СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОПЕРАТИВНО-ЛУЧЕВОГО И ОПЕРАТИВНО-ТЕРМОЛУЧЕВОГО ЛЕЧЕНИЯ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОПЕРАТИВНО-ЛУЧЕВОГО И ОПЕРАТИВНО-ТЕРМОЛУЧЕВОГО ЛЕЧЕНИЯ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ


RU (11) 2214593 (13) C2

(51) 7 G01N33/48 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 07.09.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 2003.10.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 2000121395/14 
(22) Дата подачи заявки: 2000.08.10 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2000.08.10 
(45) Опубликовано: 2003.10.20 
(56) Аналоги изобретения: АГАМОВА К.А. и др. Прогностическое значение цитологических признаков при раке молочной железы. Вопросы онкологии, 1978. - Медицина, т.XXIV, №11, с.70-75. RU 2099703 C1, 20.12.1997. RU 2140086 C1, 20.10.1999. КОНДРИЧИНА С.Н. Оценка эффективности различных методик комбинированного лечения рака молочной железы ранних стадий (T1-2NO-1MO). Автореф. на соиск. уч. ст. канд. мед. н. - СПб., 1998. BOYAGES J. et al. Predictors of local recurrence after treatment of ductal carcinoma in situ: a meta-analysis. Cancer, 1999, 85(3), p.616-628. 
(71) Имя заявителя: Военно-медицинский институт Федеральной пограничной службы Российской Федерации при Нижегородской государственной медицинской академии; Дорожная клиническая больница Горьковской железной дороги Министерства путей сообщения Российской Федерации; Монахов Александр Геннадьевич 
(72) Имя изобретателя: Монахов А.Г.; Карев И.Д.; Смирнов В.П. 
(73) Имя патентообладателя: Военно-медицинский институт Федеральной пограничной службы Российской Федерации при Нижегородской государственной медицинской академии; Дорожная клиническая больница Горьковской железной дороги Министерства путей сообщения Российской Федерации; Монахов Александр Геннадьевич 
(98) Адрес для переписки: 603001, г.Нижний Новгород, Нижне-Волжская наб. 1/1, ВМИ ФПС РФ при НГМА, НИРИО 

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОПЕРАТИВНО-ЛУЧЕВОГО И ОПЕРАТИВНО-ТЕРМОЛУЧЕВОГО ЛЕЧЕНИЯ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии. Способ заключается во взятии цитологических пунктатов до начала лучевого или термолучевого лечения, а также послеоперационных срезов опухолевой ткани и морфометрическом анализе материала. Высокий уровень некротических процессов в раковой паренхиме после проведения лучевой или термолучевой терапии прогнозируют при определении в пунктатах показателей дисперсии объема ядер - около 395,6 и более, среднеквадратическом отклонении - около 19,9 и более при значении объема ядра около 783,4 мкм3. Рецидивы опухолевого процесса в течение 5 лет после лечения прогнозируют при определенных значениях плотности опухолевой паренхимы, площади очагов некроза, индекса нормальных митозов и плотности опухолевой стромы при оперативно-лучевом лечении, в случае оперативно-термолучевого лечения - при определенных значениях плотности опухолевой паренхимы, индекса нормальных митозов, индекса патологических митозов. Способ позволяет повысить эффективность лечения. 4 табл. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Предлагаемый способ относится к медицине, в частности к онкологии и лучевой терапии, предназначен для прогнозирования уровня регрессии раковой паренхимы опухолевых узлов и частоты рецидивирования опухоли в рубце после комбинированного оперативно-лучевого и оперативно-термолучевого лечения.

Лучевая терапия рака молочной железы - один из основных компонентов комбинированного лечения. Известно, что именно лучевое воздействие предопределяет интерфазную и пролиферативную гибель опухолевых клеток.

Известны способы прогнозирования клинического течения рака молочной железы (РМЖ) на основе клинико-морфологических параметров РМЖ. К ним относятся: статус региональных лимфатических узлов, полиморфизм клеточных ядер, их диаметры, гиперхроматоз [A. Zajdela, 1979]. Данные работы мы рассматриваем в качестве аналогов [5, 6].

Однако эти параметры имеют прогностическую силу только в случае оперативного лечения.

Известен способ прогнозирования регрессии опухолевых элементов на основе большей радиочувствительности низкодифференцированных (высокоаналитических) опухолей [3, 4]. Способ выбран в качестве прототипа.

Суть способа заключается в следующем:

- из узла раковой опухоли молочной железы забираются пунктаты - мазки отделяемого из соска;

- цитологический материал окрашивается азурэозином по Романовскому, в нем определяется степень дифференцирования клеточных элементов;

- из послеоперационного материала рака молочной железы изготавливаются гистологические срезы опухолевого узла, в которых определяется степень терапевтического патоморфоза по Г.А.Лавниковой;

- сопоставляется степень дифференцирования клеток в пунктатах со степенью терапевтического патоморфоза в гистологических срезах;

- снижение степени дифференцирования говорит о возрастающей степени терапевтического (лучевого) патоморфоза.

Большая радиочувствительность низкодифференцированных опухолей выражается в большей степени повреждения опухолевой паренхимы, более высокой площади некротических фокусов в ней [Никитина Н.И., Агамова К.А., 1974].

Однако данный способ не позволяет количественно оценить степень зависимости показателей повреждения рака молочной железы от параметров его дифференцировки (анаплазии). Количественное же выражение этой зависимости указывает доверительную вероятность прогнозирования уровня повреждения раковой паренхимы.

Данный способ не позволяет прогнозировать клиническое течение заболевания: длительность безрецидивного периода, частоту рецидивов. А именно эти показатели во многом определяют эффективность проведенного комбинированного и комплексного лечения.

Целью предлагаемого способа является повышение эффективности лечения за счет прогнозирования объема посттерапевтического повреждения раковой паренхимы после комбинированного оперативно-лучевого и оперативно-термолучевого лечения, а также прогнозирования безрецидивной выживаемости больных в сроки до 5 лет по окончании лечения.

Поставленная цель достигается тем, что до начала оперативно-лучевой и оперативно-термолучевой терапии забирают цитологические пунктаты, а на 2-3 день после оперативно-лучевого или оперативно-термолучевого лечения РМЖ изготовляют гистологические препараты из срезов опухолевой ткани и проводят морфометрическое исследование материала. В цитологических пунктатах определяют дисперсию объема ядер, среднеквадратичное отклонение.

После оперативно-лучевого лечения определяют плотность опухолевой паренхимы, площадь очагов некроза, индекс нормальных митозов, плотность опухолевой стромы. После оперативно-термолучевого лечения определяют параметры плотности опухолевой паренхимы, индекса нормальных митозов, индекса патологических митозов.

При показателях: дисперсии объема ядер около 395,6 и более, среднеквадратичного отклонения - около 19,9 и более (при значении объема ядра около 783,4 мкм3) прогнозируется больший объем повреждения раковой паренхимы. В случае оперативно-лучевого лечения при показателях: плотности опухолевой паренхимы - около 28,9% и более, площади очагов некроза - около 4,3% и менее, индекса нормальных митозов - около и более, плотности опухолевой стромы - около 40,4% и менее; в случае оперативно-термолучевого лечения при значениях: плотности опухолевой паренхимы - около 16,7% и более, индекса нормальных митозов - около и более, индекса патологических митозов - около и более прогнозируют рецидивы опухолевого процесса в течение 5 лет после проведенного лечения.

Способ осуществляется следующим образом. Забирается материал цитологических пунктатов, на анализаторе цитологических особенностей опухолевых клеток "Интеграл-2МТ" оценивают расположения опухолевых клеток. Выявляют степень дифференцирования элементов раковой паренхимы в трех вариантах: низкодифференцированный (высокоанапластичный), умереннодифференцированный (умеренноанапластичный), высокодифференцированный (низкоанапластичный).

Производится вычисление наибольшего (L) и наименьшего (В) диаметров ядер. Объем ядра U рассчитывается по формуле (1):

(Формула 1)



при этом ядро опухолевой клетки принимают за эллипс с наибольшей (L) и наименьшей (В) осями вращения [Автандилов Г.Г., 1990].

Параллельно не менее чем у 50 ядер рассчитывают и параметры стандартного отклонения от среднего объема (Формула 2, 3):

(Формула 2)

D - дисперсия



Xi - выборочное среднее;

X - арифметическое среднее значение

(Формула 3)

S - среднеквадратичное отклонение

.

Результаты измерения диаметров ядер обобщены в таблице 1.

Из опухолевого узла, подвергнутого лучевому и термолучевому лечению, изготавливаются серийные и гистотопографические срезы. В последних методом "точечного счета" определяется объемная плотность опухолевой паренхимы, стромы, площадь "клеточных" очагов некроза сосудистых просветов согласно руководству Г.Г.Автандилова [1990].

Производится также подсчет индекса митотической активности [Алов А.И., Казанцева И.A. 1979]. Вычисляются средние значения полученных показателей.

В ходе исследований выявлены коррелятивные зависимости между параметрами кариометрии (объем ядер, их дисперсия, среднеквадратичное отклонение) и параметрами посттерапевтической регрессии раковой паренхимы.

Результаты обобщены в таблице 2.

Суть коррелятивных зависимостей заключалась в том, что с возрастанием анаплазии элементов паренхимы в цитологических препаратах после оперативно-лучевого лечения в опухолевых узлах обнаруживались достоверно меньшие значения плотности паренхимы, зафиксировано достоверно более высокие значения площади "клеточных" очагов некроза. Полученные факты указывают на ценность для прогноза регрессии раковой паренхимы параметров ее анаплазии в цитологических пунктатах.

Обнаруженные положительные корреляции позволяют использовать параметры полиморфизма ядер опухолевых клеток прогностическими критериями для прогноза уровня некротических процессов в паренхиме после проведенного лечения. Высокие показатели полиморфизма предопределяли и высокий уровень некротических процессов в раковой паренхиме.

При комбинированном оперативно-лучевом лечении проводилась оценка прогностической значимости параметров посттерапевтического патоморфоза. Суть ее заключалась в поиске достоверности статистического различия между объемной плотностью опухолевой паренхимы, стромы, площади "целлюлярных" очагов некроза, сосудистых просветов у пациенток с наличием или отсутствием рецидива в послеоперационном рубце в течение 5 лет по окончании лечения.

Обнаружилось статистически достоверное различие между значениями объемной плотности опухолевой паренхимы у больных с наличием и отсутствием рецидива за это время.

Значения показателей лучевого патоморфоза у больных с наличием или отсутствием рецидива в послеоперационном рубце в течение 5 лет по окончании лечения представлены в таблице 3.

Параллельно с этим прогностическую значимость на безрецидивное проживание 5 лет выявил показатель площади "целлюлярных" очагов некроза в сохранившейся опухолевой паренхиме. У больных с отсутствием рецидива его значение было достоверно выше /Р<0,05/, чем у больных, имеющих рецидив. Показатель индекса митотической активности (ИМН) также обнаружил прогностическую значимость.

У больных, имеющих рецидив, его значение было в 10 раз выше, чем у пациенток, проживших без рецидива. Благоприятное прогностическое значение на проживание 5 лет без рецидива имели и высокие значения объемной плотности стромы. У больных с отсутствием рецидива объемная плотность стромы была достоверно выше /Р<0,05/, чем у больных, имеющих рецидив.

При комбинированном оперативно-термолучевом лечении аналогичный поиск прогностической ценности параметров терапевтического патоморфоза выявил следующее: прогностическим критерием на безрецидивную выживаемость в течение 5 лет была объемная плотность сохранившейся опухолевой паренхимы. У больных с наличием рецидива опухоли в рубце значение плотности паренхимы было достоверно выше /Р<0,05/, чем у больных с их отсутствием. Показатели посттерапевтического патоморфоза у больных с различными результатами проживания 5 лет после оперативно-термолучевого лечения (СВЧ-нагрев) обобщены в таблице 4.

Другими показателями патоморфоза, выявившими прогностическую значимость на безрецидивное проживание 5 лет, были ИНМ и ИПМ. У больных, проживших 5 лет без рецидива, значения этих параметров были достоверно выше, чем у пациенток, имеющих рецидив в рубце.

Пример 1.

Больная О., 57 лет, поступила в ГОД 24.09.1987 г. после законченного курса среднефракционной лучевой терапии с диагнозом: Рак правой молочной железы Т2 N0-1 M0, цитологическое заключение 1854 от 01.09.87 г: умереннодифференцированная карцинома.

24.09.87 г. Радикальная мастэктомия по Холстеду. Гистологическое заключение: Протоковый инфильтрирующий рак с патоморфозом III ст. В 1 лимфатическом узле из субаксиллярной области - метастаз протокового рака. Плотность опухолевой паренхимы 3,6%, площадь очагов некроза 8,5%, плотность стромы 44,3%. И.Н.М .

При регулярном обследовании (1 раз в 6 месяцев) в течение 5 лет после комбинированного оперативно-лучевого лечения не выявлено рецидивов в послеоперационном рубце.

Приведенный клинический пример иллюстрирует прогностическое значение морфометрических параметров патоморфоза. Рассчитанные показатели соответствовали значениям параметров в таблице 3. Клиническое поведение опухоли также соответствовало табличным значениям.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. - М.: Медицина, 1990, 382 c.

2. Алов И.А., Аспиз М.Е., Казанцева И.А. Определение митотического режима ткани в патологической диагностике предраковых процессов и рака /методические указания/. - М., 1973, 21 c.

3. Никитина Н. И., Агамова К.А. Цитологическое прогнозирование эффекта лучевого воздействия и возможность определения злокачественности рака молочной и щитовидной железы. - В кн.: Современные методы морфологического исследования в практической онкологии. Тбилиси. 1979. Мецниереба. С. 133-134.

4. Агамова К.А., Сидорова Н.А., Бурлаков И.А. Прогностическое значение патологических признаков при раке молочной железы.//Вопр. онкологии. - 1978. - 11. - C.70-75.

5. Stenkvist В. , Bengtsson R., Dahlgvish В. et all. Predicting breast cancer recurence.//Cancer. 1982. Vol.50, pp.2884-2893.

6. Zajdela A. , Saravia de la Riva., Ghossein N.A. The relation of prognosis to the nuclear diameter of breast cancer cells obtained by cytologic aspiration.//Acta. Cytol. 1979. Vol.23. No.1. pp.75-80. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ прогнозирования эффективности оперативно-лучевого и оперативно-термолучевого лечения рака молочной железы, заключающийся во взятии цитологических пунктатов и послеоперационных срезов опухолевой ткани и морфометрическом анализе материала, отличающийся тем, что в цитологических пунктатах, взятых до начала лучевого или термолучевого лечения, определяют дисперсию объема ядер и среднеквадратическое отклонение, и при показателях: дисперсии объема ядер - около 395,6 и более, среднеквадратическом отклонении - около 19,9 и более при значении объема ядра около 783,4 мкм3 прогнозируют высокий уровень некротических процессов в раковой паренхиме после проведения лучевой или термолучевой терапии, после чего исследуют операционный материал, полученный из опухолевой ткани, подвергнутой лучевому или термолучевому лечению, и прогнозируют рецидивы опухолевого процесса в течение 5 лет после лечения при значениях плотности опухолевой паренхимы - около 28,9% и более, площади очагов некроза - около 4,3% и менее, индекса нормальных митозов - около и более, плотности опухолевой стромы - около 40,4% и менее в случае оперативно-лучевого лечения, а в случае оперативно-термолучевого лечения - при значениях: плотности опухолевой паренхимы - около 16,7% и более, индекса нормальных митозов - около и более, индекса патологических митозов - около и более.