СПОСОБ ПОДАВЛЕНИЯ ОПУХОЛЕВОГО РОСТА

СПОСОБ ПОДАВЛЕНИЯ ОПУХОЛЕВОГО РОСТА


RU (11) 2255742 (13) C2

(51) 7 A61K31/714, A61K33/24, A61N5/10, A61P35/00 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 07.09.2007 - действует 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2005.07.10 
(21) Регистрационный номер заявки: 2003128321/14 
(22) Дата подачи заявки: 2003.09.22 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2003.09.22 
(43) Дата публикации заявки: 2005.03.27 
(45) Опубликовано: 2005.07.10 
(56) Аналоги изобретения: Справочник по онкологии, под ред. д.м.н. Б.Е.Петерсона, М., Медицина, 1964, с.50-60. RU 2114623 C1, 10.07.1998. RU 2193563 С2, 27.11.2002. RU 2172319 C1, 20.08.2001. СА 1339360, 26.08.1997, abstr. US 5,405,839, 11.04.1995, abstr. АКАТОВ B.C. И ДР. Ингибирование синтеза ДНК и митотической активности опухолевых клеток in vitro при сочетанном действии 
витаминов С и В12в // Российский онкологический журнал, 2001, №6, с.22-25. ЧИССОВ В.И. И ДР. Бинарные каталитические системы как новые противоопухолевые средства // Российский онкологический журнал, 2000, №6, с.23-26.

(72) Имя изобретателя: Акатов В.С. (RU); Ворожцов Г.Н. (RU); Калия О.Л. (RU); Корыстов Ю.Н. (RU); Лукьянец Е.А. (RU); Панкратов А.А. (RU); Чиссов В.И. (RU); Якубовская Р.И. (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" ФГУП "ГНЦ "НИОПИК" (RU); Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена (МНИОИ им. П.А. Герцена) (RU) 
(98) Адрес для переписки: 123995, Москва, ГСП-5, ул. Б. Садовая, 1, корп.4, ФГУП "ГНЦ "НИОПИК" 

(54) СПОСОБ ПОДАВЛЕНИЯ ОПУХОЛЕВОГО РОСТА
Изобретение относится к биологии и медицине, а именно, касается способа подавления опухолевого роста с применением лучевой терапии в виде ионизирующего излучения. При этом дополнительно вводят смесь натриевой соли окта-4,5-карбоксифталоцианина кобальта или оксикобаламина с аскорбатом натрия при соотношении 1:10-1:30. Способ комбинированного использования облучения и указанной смеси веществ позволяет повысить эффективность противоопухолевого лечения, приводя к 70-100% излечению экспериментальных животных, при снижении лучевой нагрузки и токсичности. 2 табл., 3 ил.



ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Предлагаемое изобретение относится к биологии и медицине, а именно касается способа подавления опухолевого роста с применением лучевой терапии.

Лучевая терапия является одним из ведущих методов в комплексном лечении злокачественных новообразований [Лучевая терапия злокачественных опухолей. Руководство для врачей /Е.С.Киселева, Г.В.Голдобенко, С.В.Канаев и др. Под ред. Е.С.Киселевой. - М.: Медицина, 1996]. Лучевая терапия как самостоятельный метод лечения применяется у различного числа больных в зависимости от локализации, распространенности опухолевого процесса и радиочувствительности опухоли.

Преимуществом этого метода консервативной противоопухолевой терапии является высокая проникающая способность ионизирующего излучения, что позволяет лечить опухоли, глубоко залегающие в тканях.

Однако для полного уничтожения злокачественных опухолей необходима достаточно высокая доза излучения. В то же время применение высоких доз ионизирующего излучения приводит к переоблучению нормальных тканей, в результате чего происходит утрата их способности к резорбции поврежденной опухоли и репарации дефекта, образовавшегося на месте предсуществовавшей опухоли. Кроме того, применение высоких доз облучения приводит к развитию тяжелых местных и общих токсических реакций. Снижение дозы облучения приводит к снижению эффективности проводимого лечения и недооблучению периферических отделов опухолей, которые не имеют четких границ с нормальными тканями, что приводит впоследствии к возникновению рецидива опухоли.

Задачей предлагаемого изобретения была разработка такого способа подавления опухолевого роста с применением лучевой терапии, который бы позволил при сравнительно невысокой дозе излучения обеспечить эффективное подавление опухолевого роста.

Для решения этой задачи предложен способ подавления опухолевого роста с применением лучевой терапии, в котором дополнительно к облучению применяют смесь натриевой соли окта-4,5-карбоксифталоцианина кобальта (терафтал®, препарат “Терафтал-лио”, Тф) или оксикобаламина (препарат “Оксикобаламин-лио”, Ок) с аскорбатом натрия (официнальный препарат “Аскорбиновая кислота”, Ак) при их молярном соотношении 1:10÷1:30 (далее - бинарные каталитические системы [БКС] "Тф+Ак" и "Ок+Ак"). Применение указанных препаратов в молярном соотношении, выходящем за нижний предел, приводит к снижению противоопухолевой эффективности БКС, а при значениях, выходящих за верхний предел указанного интервала, - оказывает токсическое действие.

Бинарные каталитические системы и их применение в онкологии описаны:

- Патент РФ 2106146, А 61 К 31/40, 10.03.98;

- Соединения ряда В12 в сочетании с аскорбиновой кислотой как потенциальные противоопухолевые агенты / М.Е.Вольпин, Р.И.Якубовская, А.А.Панкратов, В.И.Чиссов и др. // Российский химический журнал, 1998, т.XLII, № 5, с.116. 

Испытание предложенного способа осуществляли по нижепреведенной методике.

Методика.

Испытание способа осуществляли на мышах с асцитной опухолью Эрлиха (АОЭ) и эпидермоидной карциномой легких Льюис (LLC).

АОЭ прививали неинбредным мышам-самкам внутрибрюшинно по 0,1 мл асцитной жидкости, взятой у мыши донора на 7 день роста опухоли и разведенной 1:1 0,9% раствором хлорида натрия.

LLC прививали подкожно на бедро по 1 млн клеток на мышь, взятых у мыши-донора на 10-12 день роста опухоли.

Лечение животных с АОЭ начинали через 48 часов после инокуляции опухолевого материала, с LLC - на 7 сутки.

Контрольным животным вводили placebo (0,9% раствор хлорида натрия).

Дозы и режимы введения бинарных каталитических систем, а также режимы облучения изложены в нижеприведенных примерах.

Дозу облучения для лечения мышей с АОЭ и LLC подбирали экспериметально, исходя из радиочувствительности этих опухолей.

Противоопухолевый эффект оценивали по:

- выживаемости (кинетике гибели животных от прогрессирования опухолевого процесса);

- увеличению продолжительности жизни (УПЖ), вычисленному по формуле:

УПЖ= [(СПЖопыт-СПЖконтроль)/СПЖконтроль ]×100%;

- торможению роста опухоли, вычисленному по формуле:

ТРО(%)=[(Vконтроль-Vопыт )/Vконтроль]×100,

где V - объем опухоли в мм3.

Минимальные критерии активности:

- УПЖ>25%; ТРО>50% [Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ / Трещалина Е.М., Жукова О.С., Герасимова Г.К. и др // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: ИИА Ремедиум, 2000, с.319; Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США / под редакцией З.П.Софьиной, А.Б.Сыркина, А.Голдина, А.Кляйна. М.: “Медицина”, 1980].

Статистическую обработку полученных результатов проводили по методам вариационной и альтернативной статистики и методу Стьюдента-Фишера с использованием статистической программы "STATISTICA" при р0,05. 

Предлагаемое изобретение иллюстрируется нижеприведенными римерами.

Пример 1.

Исследования проведены на мышах с асцитной опухолью Эрлиха.

БКС “Ок+Ак” вводили однократно внутрибрюшинно в дозе, равной 75 мг/кг (по Ок; молярное соотношение Ок:Ак-1:30).

В качестве источника излучения использовали 60Со (-излучение). 

Доза облучения - 0,5 Гр.

Режим применения БКС “Ок+Ак” и лучевой терапии:

-излучение БКС “Ок+Ак”.

Данные, характеризующие противоопухолевую эффективность комплексного лечения мышей с АОЭ с применением методов лучевой и бинарной каталитической терапии (БКС “Ок+Ак”), представлены на фиг.1 и в таблице 1.

Как видно из табл.1 и фиг.1, лучевая терапия в дозе, равной 0,5 Гр, и БКС “Ок+Ак” в дозе, равной 75 мг/кг (по Ок; молярное соотношение Ок:Ак-1:30), в моноварианте приводят к увеличению продолжительности жизни животных на 21% и 71%, соответственно.

Таблица 1 
Облучение, 0,5 Гр Ок-лио+Ак, 75 мг/кг (М:М-1:30) Облучение“Ок+Ак” 
УПЖ,% 21 71 
Излечение, % Нет Нет 100 
Примечание: М:М - молярное сооношение Ок-лио и Ак 


При комплексном лечении мышей с АОЭ с использованием лучевой терапии в дозе, равной 0,5 Гр, и БКС “Ок+Ак” в дозе, равной 75 мг/кг (по Ок; молярное соотношение Ок:Ак-1:30), в режиме - -излучение БКС “Ок+Ак” отмечали 100% излечение животных от опухоли (фиг.1, табл.1).

Пример 2.

Исследования проведены на мышах с эпидермоидной карциномой легких Льюис.

БКС “Ок+Ак” вводили однократно внутривенно в дозе, равной 50 мг/кг (по Ок; молярное соотношение Ок:Ак-1:10).

В качестве источника излучения использовали 60Со (-излучение). 

Доза облучения - 25 Гр.

Режим применения БКС “Ок+Ак” и лучевой терапии:

-излучение БКС “Ок+Ак”.

Данные, характеризующие противоопухолевую эффективность комбинированного лечения мышей с LLC с применением методов лучевой и бинарной каталитической терапии (БКС “Ок+Ак”), представлены на фиг.2.

Как видно из фиг.2, лучевая терапия в дозе, равной 25 Гр, в моноварианте оказывает противоопухолевое действие, приводя к торможению роста опухоли на 80-72% (сохранение эффекта в течение 15 дней после лечения).

Эффективность БКС “Ок+Ак” при однократном внутривенном введении в дозе, равной 50 мг/кг (по Ок; молярное соотношение Ок:Ак-1:10), оцененная по показателю ТРО, не превысила 11%.

Комбинированное лечение мышей с LLC с использованием методов лучевой терапии и бинарной каталитической терапии оказывало более выраженное терапевтическое действие, чем лучевая терапия, используемая как самостоятельный метод лечения - ТРО на уровне 80-75% сохранялось в течение 23 дней после лечения (фиг.2).

Пример 3.

Исследования проведены на мышах с асцитной опухолью Эрлиха.

БКС “Тф+Ак” водили однократно внутрибрюшинно в дозе, равной 30 мг/кг (по Тф; молярное соотношение Тф:Ак-1:10).

В качестве источника излучения использовали 60Со (-излучение). 

Доза облучения - 1,5 Гр.

Режим применения БКС “Тф+Ак” и лучевой терапии:

БКС “Тф+Ак” -излучение. 

Данные, характеризующие противоопухолевую эффективность комбинированного лечения мышей с АОЭ с применением методов лучевой и бинарной каталитической терапии (БКС “Тф+Ак”), представлены на фиг.3 и в таблице 2.

Таблица 2 
Облучение, 1,5 Гр Тф+Ак, 30 мг/кг (М:М-1:10) “Тф+Ак”облучение 
УПЖ,% 29 22 - 
Излечение, % Нет Нет 70 
Примечание: М:М- молярное сооношение Тф и Ак. 


Как видно из фиг.3 и табл.2, лучевая терапия в дозе, равной 1,5 Гр, и БКС “Тф+Ак” в дозе, равной 30 мг/кг (по Тф; молярное соотношение Тф:Ак-1:10), в моноварианте приводят к увеличению продолжительности жизни животных на 29% и 22%, соответственно. 

Комбинированное применение лучевой терапии в дозе, равной 1,5 Гр, и БКС “Тф+Ак” в дозе, равной 30 мг/кг (по Тф; молярное соотношение Тф:Ак-1:10), в режиме БКС “Тф+Ак”-излучение” оказывало более выраженное противоопухолевое действие, чем облучение и БКС в моноварианте - при использовании этой схемы противоопухолевой терапии наблюдали излечение от опухоли 70% животных (фиг.3, табл.2). 

Таким образом, предлагаемый способ подавления опухолевого роста, сочетающий облучение и применение БКС, позволяет повысить эффективность лечения: излечение достигает 70-100%.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ подавления опухолевого роста с применением лучевой терапии в виде ионизирующего излучения, отличающийся тем, что дополнительно применяют смесь натриевой соли окта-4,5-карбоксифталоцианина кобальта или оксикобаламина с аскорбатом натрия при соотношении 1:10-1:30.