СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА, ПЕРЕНЕСШИХ ПЕРИНАТАЛЬНУЮ ГИПОКСИЮ

СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА, ПЕРЕНЕСШИХ ПЕРИНАТАЛЬНУЮ ГИПОКСИЮ


RU (11) 2144673 (13) C1

(51) 7 G01N33/52, G01N33/48, G01N33/483 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 09.07.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 2000.01.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 98106187/14 
(22) Дата подачи заявки: 1998.04.02 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 1998.04.02 
(45) Опубликовано: 2000.01.20 
(56) Аналоги изобретения: 1. Подымова С.Д. Болезни печени. - М., 1995, с.533. 2. SU 1553897 A1, 30.03.90. 3. SU 1195249 Ф, 30.11.85. 
(71) Имя заявителя: Ивановская государственная медицинская академия 
(72) Имя изобретателя: Шниткова Е.В.; Философова М.С.; Философова М.С. 
(73) Имя патентообладателя: Ивановская государственная медицинская академия; Шниткова Елена Васильевна 
(98) Адрес для переписки: 153462, Иваново, пр-т Ф.Энгельса, 8, Ивановская государственная медицинская академия, патентная группа 

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА, ПЕРЕНЕСШИХ ПЕРИНАТАЛЬНУЮ ГИПОКСИЮ 

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования гепатоцеллюлярной недостаточности у детей, перенесших перинатальную гипоксию в раннем детском возрасте. Способ обеспечивает раннее по отношению к возрасту ребенка и более точное прогнозирование гепатоцеллюлярной недостаточности у детей, перенесших перинатальную гипоксию, на протяжении первых трех лет жизни, когда не выявляются клинические признаки повреждения печени. Определяют в крови содержание альбумина глютатиона, SH-группы эритроцитов, активность лактатдегидрогеназы и малоновый диальдегид. При снижении показателей альбуминов крови ниже 55%, SН-групп эритроцитов ниже 2,4 ед., глютатиона крови ниже 22 мг%, при повышении лактатдегидрогеназы в эритроцитах выше 4,9103 ед. Вроблевского и малонового диальдегида в крови выше 25 нм/мл прогнозируют возможность развития гепатоцеллюлярной недостаточности, когда отсутствуют клинические проявления поражения печени. 1 табл. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и может быть использовано для прогнозирования гепатоцеллюлярной недостаточности у детей, перенесших перинатальную гипоксию в раннем детском возрасте.

Известны способы диагностики гепатоцеллюлярной недостаточности у детей с патологией печени, других заболеваний пищеварительного тракта. Гепатоцеллюлярная недостаточность характеризуется изменениями функциональных проб печени, оценивающих поглотительно-экскреторную, метаболизирующую и синтетическую недостаточность функции печени. Его характеризуют уменьшение содержания в сыворотке крови общего белка и, особенно, альбуминов, П, У и ПУ факторов свертывания крови, протромбина, холестерина, повышение активности холинэстеразы, снижение клиренса антипирина, задержка выделения бромсулфалеина, вофавердина, гипербилирубинемия с прямой реакцией, повышение содержания аммиака, фенолов, аминокислот.

За прототип нами выбран способ диагностики гепатоцеллюлярной недостаточности (Подымова С.Д. Монография. Болезни печени. -1995. -с. 533), который отличается от нашего тем, что он диагностируется у детей с заболеваниями печени и другой патологией пищеварительного тракта при выраженной картине заболевания. Мы предлагаем способ диагностики гепатоцеллюлярной недостаточности в более ранние сроки, когда отсутствуют клинические признаки поражения печени. Предлагаемый способ выявляет гепатоцеллюлярную недостаточность у детей, перенесших перинатальную гипоксию, и в максимально ранние сроки (с периода новорожденности до 3 лет жизни). При этом используется малое количество показателей. Существенное отличие предлагаемого способа заключается в том, что для каждой четверти года жизни детей даны критические количественные значения показателей, используемых для прогноза.

В литературе не выявлена информация о новых объективных способах оценки гепатоцеллюлярной недостаточности у детей с перинатальной гипоксией, т.е. о базовом объекте.

Целью заявляемого технического решения является раннее по отношению к возрасту ребенка и более точное прогнозирование гепатоцеллюлярной недостаточности у детей, перенесших перинатальную гипоксию на протяжении первых трех лет жизни, когда не выявляются клинические признаки повреждения печени.

Нами обследовано 166 детей (614 наблюдений), перенесших острую, хроническую и сочетанную гипоксии. Нами установлено, что наибольшую информативность и коррелятивные взаимосвязи с физинаибольшую информативность и коррелятивные взаимосвязи с физическим, нервно-психическим развитием, исходом перинатальной энцефалопатии, состоянием функции печени имеют показатели уровня альбуминов, SH-групп, лактатдегидрогеназы, малоного диальдегида и глютатиона, в связи с чем они используются в качестве информативных критериев оценки гепатоцеллюлярной недостаточности при отсутствии клинических проявлений патологии печени.

Информативными критериями являются содержание альбуминов крови ниже 55%, SH-групп эритроцитов ниже 2,4 ед., лактатдегидрогеназы крови выше 4,9103 ед. Вроблевского, малонового диальдегида в крови выше 25 нм/мл, глютатиона крови ниже 22 мг%, при одновременном отклонении которых прогнозируют возможность гепатоцеллюлярной недостаточности у детей.

Способ осуществляется следующим образом.

Определяют содержание альбумина крови унифицированным методом (Меньшиков В. В. Руководство по клинической лабораторной диагностике.- М., Медицина.-1982.-163 с.).

Содержание SH-групп изучалось цитохимическим методом, который основан на восстановлении свежего раствора ферроцианидина в кислой среде сульфгидрильными группами, содержащимися в эритроцитах, образуется ферроцианид, который соединяется с ионами трехвалентного железа с образованием нерастворимого осадка берлинской лазури. Свежеприготовленные и высушенные мазки крови фиксировались в течение часа в 10%-м растворе нейтрального формалина, промывались проточной водой не менее 40 минут с последующей их окраской. Содержание SH-групп оценивалось полуколичественным методом с разделением 200 эритроцитов на 4 группы (+++, ++, +, 0) в зависимости от интенсивности окраски цитоплазмы. Гистохимические показатели содержания SH-групп эритроцитов рассчитываются по формуле (G. Astаldi; L. Verge, 1957).

(3a+2в+1c):200,

где а - процент клеток с высоким содержанием SH-групп (+++),

в - процент клеток с умеренным содержанием SH-групп (++),

с - процент клеток с низким содержанием SH-групп (+).

(Философова М. С. Методы исследования и возрастно-половые нормы показателей функций эритропоэза у детей и подростков. Методические рекомендации. -Иваново. -1977. -372 с.).

Активность лактатдегидрогеназы исследовали спектрофотометрическим методом Wroblewski La Due. За единицу активности фермента принимали изменение оптической плотности в 1 мл уплотненных эритроцитов на 0,001 за 1 мин при 340 ммк (Wroblewski F., La Due J.S. Lactic Dehydrogenase Activity iv Blood. - Proc. Soc. Exp. Biol. Med.-1955.- v.90, N 1, p.210-213).

Определение малонового диальдегида проводилось методом спектрофотометрии при длине волны 352 нм, расчет велся по формуле МДА=Эх0,85. Метод осуществлялся путем добавления к крови фосфатновольфрамовой кислоты, после центрифугирования добавляли воду, выдерживали на водяной бане, охлаждали, центрифугировали, опять охлаждали и исследовали на спектрофотометре (метод Omhava Н., Chishi N., Jagik. Analit. Biochem.-1979.-v.95, p.351-358).

Глютатион определялся методом Балаховского С. Д. и Балаховского И.С. (1953). Проводится осаждение белков трихлоруксусной кислотой, затем осаждение и изолирование глютатиона сульфатом кадмия. Глютатион реагирует с молекулярным бромом, избыток молекулярного брома вытесняет иод из иодистого калия, после чего иод титруется гипосульфитом и проводится расчет по формуле (Балаховский С. Д., Балаховский И.С. Методы химического анализа крови. -М., Медгиз, 1953. -746 с.).

Сравниваем количество альбуминов, малонового диальдегида, глютатиона, лактатдегидрогеназы, полученные при обследовании детей, с критическими значениями этих показателей, данные приведены в таблице. При выявлении уровня данных показателей ниже или выше критических имеется объективная возможность гепатоцеллюлярной недостаточности, что требует лечебно-профилактических мероприятий, направленных на нормализацию функции печени.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Ребенок К., 2 года, от 1 беременности, первых родов. В течение беременности перенесла острое респираторное заболевание в 30 и 33 недели. Роды запоздалые, длительный безводный период. Ds: Малая дисфункция мозга, задержка психомоторного развития. При осмотре общее состояние удовлетворительное. Аппетит хороший. Ребенок активный. Правильного телосложения, умеренного питания. Физическое развитие: дефицит массы, микросоматический соматотип. Кожные покровы чистые, бледные. Слизистые чистые. Лимфатические узлы пальпируются по основным группам, безболезненные, неувеличенные. Со стороны костной и мышечной систем патологии не выявлено. При перкуссии над легкими легочный звук, дыхание пуэрильное. Границы относительной сердечной тупости в пределах возрастной нормы. Тоны сердца ясные, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень пальпируется по краю реберной дуги, селезенка не пальпируется. Стул оформленный. Мочеиспускание безболезненное. Ребенку определено содержание альбуминов в сыворотке крови 55%, SH-группы эритроцитов 2,0 ед., ЛДГ эритроцитов 5,0103 ед. Вроблевского, МДА в крови 33,6 нм/мл, глютатиона 21 мг%. Выявлена гепатоцеллюлярная недостаточность, что объясняет нарушение роста и развития ребенка, проявляющиеся в отклонении физического и нервно-психического развития.

Пример 2. Ребенок Ш., 9 месяцев, от 1 беременности, первых срочных родов. В период беременности мать страдала гестозом, анемией, кольпитом. Ds: Перинатальная гипоксически-ишемическая энцефалопатия, ранний восстановительный период, синдром двигательных нарушений, внутричерепной гипертензии. Конъюгационная желтуха II ст. При осмотре общее состояние удовлетворительное. Активный. Аппетит удовлетворительный. Физическое развитие: дефицит массы I степени, микросоматотип. Нервно-психическое развитие: задержка на 2 эпикризных срока III степени. Кожа и слизистые чистые, бледные. Зев умеренно гиперемирован. Миндалины разрыхлены. Лимфатические узлы единичные, мягкие, безболезненные. При перкуссии над легкими звук легочный, дыхание пуэрильное. Границы сердца в пределах возрастной нормы, на верхушке и по левому краю грудины выслушивается систолический шум, за пределы сердца не выходит. Живот мягкий, безболезненный. Печень пальпируется на 1 см из-под края реберной дуги, эластическая, безболезненная. Селезенка, почки не пальпируются. Стул оформленный. Мочеиспускание безболезненное. Данному ребенку проведено исследование и установлено: содержание альбуминов 54%, SH-групп эритроцитов 2,2 ед. , ЛДГ 5,2103 ед. Вроблевского, МДА 29,0 нм/мл, глютатиона 18 мг%. Выявлена гепатоцеллюлярная недостаточность, проявляющаяся в нарушениях процессов роста и развития, физического, нервно-психического развития. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ прогнозирования гепатоцеллюлярной недостаточности у детей раннего возраста, перенесших перинатальную гипоксию, включающий определение альбумина, отличающийся тем, что у детей, перенесших перинатальную гипоксию, дополнительно определяют содержание SH-группы эритроцитов, лактатдегидрогеназу в эритроцитах, малонового диальдегида крови, глютатиона крови и альбуминов крови, при снижении показателей альбуминов ниже 55%, SH-групп ниже 2,4 ед., глютатиона до 22 мг%, при повышении лактатдегидрогеназы выше 4,9 х 103 ед. Вроблевского и малонового диальдегида выше 25 нм/мл прогнозируют возможность развития гепатоцеллюлярной недостаточности, когда отсутствуют клинические проявления поражения печени.