покровский Д.Г. - Терапевтически резистентные депрессии и нарушения обмена фосфолипидов (клинико-патобиохимический аспект). - Тверь, 1999. - 25 с.].

Определяют выраженность депрессии, по шкале Гамильтона подсчитывают сумму баллов. Депрессия считают резистентной, если в течение двух последовательных курсов адекватной монотерапии фармакологически различными (по химической структуре и биохимическому действию) антидепрессантами через 6-8 недель отмечают отсутствие или недостаточность клинического эффекта. В этот период снова проводят оценку депрессивного состояния по шкале Гамильтона, и при снижении количества баллов менее 50% от исходного уровня квалифицируют депрессию как терапевтически резистентную. Адекватная терапия реактивной депрессии включает назначение транквилизатора и антидепрессанта в соответствии с клиническими показаниями и особенностями спектра его психотропной, нейротропной и соматотропной активности, применение соответствующего диапазона доз с их наращиванием при неэффективности терапии за две недели до максимальных или с парентеральным введением и соблюдением сроков длительности курса не менее 3-4 недель. Данный клинический способ диагностики стандартизирует группу резистентных к тимоаналептической терапии депрессивных больных, а также предлагает практическому врачу последовательность действий и обеспечивает преемственность в лечении больного.

Недостатки прототипа, на взгляд авторов, следующие:

1. Способ субъективен, во многом зависит от уровня подготовки специалиста.

2. Не позволяет диагностировать интимные нейробиохимические механизмы резистентности реактивной депрессии к терапии.

3. Предполагает необходимость длительных временных затрат.

В отличие от рассмотренного выше способа-прототипа, предлагаемый новый способ выявляет среднестатистические результаты для когорты терапевтически резистентных больных реактивными депрессиями. Определяют выраженность депрессивной симптоматики по шкале Гамильтона (21 вопрос), которая для реактивных терапевтически резистентных депрессий (ТРД) составляет в среднем 19,0±2,1 балла. Подсчитывают лейкоцитарную формулу общего анализа крови, диагностически значимы данные моноцитоза > 5% и лимфоцитоза > 25%. Определяют показатели поглощения (в %) инфракрасного спектра цельной крови в диапазоне 3085-2832 см-1 - 40,5±3,2% и в диапазоне 1543-1425 см-1 - 43,4±2,9%, при норме в диапазоне 3085-2832 см-1 - 25,6±0,6%, в диапазоне 1543-1425 см-1 - 29,1±1,1% (табл. 1).

Способ осуществляют следующим образом. Клиническую оценку состояния производят в соответствии с критериями МКБ-10 для затяжной реактивной депрессии и дистимии. Определяют выраженность депрессивной симптоматики по шкале Гамильтона (21 вопрос), которая составляет в среднем 19,0±2,1 балла.

В современных исследованиях показано, что иммунная система посредством органоспецифических иммунных реакций гуморального и клеточного типа принимает непосредственное участие в регуляции деятельности нервной систем. В частности, выявлены особенности взаимосвязей иммунологических и клинических параметров при депрессивных расстройствах. При этом отмечено, что с увеличением давности психического заболевания возрастает роль иммунной системы в патогенезе депрессии, в связи с чем повышается риск иммунодефицитных состояний.

С целью выявления иммунологических маркеров резистентности депрессии к терапии подсчитывают лейкоцитарную формулу общего клинического анализа крови. Материалом для общего клинического анализа крови является цельная капиллярная кровь. 

Приготовленный мазок фиксируют метиловым спиртом 5 мин, после чего окрашивают по Романовскому - Гимзе. Краска стандартная, имеет в своем составе азур II, водорастворимый желтый эозин, метиловый спирт и глицерин. Рабочий раствор краски готовят путем разведения 3 капель готовой краски 1,0 мл дистиллированной воды. Продолжительность окраски 40 минут. Окрашенные мазки изучают под микроскопом с иммерсионной системой (окуляр 10, объектив 90). Для подсчета лейкоцитарной формулы пользуются 11-клавишным счетчиком, фиксирующим количества каждого вида лейкоцитов в процентах. 

Выявленные у когорты терапевтически резистентных больных реактивными депрессиями среднестатистические показатели моноцитоза > 5% свидетельствуют о напряженности фагоцитарного звена иммунитета, лимфоцитоз > 25% показывает дефект клеточного звена иммунной системы, что подтверждает неоднородность и многоуровневость нейробиохимических механизмов формирования резистентности депрессии к тимоаналептической терапии.

Определение резистентности при депрессии авторы осуществляют путем исследования крови методом инфракрасной спектроскопии (ИКС) на аппаратно-программном комплексе «Икар» 9/1 (патент №2137126 от 10.09.1999 г., сертификационный №5745). Материал для ИКС - цельная капиллярная кровь объемом 0,1 мл, дозированной пипеткой помещают в оригинальную кювету и подвергают спектрофотометрированию на АПК «Икар» 9/1, по 9 оптическим каналам с длиной волн от 3500 до 930 см-1 в течение 30 с. Исследование проводилось по всем 9 каналам, однако, наиболее значимыми оказались показатели в диапазонах каналов 3085-2832 см-1 и 1543-1425 см -1. Прибор фиксирует процент пропускания оптической среды, являющейся величиной, обратно пропорциональной экстинкции раствора. Выходной информацией является показатель поглощения (в %) инфракрасного спектра излучения в любом из заданных интервалов спектра в течение 30 с. Данные, полученные при исследовании крови в инфракрасном спектроанализаторе «Икар» 9/1, обработывают по стандартной методике и выявляют среднестатистические результаты для когорты терапевтически резистентных больных реактивными депрессиями. В диапазонах ИКС 3085-2832 см-1 и 1543-1425 см -1 определяют показатели поглощения и рассчитывают средние показатели поглощения. Нормальные значения средних показателей поглощения в диапазоне ИКС 3085-2832 см-1 - 25,6±0,6, в диапазоне 1543 -1425 см-1 - 29,1±1,1. При терапевтически резистентной депрессии средние показатели поглощения в диапазоне ИКС 3085-2832 см-1 - 40,5±3,2%, в диапазоне 1543 -1425 см-1 - 43,4±2,9%.

Таблица 1.

Изменения показателей инфракрасного спектра крови (в %, М±m) и показателей иммунитета у больных реактивными терапевтически резистентными депрессиями. 
Границы диапазонов спектральной области, см-1 Показатель поглощения в % у.е. в норме Терапевтически резистентная реактивная депрессия Компоненты, определяемые ИКС в крови Показатели иммунитета при терапевтически резистентной реактивной депрессии 
3085-2832 25,6±0,6 40,5±3,2** фосфолипиды, эфиры холестерина, триглицериды Содержание лимфоцитов более 25% * Содержание моноцитов более 5% * 
1543-1425 29,1±1,1 43,4±2,9** метиленовые и метиловые группы, содержащиеся во всех компонентах мембран 
Примечание: *-различия с нормой значимы, р <0,05; ** -различия с нормой значимы, р <0,001 


Диагностика реактивных терапевтически резистентных депрессий с использованием ИКС крови больных основана на обнаружении высоких показателей поглощения инфракрасного излучения на каналах, где тестируются химические связи, характерные для фосфолипидов и практически всех компонентов биологических мембран (3085-2832 см-1 и 1543-1425 см-1) [Кеслер И. Методы инфракрасной спектроскопии в химическом анализе. - М.: Мир. - 1964. - 257 с.]. Значительное повышение показателей поглощения ИК излучения крови больных в указанных диапазонах указывает на повышение концентрации сфингомиелинов, фосфатидилсеринов и других фосфолипидных фракций в крови. Обнаруженное при ИКС повышение концентрации сфингомиелина и других фракций фосфолипидов в крови у больных реактивными резистентными депрессиями связано с выраженным повреждением клеточных мембран. Тот факт, что при психических заболеваниях изменяется содержание фосфолипидов крови, доказано в ряде исследований [Морковкин В.М., Картелишев А.В. Патохимия шизофрении. - М.: Медицина - 1988. - 255 с.]. Известно, что фосфолипиды являются основным структурно-функциональным компонентом биологических мембран, принимают непосредственное участие в процессах трансмембранного переноса всех метаболитов, участвуют в процессах возбудимости клетки, энергетическом их обмене, биосинтезе белка, а также выполняют роль вторичных мессенджеров. Кроме того, они выступают в качестве антиокислителей, предотвращающих превышающую норму степень свободного окисления биологически активных веществ, а также протектирующих патологическое воздействие перекисей на жизненно важные структуры организма. Важность этих моментов особенно очевидна, так как доказана интенсификация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) при различных по генезу психических заболеваниях. При этом установлено, что хронический эмоциональный стресс, лежащий в основе депрессивного страдания, приводит к состоянию метаболической внутриклеточной гипоксии вследствие преобладания процессов гликолиза над окислительным фосфорилированием, то есть анаэробизма над тканевым дыханием. В этих условиях нарушается утилизация глюкозы (гликогена), что в свою очередь приводит к блокированию образования из аминоспирта сфингозида - церамида. При этом за счет активации специфических трансфераз образуется повышенное количество СМ (часть которого расходуется на увеличение синтеза ФЭ и ФС), что служит гиперлипогенетическим источником энергетического депо в условиях интрацеллюлярной гипоксии. Также следует принять во внимание взаимопревращения фосфатидилэтаноламина и фосфатидилсерина путем реакций декарбоксилирования последнего. Эта реакция протекает преимущественно в митохондриальных мембранах, что подтверждает данные об исключительно важном значении аминосодержащих фосфолипидов в процессах окислительного фосфорилирования [Рэкер Э. Биоэнергетические механизмы: новые взгляды // Под ред. Скулачева В.П. - М., 1979. - 217 с.]. Таким образом, обнаруживаемое с помощью инфракрасной спектроскопии изменение оптической плотности крови больных с терапевтически резистентными реактивными депрессиями в оптических интервалах, характерных для фосфолипидов и других компонентов биологических мембран, связано с характерными для депрессивных состояний гипоксическими процессами и как следствие выраженными изменениями биомембран. Вследствие вышесказанного выявленное значительное повышение показателей поглощения инфракрасного излучения кровью больных в указанных диапазонах, показывающее на характерное для резистентной депрессии повышение концентрации СФМ, ФЭА и ФС в крови, может быть использовано для диагностики реактивных терапевтически резистентных депрессий.

Обследовано 75 больных с реактивными депрессиями, 40 женщин и 35 мужчин от 22 до 50 лет, средний возраст 35±3,6 года. По результатам тимоаналептической терапии пациенты разделились на респондеров (36 пациентов), обнаруживших положительную динамику, и нонреспондеров (39 пациентов), у которых значимых позитивных сдвигов в процессе терапии не отмечено. Клинические исследования соответствовали критериям МКБ-10, дополнены шкалой депрессии М. Гамильтона (21 вопрос). Контроль составила группа из 50 практически здоровых лиц, сопоставимая по полу и возрасту. Параклинические исследования включали подсчет лейкоцитарной формулы клинического анализа крови в сочетании со средними показателями поглощения (в %) инфракрасного спектра цельной крови в диапазоне 3085-2832 см-1 и в диапазоне 1543-1425 см-1 .

Преимущества данного способа диагностики терапевтически резистентной реактивной депрессии:

1. Предлагаемый способ позволяет оценивать динамику сопряженных видов обмена веществ на органном, тканевом, клеточном и субклеточном уровнях.

2. При использовании в клинике позволит обнаружить патобиохимические и иммунологические маркеры терапевтической резистентности при реактивной депрессии.

3. Применение заявленного метода позволит контролировать на биохимическом и иммунологическом уровнях состояние пациента, объективизируя клиническую оценку состояния при мониторинге эффективности лечения.

4. Способ диагностики прост в применении, пригоден для использования в клинических условиях.

КЛИНИЧЕСКИЙ ПРИМЕР. Больная Н., 43 года. История болезни №615. Диагноз: Дистимия. Заболевание связывается с длительной объективно неразрешимой психотравмирующей ситуацией. Клинически обнаруживает признаки депрессивного эпизода средней степени. Выраженность депрессии по шкале М. Гамильтона составляет 21,5 балла. Проведен клинический анализ крови, выявлен лимфоцитоз - 27% и моноцитоз - 6%. Проба крови исследовалась ИКС в диапазоне 3085-2832 см-1, показатель поглощения - 42,8%, в диапазоне 1543-1425 см-1 показатель поглощения - 45,7%. На основании полученных данных выявлена терапевтически резистентная реактивная депрессия.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ диагностики терапевтически резистентных реактивных депрессий, включающий оценку состояния больного по шкале Гамильтона, отличающийся тем, что выявляют наличие моноцитоза и лимфоцитоза, в течение 30 с определяют показатели поглощения инфракрасной спектроскопии крови в инфракрасном спектроанализаторе в диапазонах 3085-2832 см-1 и 1543-1425 см-1, рассчитывают средние показатели поглощения, и при среднем значении выраженности депрессии 19,0±2,1 балла, значении средних показателей поглощения 40,5±3,2% и 43,4±2,9% в диапазонах 3085-2832 см -1 и 1543-1425 см-1 соответственно, в сочетании с показателями иммунитета в виде моноцитоза >5% и лимфоцитоза >25% в лейкоцитарной формуле общего анализа крови диагностируют терапевтически резистентную реактивную депрессию.