СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ПРОЦЕССА

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ПРОЦЕССА


RU (11) 2289815 (13) C1

(51) МПК
G01N 33/50 (2006.01) 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 10.08.2007 - действует 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2006.12.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 2005126135/15 
(22) Дата подачи заявки: 2005.08.17 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2005.08.17 
(45) Опубликовано: 2006.12.20 
(56) Аналоги изобретения: RU 2241987 С2, 10.12.2004. RU 2210773 C1, 20.08.2003. WO 97035032 A1, 25.09.1997. БАЛАТЕНКО Н. В. Возможности иммуноцитохимии в дифференциальной цитогенетической диагностике рака щитовидной железы и его метастазов. Казанский медицинский журнал, 2000, т.81, №4, с.276-280. КАТО Н. et al. High expression of PRL-3 promotes cancer cell motility and
liver metastasis in human colorectal cancer: a predictive molecular marker of metachronous liver and lung metastases. Clin. Cancer. Res. 2004, 10(21), p.7318-728, PMID: 15534108, реф., [он-лайн], [найдено 23.05.2006], найдено из базы данных PubMed.

(72) Имя изобретателя: Непомнящая Евгения Марковна (RU); Горошинская Ирина Александровна (RU); Шапошников Александр Васильевич (RU); Шалашная Елена Владимировна (RU); Гусарев Сергей Александрович (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (RU); Непомнящая Евгения Марковна (RU); Горошинская Ирина Александровна (RU); Шапошников Александр Васильевич (RU); Шалашная Елена Владимировна (RU); Гусарев Сергей Александрович (RU) 
(98) Адрес для переписки: 344037, г.Ростов-на-Дону, 14 линия, 63, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт МЗ РФ Федерального агентства по ЗД и СР 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ПРОЦЕССА
Изобретение относится к медицине, а именно к биохимическим исследованиям в онкологии. У больных со злокачественным поражением печени определяют показатель интенсивности Н2O 2-люминолзависимой хемилюминесценции в гомогенатах ткани опухоли печени и ткани печени вне опухоли. При снижении показателя в гомогенате ткани опухоли более чем на 60% по сравнению со значением его в гомогенате ткани вне опухоли констатируют первичный рак печени. При его незначительном снижении, не превышающем 40%, констатируют метастаз в ткани печени. Использование способа позволяет повысить точность диагностики распространенности злокачественного процесса в ткани печени. 1 табл.




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к медицине, а именно к биохимическим исследованиям в онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики первичного рака печени и метастазов в ткани печени.

Известен "Способ прогнозирования развития метахронного рака молочной железы" (см. патент №2246284 Бюл. №5 опубл. 20 февраля 2005 г.). Сущность способа заключается в том, что в ткани злокачественной опухоли молочной железы и ее перифокальной зоне определяют активность фермента каталазы и рассчитывают соотношение активности фермента в ткани злокачественной опухоли к активности в перифокально расположенной ткани, при коэффициенте соотношения, равном 1,0±0,2, прогнозируют вероятность развития метахронного рака молочной железы.

Однако известный способ имеет недостатки, изменение уровня каталазы может быть сопряжено с рядом сопутствующих патологических процессов, поскольку не является специфическим анализом. Кроме того, не изучена возможность применения данного способа для прогнозирования распространенности злокачественного процесса в ткани печени.

Известен "Способ определения распространенности патологического процесса при онкологических заболеваниях" (см. патент №2241987 от 10.12.2004 г. Бюл. №34), выбранный нами в качестве прототипа. Способ отличается тем, что до начала противоопухолевого лечения у больных раком молочной железы III-IV стадий определяют в плазме крови интенсивность хемилюминесценции и активность церулоплазмина и при снижении соотношения интенсивности хемилюминесценции к активности церулоплазмина в 8-12 раз констатируют генерализацию опухолевого процесса, а при снижении данного показателя в 2-3 раза констатируют отсутствие генерализации опухолевого процесса.

Способ позволяет предсказать развитие метастазов до их клинической манифестации и своевременно принять лечебные меры. Однако при помощи данного способа в качестве материала для биохимических исследований используется плазма крови онкологических больных и не изучена возможность применения в качестве материала тканей злокачественных опухолей.

Целью изобретения является своевременное выявление степени распространенности злокачественного процесса в ткани печени, а именно дифференциальная диагностика первичного рака печени или метастазов в ткани печени.

Поставленная цель достигается тем, что в ткани злокачественной опухоли печени и ткани печени вне опухоли определяют интенсивность хемилюминесценции, и при снижении ее менее чем на 40% констатируют метастаз в ткани печени, а при снижении ее более чем на 60% констатируют первичный рак печени.

Изобретение "Способ определения распространенности злокачественного процесса" является новым, так как оно не известно из уровня медицины в области прогнозирования развития первичного рака печени или метастазов печени.

Новизна изобретения заключается в том, что в ткани печени вне опухоли и в ткани злокачественно пораженной печени определяют интенсивность хемилюминесценции. При снижении данного показателя более чем на 60% констатируют первичный рак печени, а при его незначительном снижении, не превышающем 40%, констатируют метастаз в ткани печени.

Перекись водорода - люминолзависимая хемилюминесценция - является одним из методов изучения перекисного окисления липидов (ПОЛ), позволяющий судить о содержании в системе супероксидного анион радикала (O2 ·) и гидроксильного радикала (ОН·), с которыми связаны начальные звенья ПОЛ, а также об интенсивности взаимодействия активных форм кислорода со свободными радикалами липидов, то есть о стадиях продолжения цепей свободнорадикальных реакций (см. Владимиров Ю.А. и соавт. Свободные радикалы в живых системах. Биофизика. Итоги НиТ ВИНИТИ АН СССР. М., 1991. Т.29. 252 с.). Согласно литературным данным по биохемилюминесценции тканей экспериментальных опухолей (саркома С-45, саркома Йенсена, карцинома Уокера), интенсивность их свечения ниже, чем нормальных тканей, и зависит от объема опухоли (см. Сидорик Е.П. и соавт. Биохемилюминесценция клеток при опухолевом росте. Киев, 1989. 220 с.).

Изобретение "Способ определения распространенности злокачественного процесса" является промышленно применимым, так как может быть использовано в здравоохранении, медицинских учреждениях различного профиля при диагностике и лечении злокачественных новообразований печени, в научно-исследовательских онкологических институтах и онкодиспансерах, поскольку оно просто в исполнении и не требует больших материальных затрат.

"Способ определения распространенности злокачественного процесса" выполняется следующим образом. В гомогенате ткани опухоли печени определяют светосумму хемилюминесценции в системе перекись водорода - люминол и по изменению данного показателя по сравнению со значением его в гомогенате ткани вне опухоли судят о распространенности патологического процесса, прогнозируя первичный рак печени при уменьшении показателя более чем на 60% и констатируя метастатическое поражение печени при уменьшении его менее чем на 40%. Исследование Н2О2-люминолзависимой ХЛ проводили по методу Шестакова В.А. и соавт. (см. Хемилюминесценция в плазме крови в присутствии перекиси водорода. Вопросы медицинской химии. 1979. Т.25. Вып.2. С.132-137). Величину светосуммы хемилюминесценции (в количестве фотонов, излученных за 6 секунд) регистрировали при 37°С и непрерывном перемешивании на хемилюминометре.

Полученные результаты представлены в таблице.

Таблица

Интенсивность хемилюминесцении в тканях первичного рака печени и метастазов печени 
Тип ткани Ткань печени вне опухоли (n=9) Ткань метастазов печени (n=9) Ткань первичного рака печени (n=8) 
Хемилюминесценция (имп/6 сек) 29274,4±2979,7 17741,7±1754,1 р<0,01 9506,5±655,5 р<0,01 p 1<0,05 
Примечание: р - достоверно относительно значений в ткани печени вне опухоли;

p1 - достоверно относительно значений в ткани метастазов печени. 


Примеры конкретного выполнения "Способа определения распространенности злокачественного процесса".

Пример №1

Больная Г., 52 лет (история болезни №2396/Ф). Жалобы на боли в правом подреберье.

Сонографически при исследовании печени (исл. №722) обнаружено:

контуры неровные, нечеткие, размер правой доли 19 см, левой - 11,5 см, увеличены. Паренхима - эхо-структура диффузно-неоднородная, эхогенность не изменена. Очаговые изменения определяются. В правой доле объемные образования смешанной эхо-плотности: 16,3×16 см, 4×3,7 см, 2×2,2 см, 2×1,4 см сосудистый рисунок не изменен. Заключение: Гепатомегалия. Образования правой доли печени. Хронический холецистит.

16.02.05 выполнена операция - расширенная гемигепатэктомия справа с резекцией IV сегмента левой доли.

По результатам гистологического анализа №785765-772 - гепатоцеллюлярный рак.

Биохимическое исследование показало, что светосумма хемилюминесценции ткани печени вне опухоли составляла 29025 имп/6 сек, ткани опухоли печени - 8851 имп/6 сек, т.е. уменьшение показателя составило 70% и позволяло предположить первичный рак печени.

Пример №2

Больной К., 75 лет (протокол вскрытия №461 от 23.11.2004 г.).

В анамнезе: в 2003 г. оперирован по поводу рака сигмовидной кишки (резекция сигмы). В послеоперационном периоде - курс химиотерапии. При поступлении - симптомы кишечной непроходимости.

21.11.2004 г. по жизненным показаниям выполнена лапаротомия. Диагностирован рецидив рака сигмы с явлениями эндотоксикоза. При ревизии брюшной полости: карциноматоз, множественные метастазы в печени, большом сальнике; 2 литра асцитической жидкости. Петли кишечника на протяжении 2 метров от связки Трейца раздуты. В правой подвздошной области конгломерат метастазов, фиксированный на петле подвздошной кишки, сдавливающий ее просвет. В связи с тяжелым состоянием решено выполнить илеотрансверзоанастомоз. В это время произошла остановка сердца. Реанимационные мероприятия без эффекта.

Патологоанатомический диагноз

Основное заболевание: рак сигмовидной кишки. Резекция опухоли с наложением толсто-толстокишечного анастомоза в 2003 г. Рецидив рака с образованием опухолевого узла 12 см в диаметре в области анастомоза. Карциноматоз брюшины. Множественные обширные метастазы в печень. Осложнения. Асцит (2 литра). Дилятация нисходящей толстой кишки. Кахексия.

При биохимическом исследовании ткани печени было выявлено, что интенсивность хемилюминесценции ткани печени вне опухоли составляла 26679 имп/ 6 сек, ткани опухоли печени - 21012 имп/ 6 сек, т.е. уменьшение значения показателя составило 21% и прогнозировало метастатическое поражение печени.

Технико-экономическая эффективность "Способа определения распространенности злокачественного процесса" заключается в том, что использование способа повышает качество диагностики распространенности злокачественного процесса в ткани печени. Принять меры для лечения, проводить объективный контроль течения онкологического заболевания, планировать тактику лечения и улучшать качество жизни больных. Проведение биохимических исследований просто по исполнению, занимает мало времени, доступно, не требует больших материальных затрат на препараты и дорогостоящей аппаратуры.




ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ определения распространенности злокачественного процесса, включающий биохимическое исследование, отличающийся тем, что у больных со злокачественным поражением печени определяют показатель интенсивности Н2О2-люминолзависимой хемилюминесценции в гомогенатах ткани опухоли печени и ткани печени вне опухоли, и при снижении показателя в гомогенате ткани опухоли более чем на 60% по сравнению со значением его в гомогенате ткани вне опухоли констатируют первичный рак печени, а при его незначительном снижении, не превышающем 40%, констатируют метастаз в ткани печени.