СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИЗ КРОВИ БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ ГЕЛЬМИНТОВ, ЛИЧИНОК ГЕЛЬМИНТОВ
(51) МПК
G01N 33/48 (2006.01)
G01N 1/28 (2006.01)
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Статус: по данным на 10.08.2007 - может прекратить свое действие
--------------------------------------------------------------------------------
Документ: В формате PDF
(14) Дата публикации: 2006.08.10
(21) Регистрационный номер заявки: 2004111696/15
(22) Дата подачи заявки: 2004.04.19
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.04.19
(45) Опубликовано: 2006.08.10
(56) Аналоги изобретения: SU 1308900 A1, 07.05.1987. RU 2011202 C1, 15.04.1994. SU 1601546 A1, 23.10.1990. SU 814339 С1, 23.03.1981. А.И.ОСИПОВСКИЙ. Учебник паразитологии с энтомологией. М., Медгиз, 1959, с.146.
(72) Имя изобретателя: Балугян Ружена Шаликовна (RU); Сеид-Гусейнов Алексей Асадович (RU); Микулин Александр Евгеньевич (RU); Кочергина Елена Сергеевна (RU); Иванова Оксана Ивановна (RU); Волков Игорь Эдуардович (RU)
(73) Имя патентообладателя: Балугян Ружена Шаликовна (RU); Сеид-Гусейнов Алексей Асадович (RU); Микулин Александр Евгеньевич (RU); Кочергина Елена Сергеевна (RU); Иванова Оксана Ивановна (RU); Волков Игорь Эдуардович (RU)
(98) Адрес для переписки: 125130, Москва, 6-й Новоподмосковный пер., 3, кв.141, для Р.Ш.Балугян
(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИЗ КРОВИ БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ ГЕЛЬМИНТОВ, ЛИЧИНОК ГЕЛЬМИНТОВ
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов. Для обнаружения гельминтов и их личинок получают микроскопические препараты, для чего смешивают пробы крови с антикоагулянтом К3-ЭДТА и добавляют концентрированный раствор глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л, затем инкубируют пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 минут, из верхнего слоя надосадочной жидкости отбирают 10-15 мкл, смешивают с 1% раствором Люголя, готовят мазки и проводят микроскопирование. Изобретение позволяет выявить паразитов в 100% случаях.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выделения из крови больных, например больных сахарным диабетом I и II типов, гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов. Предложенный способ является новым, ранее в научной и медицинской литературе не описан.
Целью изобретения является разработка способа выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
Поставленная цель достигается способом получения препарата крови на предметном стекле путем предварительного забора крови у больного с антикоагулянтом К3-ЭДТА (калиевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты); добавлением концентрированного раствора глюкозы (не более 10% от объема пробы крови) для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л; инкубированием пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 минут; забором из верхнего слоя надосадочной жидкости 10-15 мкл жидкости и перенесением ее на предметное стекло; далее добавлением на предметное стекло 10-15 мкл 1% раствора Люголя; смешиванием растворов на предметном стекле и приготовлением тонкого мазка; высушиванием мазка при 37°С в течение 15-20 минут и микроскопии полученного препарата с объективами 10 и 40, что позволяет обнаружить в крови больных сахарным диабетом I и II типов гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
Новым в предложенном способе является то, что в результате последовательного применения описанных этапов удалось выявить в 100% случаев в крови больных сахарным диабетом I и II типов имевшихся там гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
Новый способ обнаружения гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов в крови больных сахарным диабетом необходим для улучшения диагностики и лечения этих больных.
Отрабатывая отдельные этапы способа, проверены и обоснованы параметрические значения концентраций, времени, температуры и так далее, что отражено в приведенных примерах.
Пример 1.
1. У больного сахарным диабетом берется 0.5 мл венозной крови с антикоагулянтом К3-ЭДТА.
2. К ней добавляется 50 мкл раствора глюкозы (раствор глюкозы готовится на физиологическом растворе с концентрацией глюкозы 2200 ммоль/л) и проба перемешивается.
3. Проба инкубируется при 60°С в течение 15 минут.
4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносят на предметное стекло в виде капли.
5. Рядом на предметное стекло помещается 15 мкл 1% раствора Люголя, растворы на предметном стекле смешиваются и делается тонкий мазок.
6. Мазок высушивается при 37°С в течение 15 минут.
7. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.
Пример 2.
1. У больного сахарным диабетом взято 100 мкл капиллярной крови.
2. К ней добавлено 10 мкл раствора глюкозы с концентрацией 2200 ммоль/л.
3. Проба инкубируется при 60°С в течение 15 минут.
4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносятся на предметное стекло в виде капли.
5. Рядом на предметное стекло помещается 15 мкл 1% раствора Люголя. Растворы на предметном стекле смешиваются и делается тонкий мазок.
6. Мазок высушивается при 37°С в течение 15 минут.
7. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.
Всего венозная и капиллярная кровь была исследована более чем у 60 больных сахарным диабетом и в во всех препаратах, приготовленных по данной методике, были обнаружены гельминты, личинки гельминтов и другие паразиты.
Предлагаемый способ позволяет в обычных лабораторных условиях с помощью недорогих реактивов получать препараты крови больных сахарным диабетом и визуально определять в них гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов путем получения микроскопических препаратов, отличающийся тем, что смешивают пробы крови с антикоагулянтом К3-ЭДТА и добавляют концентрированный раствор глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л, затем инкубируют пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 мин, из верхнего слоя надосадочной жидкости отбирают 10-15 мкл, смешивают с 1%-ным раствором Люголя, готовят мазки и проводят микроскопирование.