СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ДИСПЛАСТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА В РЕСПИРАТОРНОМ ЭПИТЕЛИИ

СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ДИСПЛАСТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА В РЕСПИРАТОРНОМ ЭПИТЕЛИИ


RU (11) 2293323 (13) C1

(51) МПК
G01N 33/48 (2006.01) 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 10.08.2007 - действует 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2007.02.10 
(21) Регистрационный номер заявки: 2005117493/15 
(22) Дата подачи заявки: 2005.06.07 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2005.06.07 
(45) Опубликовано: 2007.02.10 
(56) Аналоги изобретения: КОГАН Е.А. и др. Цитогенетические варианты дисрегенеративных и предраковых изменений эпителия при хронических воспалительных заболеваниях легких. Архив патологии. 2003, 65, №4, с.12-18. BOCKING A. Abklarung plattenepithelialer Dysplasien mittels DNA-Bildzytometrie. Dtsch. Arztebl. 1998, №12, p.542-546, реф. Найдено из БД VINITI.RU. [найдено
10.02.2006]. [он-лайн]. RU 2217183 С2 27.11.2003, описание. ДИКОВИЧ М.Ф. Морфологические критерии степени дисплазии эпителия бронхов. Актуальные проблемы современной онкологии. Томск, 1991, с.182-185. Найдено из АБД "Российская Медицина", [найдено 13.02.2006]. [он-лайн]. KEITH R.L. et al. Angiogenic scuamous dysplasia in bronchi of individuals at high risk for lung cancer. Clin. Cancer Res. 2000, 6, №5, р.1616-1625, реф. Найдено в БД VINITI.RU. [найдено 10.02.2006]. [он-лайн].

(72) Имя изобретателя: Панкова Ольга Владимировна (RU); Перельмутер Владимир Михайлович (RU); Ялова Марина Федоровна (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Государственное учреждение научно-исследовательский институт онкологии Томского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН (RU) 
(98) Адрес для переписки: 634009, г.Томск, Кооперативный, 5, ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН 

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ДИСПЛАСТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА В РЕСПИРАТОРНОМ ЭПИТЕЛИИ
Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и касается способа прогнозирования течения диспластического процесса в респираторном эпителии. Сущность способа: путем гистологического исследования бронхобиоптатов и мазков-отпечатков с них выявляют сочетание плоскоклеточной метаплазии с диспластическими изменениями. При наличии плоскоклеточной метаплазии на фоне диспластического процесса прогнозируют неблагоприятное течение дисплазии в респираторном эпителии. Способ позволяет повысить точность прогнозирования течения диспластического процесса в респираторном эпителии. 1 табл.




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования течения диспластического процесса в респираторном эпителии.

Развитие плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии рассматривается в современной литературе как вероятный этап морфогенеза рака легкого. Однако существуют диаметрально противоположные точки зрения о том, можно ли ее относить к предраку. Одни авторы, на основании проведенных экспериментальных исследований, полагают, что плоскоклеточная метаплазия - это реакция на любое повреждение и отражает нарушенную репаративную регенерацию эпителия [2]. Другие же включают плоскоклеточную метаплазию в предраковые изменения эпителия, поскольку наблюдали развитие рака легкого у больных с метаплазией [3, 5, 9]. При этом отмечается, что следующий за плоскоклеточной метаплазией этап - дисплазия эпителия - может быть пропущен. Вопрос о взаимоотношении плоскоклеточной метаплазии и дисплазии остается не изученным до настоящего времени. Сведения о прогностической значимости метаплазии для оценки течения и исхода диспластического процесса в литературе вообще отсутствуют.

В настоящее время известны цитологический и гистологический способы определения степени дисплазии по качественным (описательным) микроскопическим признакам. Цитологически дисплазия сопровождается увеличением размеров клеток и ядер (вплоть до появления очень крупных при тяжелой степени), изменением их формы, сдвигом ядерно-цитоплазматического соотношения в сторону ядра, нарастанием степени гиперхромии ядер [1]. На гистологическом уровне эти состояния характеризуются как очаговые или диффузные пролифераты, в которых отмечаются нарушения структуры эпителиального пласта, потеря полярности, появление митозов, а при тяжелой дисплазии - единичных атипичных клеток [7]. По мере прогрессирования степени тяжести диспластического процесса, перечисленные выше качественные признаки усугубляются. Недостатком цитологического и гистологического способа определения дисплазии является субъективизм в оценке дифференциальных критериев этого процесса. И как отмечает ряд авторов, с большей достоверностью может быть определена картина тяжелой дисплазии. Однако в этом случае возникает сложность дифференциальной диагностики последней с раком in situ [3, 5, 8].

Наряду с традиционными морфологическими подходами к диагностике предраковых процессов ведется активный поиск новых методов объективизации морфологических критериев дифференциальной диагностики рака и предраковых изменений легких. Один из них - цитоморфометрический. При этом изучаются такие параметры клеток и ядер, как площади, периметры, ядерно-цитоплазматическое отношение, коэффициенты формы. Полагают, что чем тяжелее степень патологического процесса, тем выше значения этих показателей. Аналогичные результаты получены и при исследовании пролиферативной активности. Отмечена следующая особенность: увеличивается митотическая активность и число патологических митозов, преобладают клетки в стадии метафазы. Данные изменения количественных параметров клеток и ядер, а также нарушения митотического режима могут иметь прогностическое значение при оценке предопухолевого процесса. Чем выраженнее изменения, тем неблагоприятнее прогноз [6].

В настоящее время в изучении цитогенеза предрака и рака легкого используется метод иммуногистохимии. Анализ экспрессии онкомаркеров при различных дисрегенераторных изменениях легочного эпителия позволяет говорить об их предполагаемом злокачественном потенциале. Установлено, что при появлении признаков клеточной атипии усиливается экспрессия Ki-67, PCNA и р 53, достигая максимума при тяжелой дисплазии [4]. Следует подчеркнуть, что описанные выше методы дифференциальной диагностики дисплазии, несмотря на свою объективность, имеют и недостатки. Эти методы трудоемки, требуют больших временных затрат и наличия специального оборудования. Кроме того, иммуногистохимический метод относится к дорогостоящим. Все это затрудняет использование данных методов в повседневной лабораторной практике.

Таким образом, все проведенные ранее исследования по предраковым изменениям бронхиального эпителия, были направлены на выявление дифференциально-диагностических признаков дисплазии, особенно тяжелой степени, и рака легкого. Однако по данной проблеме еще остается много открытых вопросов. Так, например, известно, что дисплазия может прогрессировать от легкой степени к более тяжелой степени. Последняя, соответственно, может перейти в рак. Критерии прогноза перехода дисплазии от одной степени к другой отсутствуют.

Задачей предлагаемого изобретения является повышение точности прогнозирования течения диспластического процесса в респираторном эпителии.

Поставленная задача достигается путем гистологического исследования бронхобиоптатов и мазков-отпечатков с них, при этом определяют сочетание плоскоклеточной метаплазии с диспластическими изменениями и при наличии плоскоклеточной метаплазии на фоне диспластического процесса прогнозируют неблагоприятное течение дисплазии в респираторном эпителии.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример 1. Больному Н. 49 лет проводилось бронхоскопическое исследование, по результатам которого поставлен диагноз эндобронхита. Взята биопсия для гистологического исследования и сделаны с нее мазки-отпечатки для цитологического исследования. При микроскопическом исследовании мазков-отпечатков отмечались комплексы клеток цилиндрического эпителия бронхов, утративших признаки дифференцировки. Форма клеток варьировала от округлой до полигональной. Ядерно-цитоплазматическое отношение было сдвинуто в сторону ядра. Ядра также варьировали по форме и размеру. Контур отдельных ядер - неровный, наблюдались признаки гиперхромии. Цитологически больному был поставлен диагноз дисплазии бронхиального эпителия II степени. Гистологическое исследование биопсийного материала данного пациента выявило пролиферацию базальных клеток, увеличение их размеров и утрату базальной ориентации. Отмечался ядерный полиморфизм. На основании вышеописанных изменений был поставлен диагноз дисплазии II степени.

Контрольное цитогистологическое исследование, проведенное этому больному через 6 месяцев, показало наличие незначительных признаков гиперплазии бронхиального эпителия. Диспластические изменения при этом отсутствовали. Т.е. у больного Н. наблюдался благоприятный исход дисплазии II степени.

Пример 2. Больному К. 53 лет проводилось бронхоскопическое исследование. Как и в случае 1, эндоскопически поставлен диагноз эндобронхита и взят материал для морфологического исследования. Цитогистологическое исследование выявило у пациента дисплазию бронхиального эпителия II степени. Кроме того, цитологически в исследуемых препаратах обнаруживались пласты клеток овальной формы, плотно прилегающие друг к другу. Ядра с ровными контурами, гранулированным хроматином. В гистологических препаратах отмечались многорядность эпителия, уплощение поверхностных клеток, часть которых располагалось горизонтально. Такая картина соответствует диффузной плоскоклеточной метаплазии. Таким образом, больному К. был поставлен морфологический диагноз: «диффузная плоскоклеточная метаплазия, дисплазия бронхиального эпителия II степени».

При контрольном морфологическом исследовании (через 6 месяцев) у больного по-прежнему сохранялась диффузная плоскоклеточная метаплазия, а дисплазия прогрессировала до III степени. Т.е. наличие у пациента плоскоклеточной метаплазии способствовало неблагоприятному течению диспластического процесса в респираторном эпителии.

Предлагаемым способом было обследовано 210 больных. У 193 пациентов наблюдалась дисплазия бронхиального эпителия различной степени тяжести. Кроме того, у 65 больных на фоне дисплазии были выявлены признаки плоскоклеточной метаплазии. Из 100 пациентов с неблагоприятным исходом дисплазии у 56 имелись признаки плоскоклеточной метаплазии. При благоприятном прогнозе (93 человека) плоскоклеточная метаплазия отмечалась только в 9 случаях (табл.1).

Лишь в 13,85% случаев сочетания плоскоклеточной метаплазии с дисплазией эпителия, исход патологического процесса был благоприятным (табл.1). В 86,17% - дисплазия либо прогрессировала до более тяжелой степени, либо перешла в рак в течение исследуемого периода времени (6 месяцев). При благоприятном исходе диспластического процесса преобладала очаговая плоскоклеточная метаплазия (12,31%), а неблагоприятном - диффузная (53,84% случаев). Следует отметить еще одну особенность. Во всех случаях благоприятного течения диспластического процесса, плоскоклеточная метаплазия не исчезла. Она сохранилась даже у пациентов, у которых в результате лечения полностью купировалась дисплазия эпителия I степени.

Таким образом, результаты проведенного нами исследования позволяют заключить, что наличие плоскоклеточной метаплазии при диспластическом процессе является неблагоприятным прогностическим признаком.

Таблица 1 
Прогноз течения диспластического процесса в респираторном эпителии в зависимости наличия или отсутствия плоскоклеточной метаплазии 
Группы Дисплазия Итого 
I степень II степень III степень 
1 2 1 2 1 2 1 2 
Без плоскоклеточной метаплазии 37 28 38 15 9 1 84 44 
С плоскоклеточной метаплазией 8 29 0 23 1 4 9 56 
Итого 45 57 38 38 10 5 93 100 
X2 11,92 32,98 7,35 46,29 
р 0,0006 0,0000 0,0067 0,0000 
Примечание: 1 - группа больных с благоприятным исходом диспластического процесса

2 - группа больных с неблагоприятным исходом диспластического процесса

х2 - критерий согласия

р - уровень значимости 


Литература

1. Агамова К.А., Гладунова З.Д., Сидорова Н.А. и др. Цитологические классификации дисплазий и рака легкого и желудка. М., 1995.

2. Болгова Л.С. // Клин. лаб. диагн. - 2001. - №1. - С.46-49.

3. Коган Е.А., Кодолова И.М. // Итоги науки и техники: Пат. анатомия. М., 1989. - Ч.1. - С.84-120.

4. Коган Е.А. // Вестник Рос. онк. научного центра им. Н.Н. Блохина РАМП. - 2003. - №1. - С.13-21.

5. Ольховская И.Г. // Арх. пат. - 1985. - №11. - С.20-25.

6. Панкова О.В., Черемисина О.В. // Сиб. онк. журнал. - 2003. - №4. - 9-11.

7. Патологоанатомическая диагностика опухолей человека. / Под ред. Н.А. Краевского. М., 1993. - T.1. - С.62-74.

8. Петрова А.С., Корякина Т.А., Лукина В.Т. и др. // Арх. пат. - 1985. - №11. - С.3-6.

9. Предраковые состояния. / Под ред. Р.Л. Картера. Пер. с англ. М., 1987. - С.185-206.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ прогнозирования течения диспластического процесса в респираторном эпителии путем гистологического исследования бронхобиоптатов и мазков-отпечатков с них, отличающийся тем, что определяют сочетание плоскоклеточной метаплазии с диспластическими изменениями и при наличии плоскоклеточной метаплазии на фоне диспластического процесса прогнозируют неблагоприятное течение дисплазии в респираторном эпителии.