Способ биологической оценки токсичности морской среды относится к биологическим способам оценки экологического риска и анализа загрязнения водной среды и может быть использован в марикультуре, водной токсикологии, рыбоводстве. В способе в качестве биологических тест-объектов используются личинки черноморских рыб атерины (Atherina hepsetus, Atherina mochon pontica), которые помещаются в тестируемую среду и в стерилизованную морскую воду. Контролем служит тестируемая среда и стерилизованная...
ИЗОБРЕТЕНИЕ Заявка на изобретение RU2014119096/15, 13.05.2014
ИЗОБРЕТЕНИЕ Патент Российской Федерации RU2569354
Область деятельности(техники), к которой относится описываемое изобретение
Изобретение относится к области биологии, а именно к области экологической оценки окружающей среды биологическими методами, и может быть использовано в определении состояния водоема как целостной экосистемы.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Известен (RU, патент 2213350, опубл. 2003) способ биоиндикации среды, включающий выбор группы индикаторов, формирование эталонной среды с разбивкой ее по классам качества, определение видов индикаторов, способных существовать в диапазоне классов качества эталонной среды, извлечение из среды всех возможных видов из группы индикаторов, установление по каждому классу качества среды видов индикаторов, способных существовать в диапазоне классов качества эталонной среды, и определение класса качества среды по максимальному значению суммарной классовой значимости индикаторов, причем осуществляют оценку возможности самоочищения среды путем дополнительных извлечений индикаторов из среды и определений суммарной классовой значимости индикаторов до момента расположения максимального значения суммарной классовой значимости и наибольшего после него значения в соседних областях классности качества среды, а о возможности самоочищения судят при расположении наибольшего значения относительно максимального в области понижения классности среды.
Недостатком известного способа следует признать невозможность применения его для оценки собственно экосистемы водоема.
Известен (RU, патент 2361207, опубл. 2009) способ биологического мониторинга водной среды на основе регистрации положения створок раковин двухстворчатых раковинных моллюсков, включающий закрепление на створках раковины каждого моллюска датчика положения створок, размещение моллюсков с датчиками положения створок в контролируемой воде, формирование датчиками электрических сигналов положения створок, преобразование их в цифровые коды, ввод цифровых кодов в компьютер, сравнение компьютером введенных цифровых кодов с пороговым значением, соответствующим значению электрического сигнала при закрытых створках раковины моллюска, определение количества моллюсков, закрывших створки раковин, по результатам сравнения цифровых кодов с пороговым значением и принятие решения о загрязнении контролируемой воды при превышении количеством моллюсков, закрывших створки раковин, порогового значения, причем для формирования электрического сигнала положения створок каждого моллюска формируют оптическое излучение, пропускают его по оптическому волокну линии передачи, один из участков которого выполнен в виде петли оптического волокна и установлен на закрепленном на одной створке раковины моллюска основании датчика с упором одной стороной петли оптического волокна в дно паза, выполненного в основании датчика, с возможностью механического взаимодействия другой стороны петли оптического волокна с элементом воздействия на чувствительный элемент, установленным на другой створке раковины моллюска, и с возможностью деформации формы петли оптического волокна в ее плоскости в результате механического взаимодействия петли оптического волокна с элементом воздействия на чувствительный элемент и дном паза основания датчика, преобразуют оптическое излучение, прошедшее по оптическому волокну линии передачи, в электрический сигнал положения створок с помощью приемника оптического излучения, установленного с возможностью оптического контакта с выходным торцом оптического волокна линии передачи, и определяют количество моллюсков, закрывших створки раковин, по количеству цифровых кодов, не превысивших пороговое значение.
Недостатком известного способа следует признать его сложность и малую пригодность для применения в условиях естественного водоема. Известный способ более применим для определения токсичности различных материалов в лаборатории.
Известен (Ильяшук Б.П., Ильяшук Е.А., Даувальтер В.А., Каган Л.Я. Закономерности развития экологического кризиса в гидроэкосистеме, подверженной многолетнему влиянию загрязняющих веществ горно-металлургического производства. - Институт проблем промышленной экологии Севера, Кольский НЦ РАН, г.Апатиты. http://www.kolasc.net.ru/mssian/innovation/ksc70.html) способ биомониторинга загрязнения природных водоемов веществами горно-металлургического производства путем регистрации морфологических изменений у хирономид. Способ основан на наблюдениях за хирономидами из природного водоема. Обнаружено, что при значительном загрязнении водоемов появляются хирономиды с морфологическими изменениями, выражающимися в деформации элементов ротового аппарата, в частности субментума.
rnrnrnrnrnrnrnrnrn
Недостатком данного способа является отсутствие критериев оценки токсичности и мутагенности по анализируемым признакам.
Известен (RU, патент 2491546, опубл. 2013) способ оценки генотоксической активности водных сред, включающий приготовление опытных проб, получение синхронизированной культуры дафний от одного наиболее плодовитого клона из популяции дафнии, за исключением лабораторной популяции, экспонирование одновозрастных, партеногенетических дафний из синхронизированной культуры параллельно в исследуемом растворе (опыт), в воде (К - контроль), в растворе эталонного токсиканта (Кт+), в растворе и эталонного мутагена (К м+), регистрацию физиологического состояния у особей исходного поколения (F0), определение коэффициентов токсичности, а именно коэффициента гибели (L0) и коэффициента плодовитости (Р0), регистрацию физиологического состояния дафний второго поколения (F2), определение суммарной мутагенной активности расчетным путем, сравнение ее значения с изоэффективными концентрациями эталонных мутагенов и токсикантов, выделение лимитирующего показателя вредности, установление уровня генотоксической активности на основании полученных результатов.
Недостатком известного способа следует признать его сложность и длительность.
Известен (RU, патент 2357243, опубл. 2009) способ биологического мониторинга на основе биоиндикации, предусматривающий отбор проб водных животных, установление их численности, биомассы, видового разнообразия, границ распределения и регистрацию функциональных параметров организма, а также основных гидрологических и гидрохимических показателей, определение на их основе пространственных и временных трендов изменения индикаторных биологических параметров в градиенте экологических факторов, причем биомониторинг осуществляют непрерывно посредством многоуровневой биоиндикации с использованием нескольких уровней организации биологических систем и измерением индикаторных параметров с различной дискретностью, при этом результаты оперативной биоиндикации по физиологическим и поведенческим реакциям организма в природных условиях характеризуют изменения состояния среды в интервале от 1 ч до 6 месяцев, краткосрочной биоиндикации - по параметрам популяций отдельных видов - характеризуют диапазон от 0,5 года до 3 лет, многолетней биоиндикации на уровне сообществ оценивают изменения с интервалом 3 и более лет, оценка изменений среды осуществляется путем сравнения с фоновыми и референтными трендами индикаторных параметров, причем обнаружение достоверных различий индикаторных параметров более чем на 30% относительно референтных трендов свидетельствует об устойчивом изменении состояния среды.
Недостатком известного способа следует признать его длительность.
Наиболее близким аналогом разработанного способа можно признать способ биомониторинга водоема (автореферат диссертации Даниловой М.В. Значение кариотипов хирономид (Chironomus plumosus L и Camptochironomus tentans F) для оценки состояния водной среды. Калининград, 2011).
Указанный источник содержит следующие общие с заявленным техническим решением признаки: способ биомониторинга водоема с использованием генетического состава популяций хирономид, включающий отбор проб обитающих в водоеме хирономид, определение уровня загрязнения окружающей среды путем анализа отобранных организмов и оценки результатов анализа, причем при реализации способа в водоеме отлавливают личинки хирономид с последующей их фиксацией и приготовлением временных цитологических препаратов политенных хромосом слюнных желез личинок по ацето-орсеиновой методике, при этом о состоянии водоема судят по состоянию политенных хромосом с последующим вынесением суждения о состоянии загрязнения водоема по хромосомным индексам.
Недостатком известного способа можно признать невысокую точность.
Техническая задача, решаемая посредством использования разработанного способа, состоит в обеспечении достоверного мониторинга водоемов.
Технический результат, достигаемый при реализации способа, состоит в его упрощении при одновременном повышении точности за счет повышения точности определения показателей полиморфизма популяции хирономид в водных экосистемах.
rnrnrnrnrnrnrnrnrn
Для достижения указанного технического результата предложено использовать разработанный способ биомониторинга водоема с использованием генетического состава популяций хирономид. При реализации способа проводят отбор проб обитающих в водоеме хирономид, определение уровня загрязнения окружающей среды путем анализа отобранных организмов и оценку результатов анализа, причем в водоеме отлавливают личинки хирономид IV стадии развития, а анализ проводят путем фиксации пойманных личинок с последующим приготовлением временных цитологических препаратов политенных хромосом слюнных желез личинок по ацето-орсеиновой методике с последующим вынесением суждения о степени загрязнения водоема по хромосомным индексам. В качестве хромосомных индексов, предпочтительно, использовали среднее число гетерозиготных инверсий на особь, общее количество последовательностей дисков, количество геномных комбинаций, отношение числа последовательностей дисков к числу геномных комбинаций.
В качестве объекта исследования использованы личинки хирономиды Chironomus plumosus IV стадии развития, отлов которых производили в обследуемом водоеме. Личинок вылавливали в местах наибольшей заиленности, так как этот вид предпочитает жить в иле. При исследовании использовали личинки IV стадии развития, т.к. в этой стадии они достигают максимального размера, что облегчает исследования. Все картирование хромосом выполнено именно на этой стадии развития. Гидрологическим сачком зачерпывали со дна грунт, который промывали через крупноячеистое сито. Личинок Glyptotendipes glaucus собирали с корней и погруженных в воду листьев растений, так как это фитофильный вид, предпочитающий селиться на прибрежных растениях. Пойманных личинок фиксировали на месте отлова в растворе 96% этилового спирта и ледяной уксусной кислоты (3:1).
Временные цитологические препараты политенных хромосом слюнных желез личинок готовили по стандартной ацето-орсеиновой методике. Из 2-3 грудного сегмента фиксированной личинки в капле 40% молочной кислоты выделяли слюнные железы и окрашивали орсеином на предметном стекле в течение 30 минут. Затем железы переносили в каплю 50% молочной кислоты, где отделяли от секрета железы и разрушали, чтобы из них были извлечены хромосомы и отделены от цитоплазмы. Затем освобожденные хромосомы накрывали предметным стеклом, излишки молочной кислоты удаляли фильтровальной бумагой с легким надавливанием, чтобы при анализе получить отчетливый рисунок хромосомных дисков. По краю покровного стекла проводили прозрачным лаком, чтобы избежать высыхания препарата. Готовые временные препараты хранили в холодильнике.
Картирование хромосом Ch. plumosus проводили по системе Михайловой (плечо В), остальные плечи - по системе Кейла. Картирование G. glaucus осуществлялось по Беляниной, Дурновой, обозначения плеч использовались по Михайловой.
В качестве показателей генотипической структуры изучаемых природных популяций и экспериментальных личинок были использованы:
- - общее количество последовательностей дисков;
- - количество геномных комбинаций;
- - среднее число гетерозиготных инверсий на особь;
- - отношение числа последовательностей дисков к числу геномных комбинаций.
Была установлена зависимость состояния водоема от указанных характеристик.
Если общее количество последовательностей дисков в популяции превышает 12,4, то такой водоем считается загрязненным.
Если общее количество геномных комбинаций в популяции превышает 14,6, то такой водоем считается загрязненным.
Если число гетерозиготных инверсий на особь превышает 0,98, то такой водоем считается загрязненным.
Если отношение числа последовательностей дисков к числу геномных комбинаций ниже чем 0,85, то такой водоем считается загрязненным.
Формула изобретения
rnrnrnrnrnrnrnrnrn
1. Способ биомониторинга водоема с использованием генетического состава популяций хирономид, включающий отбор проб обитающих в водоеме хирономид, определение уровня загрязнения окружающей среды путем анализа отобранных организмов и оценку результатов анализа, отличающийся тем, что в водоеме отлавливают личинки хирономид IV стадии развития с последующей их фиксацией и приготовлением временных цитологических препаратов политенных хромосом слюнных желез личинок по ацето-орсеиновой методике, при этом о состоянии водоема судят по состоянию политенных хромосом с последующим вынесением суждения о степени загрязнения водоема по хромосомным индексам.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве хромосомных индексов используют общее количество последовательностей дисков, количество геномных комбинаций, среднее число гетерозиготных инверсий на особь, а также отношение числа последовательностей дисков к числу геномных комбинаций.
Имя изобретателя: ДАНИЛОВА М.В. Значение кариотипов хирономид (Chironomus plumosus L. и Camptochironomus tentans F.) для оценки состояния водной среды. Автореф. дисс. канд. биол. наук. Калининград, 2011, 23 с. ГОЛЫГИНА В.В. и др. Хирономиды - модельный объект кариологических исследований. Методические материалы (методическое пособие) к летней академической практикепо цитологии для студентов 2-го курса биологического отделения. Новосибирск, НГУ, 2013, 46 с. ЧУБАРЕВА Л.А. и др. Методика приготовления цитологических препаратов для кариологического изучения двукрылых насекомых. Новые данные по кариосистематике двукрылых насекомых. Ленинград: Из-во Зоол. инст., 1980, 87 с. MICHAILOVA P. et al. Polytene chromosomes of Chironomidae (Diptera) as a bioassay of trace-metal-induced genome instability. Fauna norvegica. 2012 Oct 17; 31: 227-234 [Найдено 04.06.2015] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://www.ntnu.no/ojs/index.php/fauna_norvegica/article/view/1355. Имя патентообладателя: Данилова Мария Васильевна (RU) Почтовый адрес для переписки: 125368, Москва, а/я 84, Щитову А.А. Дата начала отсчета действия патента: 13.05.2014
Разместил статью: miha111
Дата публикации: 9-12-2015, 15:44
Получившие значительное распространение на практике, распределительные коллекторы Oventrop предназначены для того, чтобы в централизованном и упорядоченном режиме распределять нагретую воду (теплоноситель) между различными приборами, входящими в систему отопления. Как правило, это применяется в жилых зданиях: чаще всего – в частных домах....
Очистное оборудование в виде автономных канализаций, благодаря которому производится очистка хозяйственно-бытовых стоков, незаменимо для людей, предпочитающих жить в загородном доме, наслаждаясь свежим воздухом и покоем. С «Топас» жизнь в коттедже или на даче по комфорту ничем не уступает проживанию в современной городской квартире, подключенной к центральной системе канализации......
Никакого начала не было - безконечная вселенная существует изначально, априори как безконечное пространство, заполненное энергией электромагнитных волн, которые также существуют изначально и материей, которая состоит из атомов и клеток, которые состоят из вращающихся ЭМ волн.
В вашей теории есть какие-то гравитоны, которые состоят из не известно чего. Никаких гравитонов нет - есть магнитная энергия, гравитация - это магнитное притяжение.
Никакого начала не было - вселенная, заполненная энергией ЭМ волн , существует изначально.
То есть, никакой энергетической проблемы не решилось от слова совсем. Так как для производства металлического алюминия, тратится уймище энергии. Производят его из глины, оксида и гидроксида алюминия, понятно что с дико низким КПД, что бы потом его сжечь для получения энергии, с потерей ещё КПД ????
Веселенькое однако решение энергетических проблем, на такие решения никакой энергетики не хватит.
Вместо трудновыполнимых колец, я буду использовать,цилиндрические магниты, собранные в кольцевой пакет, в один, два или три ряда. На мой взгляд получиться фрактал 1 прядка. Мне кажется, что так будет эффективней, в данном случае. И в место катушек, надо попробывать бифиляры или фрактальные катушки. Думаю, хороший будет эксперимент.
Проблема в том, что человечество зомбировано религией, что бог создал всё из ничего. Но у многих не хватает ума подумать, а кто создал бога? Если бога никто не создавал - значит он существует изначально. А почему самому космосу и самой вселенной как богу-творцу - нельзя существовать изначально?
Единственным творцом материального мира, его составной субстанцией, источником движения и самой жизни является энергия космоса, носителем которой являются ЭМ волны, которыми как и полагается богу заполнено всё космическое пространство, включая атомы и клетки.
От углеводородов кормится вся мировая финансовая элита, по этому они закопают любого, кто покусится на их кормушку. Это один. Два - наличие дешевого источника энергии сделает независимым от правительств стран все население планеты. Это тоже удар по кормушке.
Вначале было то, что существует изначально и никем не создавалось. А это
- безграничное пространство космоса
- безграничное время протекания множества процессов различной длительности
- электромагнитная энергия, носителем которой являются ЭМ волны, которыми как и положено творцу (богу) материального мира, заполнено всё безграничное пространство космоса, из энергии ЭМВ состоят атомы и клетки, то есть материя.
Надо различать материю и не материю. Материя - это то, что состоит из атомов и клеток и имеет массу гравитации, не материя - это энергия ЭМ волн, из которых и состоит материя
Способ биологической оценки токсичности морской среды относится к биологическим способам оценки экологического риска и анализа загрязнения водной среды и может быть использован в марикультуре, водной токсикологии, рыбоводстве. В способе в качестве биологических тест-объектов используются личинки черноморских рыб атерины (Atherina hepsetus, Atherina mochon pontica), которые помещаются в тестируемую среду и в стерилизованную морскую воду. Контролем служит тестируемая среда и стерилизованная...
+), в растворе и эталонного мутагена (К м
Получившие значительное распространение на практике, распределительные коллекторы Oventrop предназначены для того, чтобы в централизованном и упорядоченном режиме распределять нагретую воду (теплоноситель) между различными приборами, входящими в систему отопления. Как правило, это применяется в жилых зданиях: чаще всего – в частных домах....
Очистное оборудование в виде автономных канализаций, благодаря которому производится очистка хозяйственно-бытовых стоков, незаменимо для людей, предпочитающих жить в загородном доме, наслаждаясь свежим воздухом и покоем. С «Топас» жизнь в коттедже или на даче по комфорту ничем не уступает проживанию в современной городской квартире, подключенной к центральной системе канализации......
Никакого начала не было - безконечная вселенная существует изначально, априори как безконечное пространство, заполненное энергией электромагнитных волн, которые также существуют изначально и материей, которая состоит из атомов и клеток, которые состоят из вращающихся ЭМ волн.В вашей теории есть какие-то гравитоны, которые состоят из не известно чего. Никаких гравитонов нет - есть магнитная энергия, гравитация - это магнитное притяжение.
