СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ОБОСТРЕНИЯ ШИЗОФРЕНИИ

СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ОБОСТРЕНИЯ ШИЗОФРЕНИИ


RU (11) 2120637 (13) C1

(51) 6 G01N33/68 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 30.01.2009 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(21) Заявка: 95120294/14 
(22) Дата подачи заявки: 1995.11.29 
(45) Опубликовано: 1998.10.20 
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: SU 923524 A, 30.04.82. SU 586904, 05.01.78. Вилков Г.А., Силецкий О.Я., Межова Л.И. Некоторые компоненты кининовой системы и имунные комплексы при шизофрении. - Жур.невропат. и псих. 1979, N 5, с.582-584. 
(71) Заявитель(и): Вилков Геннадий Алексеевич; Коваленко Виктор Маркович; Дубатова Ирина Владимировна; Межова Людмила Ивановна 
(72) Автор(ы): Вилков Геннадий Алексеевич; Коваленко Виктор Маркович; Дубатова Ирина Владимировна; Межова Людмила Ивановна 
(73) Патентообладатель(и): Вилков Геннадий Алексеевич; Коваленко Виктор Маркович; Дубатова Ирина Владимировна; Межова Людмила Ивановна 

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ОБОСТРЕНИЯ ШИЗОФРЕНИИ 

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть применено для прогнозирования обострений шизофрении и проведения профилактического лечения на доклиническом этапе. Способ осуществляется путем исследования сыворотки крови, в которой определяют активность калликреина, содержание прекалликреина и уровень циркулирующих иммунных комплексов, и при повышении активности калликреина более 30,0 мед/мл (норма 0 - 20,0 мед/мл), снижении содержания прекалликреина менее 290,0 мед/мл (норма 34020 мед/мл) и увеличении уровня циркулирующих иммунных комплексов более 90 усл. ед. (норма 50 усл. ед.) прогнозируют возможное обострение патологического процесса. Способ прост в осуществлении и дает возможность прогнозировать обострение в период доклинической ремиссии. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к медицине, а именно в психиатрии, может быть применено для прогнозирования обострения шизофрении и проведения профилактического лечения на доклиническом этапе.

Шизофрения является одной из важнейших проблем современной психиатрии. Это объясняется как широкой распространенностью заболевания, около 1% населения всего земного шара (M.M.Mesulam. Schizophrenia and brain.//N.Engl. j Med.1990, Vol., 322, N 12, P. 842-845), так и тем, что манифестные формы шизофрении поражают преимущественно лиц молодого и зрелого возраста, патологический процесс длится в течение всей жизни. До 0,5% всего населения лечится от шизофрении ежегодно. Больные шизофрении занимают приблизительно 50% всех коек, предназначенных для психически больных, вероятность повторной госпитализации за двухлетний период после выписки составляет от 40 до 60% (Г.И. Каплан, Б.Дж. Сэдок. Клиническая психиатрия. М.: Медицина, 1994, т.1, с.237. )

В связи с высокой вероятностью обострений шизофрении возрастает роль профилактических мероприятий, направленных на раннюю диагностику обострений патологического процесса для проведения превентивной терапии.

Проведенные исследования по научно-медицинской и патентной литературе выявили ряд работ, в которых показана зависимость уровня циркулирующих иммунных комплексов от психического состояния больных шизофренией. Так, при обострении патологического процесса значения циркулирующих иммунных комплексов выше, чем при отсутствии психоза, а определения циркулирующих иммунных комплексов в динамике заболевания обнаружило снижение этого показателя при улучшении психического состояния больных (Г.А.Вилков, О.Я.Силецкий, Л.И. Межова. Некоторые компоненты кининовой системы и иммунные комплексы при шизофрении.//Журн. невропат. и псих.1979, N5, с.582-584. Т.П.Ветлугина, Г.В. Логвинович, С.В.Масленникова, О.А.Васильева. Циркулирующие иммунные комплексы в сыворотке крови психически больных и здоровых.//Журн. невропат. и псих.1983, N3, с.422-426. Т.П.Ветлугина, Г.В.Логвинович. Некоторые показатели гуморального иммунитета и клинико-иммунологические корреляции при шизофрении. //Новое в терапии психических заболеваний.-М., 1988, с.55-57.) Описаны изменения калликреин-кининовой системы при обострении нервно-психических заболеваний. Установлено, что наибольшие изменения показатели активности калликреина и содержания прекалликреина наблюдаются у больных шизофренией и рассеянным склерозом при обострении патологического процесса, при ремиссии отмечается тенденция к нормализации этих показателей (Г.А.Вилков, О.Я.Силецкий, Л. И. Межова. Некоторые компоненты кининовой системы и иммунные комплексы при шизофрении./Журн. невропат. и псих. 1979, N5, с. 582-584, Г.А. Вилков, В. В.Мартиросян, Р.А.Трапезонцева и др. Кининовая и плазменная системы сыворотки крови и спинномозговой жидкости больных рассеянным склерозом и шизофрении./Журн. невропат. и псих. 1989, т.89, N7, с. 23-27.) В авторском свидетельстве N586904, опубликованном 06.01.78. Г.А.Вилковым и соавт. описан способ диагностики фаз рассеянного склероза путем определения активности калликреина в сыворотке крови. Повышение активности калликреина в сыворотке крови свидетельствовало об обострении рассеянного склероза, в состоянии ремиссии цифры активности калликреина приближались к норме.

В качестве прототипа взят способ диагностики нервно-психических заболеваний N923524 Г. А. Вилкова и соавт., опубликованного 30.04.82 г. С целью выявления обострения заболевания, в сыворотке крови определяли активность калликреина и нейроцитотоксины и при наличии в сыворотке цитотоксинов и повышении активности калликреина до 36,4 - 85,4 мкЕ диагностировали обострение нервно-психического заболевания. Этот способ использует два показателя, что увеличивает точность диагностики. Недостатком этого способа является его сложность. Для определения нейроцитотоксинов сыворотку больного вводят в хвостовую вену крысы из расчета 1 мл/100 г веса. Забой животных осуществляют через 24 часа. Выделяют надпочечники и с помощью окуляр-микрометра проводят морфометрические измерения клубочковой зоны коры надпочечников. Это затрудняет использование этого способа для динамического исследования, кроме того, этот способ позволяет диагностировать обострение при наличии клинической картины психоза.

Целью изобретения является упрощение способа и прогнозирование обострения шизофрении в период клинической ремиссии.

Эта цель достигается путем динамического определения в сыворотке крови пациента показателей активности калликреина, содержания прекалликреина и уровня циркулирующих иммунных комплексов. При повышении активности калликреина, снижении содержания прекалликреина и увеличении уровня циркулирующих иммунных комплексов прогнозируют возникновение обострения психоза.

У практически здоровых людей активность калликреина в сыворотке крови составляет 0-20,0 мед/мл, содержание прекалликреина 34020 мед/мл, уровень циркулирующих иммунных комплексов 50 усл.ед.

Способ осуществляется следующим образом.

У пациента натощак из локтевой вены берут 5-6 мл крови, получают сыворотку. В сыворотке крови определяют количество прекалликреина и активность калликреина методом Т. С.Пасхиной и А.В.Кринской (Т.С.Пасхина, А.В.Кринская. Упрощенный метод определения калликреиногена и калликреина в сыворотке (плазме) крови человека в норме и при некоторых патологических состояниях. //Вопр. мед. химии. 1974, т.20, N6, с.660-663.) Для этого 0,25 мл сыворотки крови разводят в 3 раза фосфатным буфером pH 7,0 и добавляют к 2,5-3,0 мл густой суспензии диэтиламиноэтил-сефадекс A-50, уравновешенного тем же буфером. Смесь осторожно перемешивают, добавляют через 10 минут еще 3,0 мл 0,02 M калий-натрий фосфатного буфера pH 7,0. Снова перемешивают и через 2 минуты переносят на фильтр. Фильтрат собирают в мерную пробирку на 5 мл, объем доводят до метки 0,02 M фосфатным буфером.

Определение активности калликреина. К 1 мл фильтрата добавляют 1 мл 0,05 M трис-HCl буфера pH 8,0 и 1 мл 1,51010-3 M раствора бензоиларгининэтиловогоэфира в этом буфере. В контрольную пробу берут 2,0 трис-HCl буфера pH 8,0 и 1 мл субстрата. Прирост оптической плотности измеряют в кюветах (1см) спектрофотометра СФ-26 при 253 нм в течение 15 минут.

Определение содержания прекалликреина. К 1 мл неадсорбированной фракции добавляют 0,8 мл 0,05 M трис-HCl буфера pH 8,0 и 0,1 мл 0,1% раствора трипсина в 0,002 M HCl. Пробу перемешивают и через 2 минуты добавляют 0,1 мл 2% раствора овомукоида в 0,5 M трис-HCl буфере pH 8,0 для инактивации трипсина. Через 15 минут к пробе добавляют 1 мл 1,51010-3 бензоиларгининэтиловый эфир. Эстеролитическую активность пробы измеряют по приросту оптической плотности при 253 нм в течение 15 минут.

Уровень циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови определяют методом Haskova V., Kaslik J., Malt I., Matejckova M. Novy spusob stanoveni cirkulujicich imunokomplexu v lidskych serech.//Cas. Lek. ces. 116., 1977, 14, P.436-437. Для этого 0,3 мл полиэтиленгликоля, приготовленного на боратном буфере pH 7,2-7,4 смешивают в пробирке с 0,3 мл сыворотки крови, разведенной в 3 раза. Реакционную смесь оставляют на 1 час для инкубации при 20oC. После этого определяют оптическую плотность смеси на СФ-16 при 450 нм в кюветах 1 см. Контролем служит проба, состоящая из 0,3 мл разведенной в 3 раза сыворотки и 3 мл боратного буфера pH 7,2-7,4. Результаты выражают в условных единицах экстинции на 1 мл сыворотки после умножения на 1000.

Повышение активности калликреина более 30,0 мед/мл, снижение содержания прекалликреина менее 290 мед/мл, увеличение уровня циркулирующих иммунных комплексов более 90 усл.ед. свидетельствует о возможном обострении патологического процесса.

Исследования проводятся 1 раз в 1,5-2,0 месяца, а при сезонной зависимости обострений 1 раз в 3-4 недели. Примеры: Больной П., 28 лет, диагноз периодическая шизофрения, состояние ремиссии после манифестного психоза. При выписке из стационара активность калликреина составляла 18,2 мед/мл, содержание прекалликреина 332,8 мед/мл, уровень циркулирующих иммунных комплексов 62 усл.ед. Пациенту проводилось динамическое исследование описанных показателей с кратностью 1 раза в 2 месяца. Спустя 8 месяцев после перенесенного психоза при очередном исследовании сыворотки крови обнаружено повышение активности калликреина до 42,4 мед/мл, снижение содержания прекалликреина до 258,6 мед/мл, повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов до 125 усл. ед. , при этом клинические признаки обострения патологического процесса отсутствовали. Через 2 недели остро развилось психотическое состояние, потребовавшее стационирования больного и проведения полного набора лечебных мероприятий.

Больной Н., 27 лет, диагноз периодическая шизофрения, состояние ремиссии после повторного психоза. При выписке из стационара активность калликреина 20,0 мед/мл, содержание прекалликреина 310,4 мед/мл, уровень циркулирующих иммунных комплексов 64 усл.ед. Проводилось динамическое исследование показателей с частотой 1 раза в 2 месяца. Через год после психоза на фоне клинической ремиссии при очередном исследовании обнаружено повышение активности калликреина до 49,2 мед/мл, снижение содержания прекалликреина до 240,8 мед/мл, повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов до 130 усл.ед. Был сделан вывод о возможном обострении патологического процесса. Пациенту в амбулаторных условиях проведен комплекс профилактических мероприятий. Спустя 3 недели активность калликреина 16,7 мед/мл, содержание прекалликреина 330 мед/мл, уровень циркулирующих иммунных комплексов 55 усл.ед. В течение последующего года сохранялось состояние ремиссии.

Таким образом, по сравнению с прототипом, заявленный способ значительно проще, т.к. не требует проведения сложных манипуляций с животными, позволяет прогнозировать возможное обострение патологического процесса для появления клинических признаков психоза при динамическом исследовании сыворотки крови и проводить профилактическое лечение, тем самым предупреждая развитие очередного психоза. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ прогнозирования обострения шизофрении, включающий определение уровня калликреина в сыворотке крови больных, находящихся в состоянии клинической ремиссии, отличающийся тем, что исследование проводят в динамике (1 раз в 1,5-2,0 месяца), дополнительно в сыворотке определяют уровень прекалликреина, циркулирующих иммунных комплексов и при увеличении активности калликреина более 30,0 мед/мл (норма 0-20,0 мед/мл), снижении содержания прекалликреина менее 290 мед/мл (норма 34020 мед/мл), повышении уровня циркулирующих иммунных комплексов более 90 усл.ед. (норма 50 усл.ед.) прогнозируют возможное обострение патологического процесса.