СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ


RU (11) 2281795 (13) C2

(51) МПК
A61N 5/06 (2006.01) 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 10.08.2007 - может прекратить свое действие 

--------------------------------------------------------------------------------

Документ: В формате PDF 
(14) Дата публикации: 2006.08.20 
(21) Регистрационный номер заявки: 2004116480/14 
(22) Дата подачи заявки: 2004.05.31 
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.05.31 
(43) Дата публикации заявки: 2000.01.01 
(45) Опубликовано: 2006.08.20 
(56) Аналоги изобретения: ШЕЙКО Е.Л. Влияние низкоинтенсивного лазерного облучения на величину противоопухолевого эффекта// «Высокие технологии в онкологии», Казань, 2000, т.1, с.236-237. RU 2210406 C1 20.08.2003. ГИЛЕВА М.А. Клиническая картина и оценка эффективности комплексного лечения химиотерапевтических поражений слизистой оболочки полости рта у детей с острым лимфобластозным лейкозом. Автореферат диссертации, Пермь, 2002,с. 8-9. 
(72) Имя изобретателя: Шейко Елена Александровна (RU); Шихлярова Алла Ивановна (RU); Жукова Галина Витальевна (RU); Пшеничная Наталья Константиновна (RU); Куркина Татьяна Анатольевна (RU); Капкина Наталья Николаевна (RU); Поушкова Светлана Валерьевна (RU); Алаухова Анна Анатольевна (RU); Мащенко Наталья Михайловна (RU); Торпуджян Изабелла Саркисовна (RU) 
(73) Имя патентообладателя: Ростовский научно-исследовательский онкологический институт МЗ РФ (RU); Шейко Елена Александровна (RU); Шихлярова Алла Ивановна (RU); Жукова Галина Витальевна (RU); Пшеничная Наталья Константиновна (RU); Куркина Татьяна Анатольевна (RU); Капкина Наталья Николаевна (RU); Поушкова Светлана Валерьевна (RU); Алаухова Анна Анатольевна (RU); Мащенко Наталья Михайловна (RU); Торпуджян Изабелла Саркисовна (RU) 
(98) Адрес для переписки: 344037, г.Ростов-на-Дону, 14 линия, 63, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт МЗ РФ 

(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии. Во время проведения курса химиотерапии циклофосфаном и после него осуществляют чрескожно на область бедренной вены воздействие красным некогерентным светом =0,67 мкм. Максимальная мощность излучения 48 мВт. Максимальная плотность потока мощности 7,5 мВт/см2, в непрерывном режиме. Длительность экспозиции до трех минут. Способ позволяет повысить противоопухолевую активность циклофосфана, ослабить его повреждающее действие, предупредить развитие метастазов, стойкой лейкопении, выраженной интоксикации. 3 табл.




ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ


Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано в эксперименте в комплексном лечении злокачественных новообразований перевивных опухолей для повышения эффективности цитостатиков, а также предупреждения развития выраженной интоксикации, снижения уровня неспецифической противоопухолевой резистентности и иммунодепрессии.

Естественным источником светового излучения на Земле является Солнце. Еще в далекой древности широко использовалась гелиотерапия. В настоящее время можно говорить о возрождении и прогрессе такого направления, как светолечение, фотохромотерапии.

Известно, что электромагнитные колебания оптического диапазона, в том числе красного спектра, способны вызывать в живом организме развитие однотипных местных и системных компенсаторно-приспособительных процессов (см. Миненков А.А. Низкоэнергетическое лазерное излучение красного и инфракрасного диапазона и его использование в сочетанных методах физиотерапии. Автореф. диссерт. на соиск. докт. мед. наук, И., 1989).

Эти воздействия обладают стимулирующим эффектом на иммунные механизмы и фагоцитарную реакцию клеточных ретикулоэндотелиальных клеток, оказывают противовоспалительное действие. Однако в этой работе не было изучено действие красного некогерентного (т.е. нелазерного) светового излучения в условиях опухолевого роста и химиотерапии. Поэтому актуальным остается вопрос о разработке методик, позволяющих оптимизировать эффективность комбинированного противоопухолевого лечения с помощью воздействий светом, при этом не вызывая стимуляции роста самой опухоли.

Известен способ чрескожного облучения крови (Карандашов В.И., Зродников В.С, Петухов Е.Б. /Патент РФ №2155618. - Бюл. №25. - 2000), взятый в качестве прототипа. Однако этот способ имеет ряд значительных ограничений и недостатков. При осуществлении этого способа использовали лазерное облучение с =0,98 мкм, подаваемое в импульсном режиме чрескожно на сонную артерию или кубитальную вену. К недостаткам способа следует отнести недостаточную противоопухолевую эффективность, выраженную интоксикацию, лейкопению.

Целью изобретения является повышения противоопухолевой эффективности цитостатиков, ослабление их повреждающего действия, предупреждения развития метастазов, стойкой лейкопении, выраженной интоксикации.

Поставленная цель достигается тем, что на область бедренной вены животных с перевивной лимфосаркомой Плисса во время проведения курса химиотерапии циклофосфаном и после него осуществляют воздействие светового излучения красного диапазона спектра с =0,67 мкм. Воздействие осуществляют лабильной бесконтактной методикой. Для получения красного света был использован лазерно-светодиодный физиотерапевтический аппарат «Спектр-ЛЦ», назначение которого - осуществление лазерной и селективной светодиодной фотохромотерапии (ФХТ). Воздействие выполнялось с помощью светодиода красного света с =0,67 мкм. Максимальная мощность излучения 48 мВт, максимальная плотность потока мощности (ППМ)=7,5 млВт/см2. Излучение подавалось в непрерывном режиме. Продолжительность одной процедуры до трех минут. Всего проводили 8 процедур, ежедневно утром в одни и те же часы.

Изобретение «Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте», является новым, так как не известен такой способ при повышении эффективности лечения опухолей цитостатиками в комплексе с воздействием ФХТ красного диапазона спектра.

Сопоставительный анализ заявленного решения с прототипом показывает, что заявленный способ отличается от известного тем, что в условиях эксперимента на опухолевых животных осуществляют воздействие красным некогерентным светом чрескожно на область бедренной вены. Воздействие выполнялось с помощью светодиода красного света с =0,67 мкм. Максимальная мощность излучения 48 мВт, максимальная плотность потока мощности (ППМ)=7,5 млВт/см2. Излучение подавалось в непрерывном режиме. Продолжительность одной процедуры до трех минут. Всего проводили 8 процедур, ежедневно утром в одни и те же часы.

Таким образом, заявленный способ соответствует критерию изобретения «Новизна».

Изобретение «Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте», является промышленно применимым, так как может быть использовано в здравоохранении, в научно-исследовательских институтах, при экспериментальных и клинических исследованиях возможностей ФХТ в комплексном противоопухолевом лечении.

Изобретение «Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте» выполняется следующим образом.

Для получения светодиодного излучения (СДИ) красного света был использован лазерно-светодиодный физиотерапевтический аппарат «Спектр-ЛЦ», назначение которого - осуществление лазерной и селективной светодиодной фотохромотерапии (ФХТ). Воздействие СДИ выполнялось с помощью светодиода красного света с =0,67 мкм. Максимальная мощность излучения 48 мВт, максимальная плотность потока мощности (ППМ)=7,5 млВТ/см2. Воздействие осуществляют лабильной бесконтактной методикой. Излучение подавалось в непрерывном режиме на область бедренной вены. Продолжительность одной процедуры до трех минут. Всего проводили 8 процедур, ежедневно утром в одни и те же часы. Воздействие СДИ проводили параллельно с курсом химиотерапии. В качестве химиопрепарата использовали циклофосфан в дозе 50 мг/кг, введенный дважды внутрибрюшинно с интервалом три дня. Часть животных (половину из каждой группы) забивали на девятые сутки, у них тестировали уровень неспецифической противоопухолевой резистентности, определяли тип неспецифических адаптационных реакций (Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Кузьменко Т.С., Шихлярова А.И. Антистрессорные реакции и активационная терапия, Екатеринбург, 2003, 336 с.). Определяли абсолютное число лейкоцитов в 1 мл3. Остальных животных наблюдали в течение четырех месяцев. Оценивали противоопухолевый эффект: определяли динамику роста опухолей по показателям ее объемов и среднего большего диаметра. Распределение значений объемов опухолей в результате построения полигона частот характеризовалось тремя основными группами числовых значений, соответствующих гауссовскому распределению, что позволило условно разграничить ранги эффектов торможения, роста и регрессии опухоли. У этих животных изучали продолжительность сроков жизни, фиксировали наличие или отсутствие метастазов на момент смерти.

Первую группу составили интактные животные (п=20). Всем остальным животным была перевита лимфосаркома Плисса в количестве 19×107 в мл. Во второй группе животным был введен циклофосфан (п=40). В третьей группе наблюдались животные, которым параллельно с циклофосфаном был проведен курс ФХТ (п=40). В четвертой группе были животные с ФХТ (п=40). Пятую группу составили животные с ростом опухоли без воздействия (п=40).

Данные проведенных экспериментов свидетельствовали, что действие СДИ в исследуемом режиме оказывает влияние на динамику опухолевого роста, отображением чего является значение объемов опухолей в различные сроки наблюдений (Таблицы 1 и 2).

Как следует из таблицы, исходный объем опухоли до начало всех воздействий (Fo) контрольной и опытных групп достоверно не отличался. На следующих этапах наблюдений (F1-F6) рост опухоли в контроле превышал рост всех опытных групп (табл.1). В последующий период эта тенденция сохранилась, темпы увеличения объемов опухолей в опытных группах заметно отставали от контроля, характеризуя торможения роста лимфосаркомы. К концу наблюдения были выявлены достоверные отличия, между показателями объемов опухоли, удельной скорости роста, наличием метастазов и продолжительности сроков жизни (табл.2).

О влиянии СДИ свидетельствовали также данные, полученные после распределения конечных объемов опухолей в соответствии с условными рангами, характеризующими рост опухоли (V более 5 см3 ), торможение роста (V менее 5 см3), регрессию опухоли (V более 1 см3). Таблица 2. Продолжительность сроков жизни животных, оставшихся для наблюдения превышала - во второй группе (введение циклофосфана) на 19±2 дней, в третьей группе (циклофосфан+СДИ) на 75±1,5, в четвертой группе (СДИ) на 6±2 дней сроки жизни контрольных животных с ростом опухоли (табл.2).

Оценка неспецифических адаптационных реакций у животных всех групп позволяло прийти к следующим обобщениям (табл.3). Так в контроле и в группе 2 масса тимуса была достоверно ниже, чем в остальных группах. Коэффициенты соотношения массы тимуса и надпочечников, косвенно отражающие уровень сбалансированности двух важных подсистем организма, иммунной и эндокринной, были также самыми низкими и достоверно не отличающимися друг от друга в этих группах. В группах 3 и 4 эти коэффициенты были значительно выше, но по значениям отличались от таковых в контроле (табл.3). Количество лейкоцитов в периферической крови было самым высоким (достоверно выше контроля) в группах 3 и 4, а самым низким во 2 группе, % содержания лимфоцитов, также был высок в группах 3 и 4 и низок во 2 и 5 группах. Отмечали выраженное наличие кровоизлияний в желудочно-кишечном тракте во 2 и 5 группах, у части животных 3 и 4 групп кровоизлияния носили точечный характер и были менее выражены (табл.3).

Описанные изменения свидетельствовали о глубоких нарушениях гомеостатических процессов при росте опухоли и выраженном токсическом эффекте циклофосфана (2 группа), в то же время при проведении ФХТ было отмечено менее выраженное напряжение адаптивных механизмов, у животных 3 и 4 групп тестировались неспецифические адаптационные реакции антистрессорного типа.

Таким образом, мы можем прийти к заключению, что ФХТ с помощью воздействия красным светом повышает противоопухолевую эффективность циклофосфана, способствует ослаблению его повреждающего действия, предупреждения развития метастазов, стойкой лейкопении, выраженной интоксикации за счет формирования антистрессорных адаптационных реакций.

Технико-экономическая эффективность «Способа лечения злокачественных новообразований в эксперименте» заключается в более выраженном повышении неспецифической противоопухолевой резистентности, снижении метастазирования, активации антистрессных механизмов и улучшении состояния животных после введения цитостатика.

Таблица 1

Значение объемов опухолей (V см3) на различных этапах роста (F) под влиянием ФХТ. 
Сроки наблюдения в сутках 2 группа п=10 3 группа п=10 4 группа п=10 5 группа п=10 
F0 До начала опыта 0.34±0.1 0.3±0.2 0.32±0.1 0.31±0.2 
F1 На 2 сутки 2.31±0.563 1.27±0.13* 2,4 2.65±0.66 3.75±0.383 
F2 На 4 сутки 5.30±2.7*3,4 1.78±0.32*4,2 8.64±0.87*3,2 14.29±1.623,4,2 
F3 На 6 сутки 7.21±1.28*3,4 2.42±0.4*4,2 18.17±1.123,2 21.49±2.853,2 
F4 На 8 сутки 10.74±1.85*3,4 6.01±0.38*4,2 24.44±0.95*3,2 34.11±3.233,4,2 
F5 На 10 сутки 23.28±3.7* 3,4 9.23±1.72* 4,2 40.18±1.43* 3,2 49.73±3.87 3,2 
F6 На 12 сутки 31.98±3.7* 3,4 17.40±2.34* 4,2 58.25±2.11* 3,2 84.69±4.11 3,4,2 
Примечание: * достоверно по отношению к группе 5 (Р<0,05), 2 достоверно по отношению к группе 2 (Р<0,05), 3 достоверно по отношению к группе 3,(Р<0,05), 4 достоверно по отношению к группе 4 (Р<0,05) 
Таблица 2

Сравнение численных значений параметра роста лимфосаркомы Плисса и продолжительности жизни животных при разных вариантах опыта. 
Параметры 2 группа п=10 3 группа п=10 4 группа п=10 5 группа п=10 
Средний диаметр опухоли до воздействия, см 0.8±0.12 0.68±0,11 0.78±01 0.8±0.1 
Средний диаметр опухоли в конце опыта, см 3.2±0.683 1.6±0.75*2,4 3.8±0.763 4.2±0.81 2,3 
Удельная скорость роста опухоли, сут 0.38±0.2* 3,4 0.18±0.1* 2,4 0.68±0.3* 2,3 0.8±0.22,3,4 
Объем опухоли в конце наблюдения 58±3.4* 3,4 29.3±2.1* 2,4 98.6±2.1* 2,3 108.11±6. 2,3,4 
Рост опухоли, % 45 20 60 94 
Торможение роста, % 50 60 40 6 
Регрессия опухоли, % 5 20 0 0 
Наличие метастазов на момент смерти Есть Не обнаружено Не обнаружено Есть 
Продолжительность жизни крыс, в сут 40±4*2,4 96±7*2,4 27±3.53,2 21±3 3,2 
Примечание: * достоверно по отношению к группе 5 (Р<0,05), 2 достоверно по отношению к группе 2 (Р<0,05), 3 достоверно по отношению к группе 3 (Р<0,05), 4 достоверно по отношению к группе 4 (Р<0,05) 


Таблица 3

Показатели неспецифических адаптационных реакций. 
Показатели 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 5 группа 
Масса тимуса на 100 массы животных, мг 150±2,1 2,4* 53.4±3.4 1,3,4 139.8±17,4 1,2,3* 211.1±13,3 1,2,3* 87,8±3.1 1,3,4 
Масса надпочечника на 100 г массы животного, мг 22,4±2.7 2,3,4* 36,7±2,3 3,1,4* 30.7±1.3 1,4* 46,3±1,7 1,2,3 53,38±3.8 1,3,2 
Коэффициент отношения массы тимуса к массе надпочечника, у.е. 6.72,3,4* 1.5 1,3,4 4.62,1* 4.62,1* 1.61,3,4 
Кровоизлияния в желудке и кишечнике нет есть частично Частично Есть 
Лимфоциты периферической крови, % 65±0.8 2,3* 31.3±3.3 3,1,4* 78.4±1.3 1,2,4* 62.8±4.7 2,3* 57.7±1.7 1,2,3,4 
Число лейкоцитов в 1 мл3 периферической крови 11883±1022,3,4* 6005±1303,1,4* 16350±1501,2* 16280±1351,2* 8906±1501,2,3 
Примечание: * достоверно по отношению к группе 5 (Р<0,05), 1 достоверно по отношению к группе 1 (Р<0,05), 2 достоверно по отношению к группе 2 (Р0,05), 3 достоверно по отношению к группе 3 (Р<0,05), 4 достоверно по отношению к группе 4 (Р<0,05) 





ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ


Способ лечения экспериментальных животных с лимфосаркомой Плисса, включающий химиотерапевтическое лечение и световое воздействие, отличающийся тем, что во время проведения курса химиотерапии циклофосфаном и после него осуществляют чрескожно на область бедренной вены воздействие красным некогерентным светом =0,67 мкм, максимальная мощность излучения 48 мВт, максимальная плотность потока мощности 7,5 мВт/см2, в непрерывном режиме, длительность экспозиции до 3 мин.