СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ФИБРОАДЕНОМЫ И РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ФИБРОАДЕНОМЫ И РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ


RU (11) 2092843 (13) C1

(51) 6 G01N33/48 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 10.08.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(14) Дата публикации: 1997.10.10 
(21) Регистрационный номер заявки: 94027269/14 
(22) Дата подачи заявки: 1994.07.18 
(45) Опубликовано: 1997.10.10 
(56) Аналоги изобретения: Нейштадт Э.Л. Возможности использования морфологических критериев в определении вероятности заболевания раком молочной железы. Автореферат дис. на соиск. уч. степ. докт. мед. наук. - Санкт-Петербург: 1991, с.44. 
(71) Имя заявителя: Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей 
(72) Имя изобретателя: Козлов Д.В. 
(73) Имя патентообладателя: Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей 

(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ФИБРОАДЕНОМЫ И РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 

Использование: в области медицины, в частности в онкологии. Сущность изобретения: морфометрически в гистологических срезах опухоли определяют количество паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, локализованных периартериолярно, и при числе паренхиматозных клеток, равном или менее 18,671,96, числе фибробластов, равном или более 11,910,81, числе фиброцитов, равном или более 14,001,07, диагностируют фиброаденому, а при числе паренхиматозных клеток, равном или более 44,626,56, числе фибробластов, равном или менее 8,320,61, числе фиброцитов, равном или менее 8,650,72, диагностируют рак молочной железы. Способ позволяет повысить точность диагностики в гистологических срезах фиброаденомы и рака молочной железы. 3 табл. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии.

Известен способ дифференциации диагностики доброкачественных (или внешне доброкачественных) опухолей и рака молочной железы в гистологических срезах окрашенных гематоксилином и эозином. Одним из процессов, относимых экспертами ВОЗ в группу доброкачественных опухолей молочных желез является фиброаденома (Гистологическая классификация опухолей молочной железы. 2-е изд. ВОЗ: Женева, 1984, 30 с.). Способ основан на микроскопическом выявлении узловатого образования в железе, в котором от размеров и формы железистых трубок и характера расположения соединительной ткани, можно в одних случаях выделять периканаликулярную, в других интраканаликулярную фиброаденому (Ласкина А.В. Опухоли молочной железы. В кн. Руководство по патологоанатомической диагностике опухолей человека. Изд. 2-е/Под ред. Н.А. Краевского, А. В. Смольянникова. М. Медицина, 1976, с. 191-211).

Недостатком способа является отсутствие однозначных патогистологических критериев, отличающих доброкачественные от начальных форм малигнизации фиброаденом, то есть от минимального рака молочной железы, в который в 5% от общего числа трансформируются фиброаденомы молочной железы (Ермилова В.Д. Опухоли молочной железы. В кн. Руководство по патологоанатомической диагностике опухолей человека (Под ред. Н.А. Краевского, А.В. Смольянникова, Д.С. Саркисова. 3-е изд. М. Медицина, 1982, с. 210-232). Наиболее достоверным признаком в таких случаях является инвазивный рост (Головин Д.И. Ошибки и трудности гистологической диагностики опухолей: Руководство для врачей. Л. Медицина, 1982, с. 304), что знаменует собой уже инвазивную, или диссеминированную форму заболевания.

Известен способ, выбранный в качестве прототипа, морфометрического исследования, повышающего информативность патогистологического исследования. Например, в качестве критерия дифференциальной диагностики опухолей предлагается обращать внимание на содержание ДНК ядер клеток. Наличие эпителиальных клеток с повышенным более 4 раз против нормы содержания ДНК повышает вероятность заболеть раком молочной железы в 9,1 раза (Нейштадт Э.Л. Возможности использования морфологических критериев в определении вероятности заболевания раком молочной железы. Автореф. дисс. д.м.н. Санкт-Петербург, 1991, с. 44). Недостатком способа, а именно критериев, является учет лишь паренхиматозного компонента опухоли, тогда как известно, что в развитии рака принимают участие и паренхима и строма с ее сосудами (Баженов С.М. Особенности паренхиматозно-стромальных и иммунологических взаимоотношений при раке молочной железы I-II стадии: Автореф. дисс. к.м.н. Вильнюс,1989, с. 15).

Задача предлагаемого способа заключается в разработке гистометрии паренхиматозных и стромальных компонентов опухолей молочной железы с одновременным повышением точности диагностики и дифференциальной диагностики их. Поставленная задача достигается тем, что после просмотра гистопрепарата, окрашенного рутинными методами окраски, с помощью количественной микроскопии определяют число опухолевых (паренхиматозных) клеток, а также фибробластов и фиброцитов, расположенных вокруг артериолы и при числе паренхиматозных клеток вокруг артериолы и при числе паренхиматозных клеток, равном или менее 18,671,96, числе фибробластов, равном или более 11,910,81, число фиброцитов, равном или более 14,001,07, диагностируют фиброаденому, а при числе паренхиматозных клеток, равном или более 44,626,56, числе фибробластов, равном или менее 8,320,61, числе фиброцитов, равном или менее 8,650,72, диагностируют рак молочной железы.

Основанием для предлагаемого способа являются результаты проведенного нами исследования на репрезентативном материале, показавшем статистически достоверные в высокой степени (при р <0,001) различия числа отмеченных выше клеток в сравниваемых группах фиброаденом и раков молочной железы. Величины показателей приведены в табл.1. Полученные цифровые значения апробированы в диагностике и дифференциальной диагностике опухолей молочной железы, осуществляемые в клинической практике и показавшими высокую их результативность.

Сущность предлагаемого способа заключается в следующем. Стереометрические методы основаны на принципе Delesse, согласно которому доля площади гистологического среза, приходящаяся на поперечных сечениях исследуемых компонентов, равнозначна части их объема во всем объекте. Показано, что число частиц в объеме ткани может быть определено по среднему их числу в единице площади гистологического среза.

Подсчет клеток осуществляют с помощью окулярной измерительной сетки, согласно методике ее автора (Автандилов Г.Г./Арх. пат. 1972, т. 34, вып.6, с. 76-77) в 10 полях зрения при увеличении 900х, то есть окуляр- 10 и объектив масляная иммерсия 90, вокруг артериолы, находящейся в срезе своим продольным сечением. Подсчитываемые в полях зрения клетки, совпадавшие с тест-точками большого квадрата окулярной измерительной сетки, протоколируют, затем подсчитывают общее число тех или других клеток в 10 полях зрения. Суммарный показатель сравнивается со среднестатистическим показателем, приведенным в табл. 1. Сравнение полученного и разработанного показателей позволяет уточнить представление о принадлежности опухолевого процесса в молочной железе либо к группе доброкачественных заболеваний, либо к злокачественному новообразованию. Использование способа повышает точность диагностики фиброаденомы и рака молочной железы, а также облегчает дифференциальную их диагностику.

Пример 1.

Количественная микроскопия паренхиматозных (опухолевых) клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы в ткани опухоли молочной железы больной К-ой, 28 лет.

Во время микроскопии гистологического препарата опухоли молочной железы выбирают артериолу, располагающую непосредственно в опухолевой ткани и имеющую срез по ее длиннику. Подсчитывают количество паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, расположенных вокруг данной артериолы. Подсчет клеток осуществляется с помощью морфометрической сетки, изготовленной по прописи ее автора (Автандилов Г.Г./Арх. пат. 1972, т. 34, вып. 6, с. 76-77), и вставленной в корпус окуляра микроскопа. Результаты гистометрии клеточных образований 10 полей зрения при увеличении 900х (окуляр-10, объектив - масляная иммерсия 90) протоколируют (табл.2).

Сравнение суммарных показателей количества паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы опухоли молочной железы со среднестатистическими величинами показателя (табл. 1), позволяет утверждать, что данная опухоль молочной железы имеет характеристики фиброаденом.

Пример 2.

Гистометрия паренхиматозных (опухолевых) клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы в ткани опухоли молочной железы больной В-ой, 67 лет.

При микроскопическом исследовании гистологического препарата окрашенного гематоксилином и зозином проводят гистометрию паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы. Последняя располагается непосредственно посреди опухолевой ткани и в поле зрения находится своим продольным срезом. С помощью окулярной морфометрической сетки определяют число совпавших с тест-точками сетки клеток микроокружения. Подсчет ведут в 10 полях зрения при увеличении 900х (окуляр-10, объектив-масляная иммерсия 90) и сравнивают суммарное их количество со среднестатистическими показателями количества паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов (табл. 1). Результаты гистометрии клеток протоколируют (табл.3).

Суммарное количество паренхиматозных клеток оказалось равным 97, а среднестатистический показатель количества паренхиматозных клеток вокруг артериолы равен (табл. 1) для фиброаденомы 18,761,96 и для рака молочной железы 44,626,56. Полученное в результате гистометрии число паренхиматозных клеток больше среднестатистического показателя, соответствующего раку молочной железы. Сравнение количеств посчитанных фибробластов и фиброцитов с табличными данными показало, что они меньше среднестатистических показателей, соответствующих раку молочной железы. Таким образом, результаты гистометрии позволяют квалифицировать исследуемую опухоль молочной железы как злокачественное новообразование.

В заключение можно отметить, что предлагаемый способ позволяет повысить точность диагностики и дифференциальной диагностики в гистологических срезах фиброаденом и рака молочной железы, представляющих наиболее частую современную онкопатологию женщин. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Способ дифференциальной диагностики фиброаденомы и рака молочной железы, включающий гистометрию тканевых структур, отличающийся тем, что морфометрически в гистологических срезах опухоли определяют количество паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, локализованных периартериолярно, и при числе паренхиматозных клеток, равном или менее 18,67 1,96, числа фибробластов, равном или более 11,91 0,81, числа фиброцитов, равном или более 14,00 1,07, диагностируют фиброаденому, а при числе паренхиматозных клеток, равном или более 44,62 6,56, числе фибробластов, равном или менее 8,32 0,61, числе фиброцитов, равном или менее 8,65 0,72, диагностируют рак молочной железы.